若要制备某种细菌的基因组文库，需首先将其基因组DNA片段分别导人到大肠杆菌细胞中，某科研小...

若要制备某种细菌的基因组文库，需首先将其基因组DNA片段分别导人到大肠杆菌细胞中，某科研小组设计的实验流程见下图, 回答下列问题：

（1）为制备基因组文库，步骤①中的成分X应为该细菌所有的______（填“mRNA”、“DNA” 或“cDNA”）。步骤②中的质粒含有氨苄青霉素抗性基因，选用该基因的作用是________。

（2）限制酶Sau3A I识别序列和切割位点为BamH I的识别序列和切割位点为步骤③中经两种不同限制酶分别切割后的片段可以连接起来，原因是________。

（3）步骤⑤中应选用对氨苄青霉素 ________________（填“敏感”或“不敏感”）的大肠杆菌作为受体菌，转化前通常先用 ____________________处理受体菌，使其处于感受态。

（4）科研小组采用下表方案进行转化，并检测转化是否成功。

一段时间后从上述三组取样，分别涂布到含有氨苄青霉素的培养基进行培养，观察是否有菌落的生长。若 _________________________________________，说明转化成功且结果可信。

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若要制备某种细菌的基因组文库，需首先将其基因组DNA片段分别导入到大肠杆菌细胞中，某科研小组设计的实验流程见下图：

回答下列问题：

（1）为制备基因组文库，步骤①中的成分X应为该细菌所有的________________（填“mRNA”、“DNA”或“cDNA” ）。步骤②中的质粒含有氨苄青霉素抗性基因/选用该基因的作用是____________________。

（2）限制酶Sau3AI和BamHI的识别序列和切割位点为、，步骤③中经两种不同限制酶分别切割后的片段可以连接起来，原因是____________________________。

（3）步骤⑤中应选用对氨苄青霉素____________（填“敏感”或“不敏感”）的大肠杆菌作为受体菌，转化前通常先用_____________处理受体菌，使其处于感受态。

（4）科研小组采用下表方案进行转化，并检测转化是否成功。

一段时间后从上述三组取样，分别涂布到含有氨苄青霉素的培养基进行培养，观察是否有菌落的生长。

①三组实验菌落较多且相差不大，说明有杂菌污染或__________________________；

②若__________________________，说明转化成功且结果可信。

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科研人员利用基因工程技术构建蜂鸟的基因组文库，研究β-球蛋白基因的功能，流程如图1所示。

（1）首先需要用同种__________处理蜂鸟的DNA和质粒，并用DNA连接酶处理，得到__________，再与经__________处理得到的感受态大肠杆菌混合。将混合物接种到添加__________的培养基上培养，一段时间后，选择颜色为__________（填“白色”或“蓝色”）的菌落进一步培养，获得导入蜂鸟DNA片段的大肠杆菌。用上述方法可以获得导入蜂鸟不同基因的大肠杆菌，构建出蜂鸟的__________。

（2）科研人员可从获得的大肠杆菌中提取__________，利用图2中的__________引物组合进行PCR，以进一步研究蜂鸟β-球蛋白基因的功能。

（3）导入大肠杆菌的蜂鸟β-球蛋白基因并未表达正常功能的蛋白质，可能的原因是__________。（写出一项即可）

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下图中图1表示某细菌的抗除草剂基因的部分片段，其中a、b、c分别表示该基因片段中特定的碱基对。图2表示该细菌细胞内DNA自我复制及控制多肽合成的过程。请分析回答下列问题：

(1)在真核细胞内，图2所示的①②③过程中发生在同一场所的是______(选填序号)。过程①的产物分子中只有一条单链是新合成的，因此这种合成方式被称为____________。过程②需要________催化mRNA合成。完成③时，一般在一条mRNA上会结合多个核糖体，其意义是_________________________。

(2)基因突变是由于__________________，导致基因结构的改变。若图1中基因位点a的碱基对变为，位点b的碱基对变为，位点c的碱基对变为，则其中位点________的突变对生物性状表现无影响。

(3)若将此抗除草剂基因转入大豆根细胞中，常用　　　　　　 技术对抗除草剂基因进行扩增。欲检测转基因是否成功转入，应将转入目的基因的细胞培养在含__________的全营养固体培养基中。

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(11分)下图1表示某细菌的抗除草剂基因的部分片段，其中a、b、c分别表示该基因片段中特定的碱基对。图2表示该细菌细胞内DNA自我复制及控制多肽合成的过程。请分析回答：

图1                                                                            图2

(1)在真核细胞内，核基因控制的该过程发生在同一场所的是________(选填序号)。过程②需要________催化。完成③时，一般在一条mRNA上会结合多个核糖体，其意义是________

________。

(2)基因突变是由于碱基的增添、缺失和替换，导致基因结构的改变。若图1中基因位点a

的碱基对变为，位点b的碱基对变为，位点c的碱基对变为，则其中位点________

的突变对生物性状表现无影响，其原因是________。

(3)若将此抗除草剂基因转入大豆根细胞中，欲检测转基因是否成功，应将转入目的基因的细胞培养在含________的全营养固体培养基中。抗除草剂基因能在大豆细胞中表达说明________。

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农杆菌侵染植物细胞后，能将Ti质粒上的T­DNA插入植物基因组中。图示为利用农杆菌培育转基因植物的基本流程，请据图回答下列问题：

（1）剪除Ti质粒的某些片段、替换复制原点O与添加抗生素的抗性基因T的过程①中，需用多种限制酶处理，原因是_________________________________________，需用________（填“E.coliDNA连接酶”或“T4DNA连接酶”）“缝合”双链DNA片段的平末端。

（2）目的基因是指________________和一些具调控作用的因子。由过程②形成的基因表达载体中，目的基因的首端具有________识别和结合的部位。

（3）过程③常用________处理使农杆菌成为感受态细胞。抗生素抗性基因T的作用是_____________________________________________________________________。

（4）过程④获取原生质体的过程中，应用__________________处理植物细胞。

（5）在过程⑤⑥前，常采用________________技术检测农杆菌和愈伤组织细胞中是否含有目的基因。

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科研人员以抗四环素基因为标记基因，通过基因工程的方法让大肠杆菌生产鼠的β-珠蛋白，治疗鼠的镰刀型细胞贫血症。下列相关实验设计中，不合理的是（　　 ）

A．利用小鼠DNA分子通过PCR克隆出β-珠蛋白基因的编码序列

B．用编码序列加启动子、抗四环素基因等元件来构建表达载体

C．用Ca2＋处理大肠杆菌后，将表达载体导入具有四环素抗性的大肠杆菌中

D．用含有四环素的培养基筛选出已经导入β-珠蛋白编码序列的大肠杆菌

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科研人员以抗四环素基因为标记基因，通过基因工程的方法让大肠杆菌生产鼠的β-珠蛋白，治疗鼠的镰刀型细胞贫血症。下列相关实验设计不合理的是(　　 )

A. 从小鼠DNA分子上克隆出β-珠蛋白基因的编码序列

B. 用编码序列加调控序列、抗四环素基因等元件来构建基因表达载体

C. 用Ca2＋处理大肠杆菌后，将基因表达载体导入具有四环素抗性的大肠杆菌中

D. 用含有四环素的培养基筛选出已经导入β-珠蛋白编码序列的大肠杆菌

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科研人员以抗四环素基因为标记基因，通过基因工程的方法让大肠杆菌生产鼠的β-珠蛋白，治疗鼠的镰刀型细胞贫血症。下列相关实验设计不合理的是(　　 )

A.从小鼠DNA分子上克隆出β-珠蛋白基因的编码序列

B.用编码序列加调控序列、抗四环素基因等元件来构建基因表达载体

C.用Ca2＋处理大肠杆菌后，将基因表达载体导入具有四环素抗性的大肠杆菌中

D.用含有四环素的培养基筛选出已经导入β-珠蛋白编码序列的大肠杆菌

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下图1表示某细菌的抗除草剂基因的部分片段，其中a、b、c分别表示该基因片段中特定的碱基对。图2表示该细菌细胞内DNA自我复制及控制多肽合成的过程。下列有关说法正确的是（　　 ）

A．图2中的①②③分别指的是复制、转录和翻译，在真核细胞内，①②只能发生在细胞核内

B．过程②需要DNA聚合酶的催化

C．完成③时，一般在一条mRNA上会结合多个核糖体，其意义是提高翻译的效率（短时间内合成大量蛋白质）

D．若将此抗除草剂基因转入大豆根细胞中，欲检测转基因是否成功，应将转入目的基因的细胞培养在含青霉素的全营养固体培养基中

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