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λ噬菌体有极强的侵染能力,能在细菌中快速进行DNA复制,产生子代噬菌体,最终导致细菌破裂(称为溶菌状态);或者整合到细菌基因组中潜伏起来,不产生子代噬菌体(称为溶原状态)。在转基因技术中常用λ噬菌体构建基因克隆载体,使其在受体细菌中大量扩增外源DNA,以备研究使用。相关操作如下图所示,请回答:

(1)在构建基因克隆载体时,可被噬菌体蛋白质包装的DNA长度约为36~51kb,则经人工改造后得到的λgtl0载体可插入的外源DNA的最大长度为____________kb。人工改造载体过程中,为获得较大的插入能力,可删除λ噬菌体DNA组成中的____________序列以缩短载体长度。

(2)构建基因克隆载体时,需用到的酶是__________________。λ噬菌体DNA上通常没有适合的标记基因,因此人工改造时需加装适合的标记基因,如下图λgtl0载体中的imm434基因,该基因编码一种阻止λ噬菌体进入溶菌状态的阻遏物。外源DNA的插入位置应位于imm434基因__________________(之中/之外),使经侵染培养后的受体菌处于____________状态,表明已成功导入目的基因。

(3)合成噬菌体所需的小分子原料主要是____________。分离纯化噬菌体重组DNA时,将经培养适宜时间的大肠杆菌—噬菌体混合培养液超速离心,从____________(上清液、沉淀物)获得噬菌体。

高二生物非选择题困难题

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