研究人员利用PCR技术扩增了目的基因,并培育了能合成凝乳酶的转基因酵母菌。请结合下图回答:
(1)利用PCR技术扩增目的基因原理_____________________。左图中引物为单链DNA片段,它是根据___________________的脱氧核苷酸序列合成的。从理论上推测,第2轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为________。
(2)右图所示的基因表达载体中的URA3基因能编码乳清苷5-磷酸脱羧酶,该酶能催化酵母菌尿嘧啶的合成,若酵母菌缺乏乳清苷5-磷酸脱羧酶,就无法生长,除非在培养基中加入尿嘧啶。利用URA3基因作为__________基因来筛选转化成功的酵母菌,要选择_______________的酵母菌作为受体细胞,所使用培养基___________(填“需要”或“不需要”)添加尿嘧啶。
(3)奶酪生产中的凝乳酶是一种分泌蛋白。工业生产过程中,________(能/否)选用大肠杆菌作为受体细胞表达出凝乳酶?原因是______________________。
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【生物——选修3:现代生物科技专题】奶酪生产中的凝乳酶是一种分泌蛋白。研究人员利用PCR技术扩增了目的基因,并培育了能合成凝乳酶的转基因酵母菌。请结合下图回答:
(1)利用PCR技术扩增目的基因原理与细胞内DNA复制类似(如左图所示)。图中引物为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础。从理论上推测,第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为________。PCR反应体系的主要成分应包含:扩增缓冲液(含ATP和Mg2+)、水、4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、引物和___________。
(2)为了食品安全,右图所示的表达载体需用___________酶切除抗性基因的部分片段,再用___________酶使表达载体重新连接起来。选用缺失URA3基因的酵母菌作为受体细胞(必须在含有尿嘧啶的培养基中才能存活),为了筛选出成功导入表达载体的酵母菌,所使用的培养基___________(填“需要”或“不需要”)添加尿嘧啶。
(3)工业生产过程中,选用大肠杆菌作为受体细胞不能正常表达出凝乳酶,而选用酵母菌则能,原因是酵母菌含有______________________。
(4)测定凝乳酶基因转录的mRNA序列,测得从起始密码子到终止密码子之间的序列为1201个碱基,经判断这段序列的测定是错误的,为什么?_______________________。
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研究人员利用PCR技术扩增了目的基因,并培育了能合成凝乳酶的转基因酵母菌。请结合下图回答:
(1)利用PCR技术扩增目的基因原理_____________________。左图中引物为单链DNA片段,它是根据___________________的脱氧核苷酸序列合成的。从理论上推测,第2轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为________。
(2)右图所示的基因表达载体中的URA3基因能编码乳清苷5-磷酸脱羧酶,该酶能催化酵母菌尿嘧啶的合成,若酵母菌缺乏乳清苷5-磷酸脱羧酶,就无法生长,除非在培养基中加入尿嘧啶。利用URA3基因作为__________基因来筛选转化成功的酵母菌,要选择_______________的酵母菌作为受体细胞,所使用培养基___________(填“需要”或“不需要”)添加尿嘧啶。
(3)奶酪生产中的凝乳酶是一种分泌蛋白。工业生产过程中,________(能/否)选用大肠杆菌作为受体细胞表达出凝乳酶?原因是______________________。
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凝乳酶能够使乳汁中的蛋白质凝聚形成奶酪,主要来源为未断奶的小牛胃粘膜。随着社会发展,传统来源的凝乳酶已不能满足生产需要。研究人员利用PCR技术扩增了目的基因,并培育了能合成凝乳酶的转基因酵母菌,从而获得足够的凝乳酶。回答下列问题:
(1)利用PCR技术扩增目的基因的前提条件是要有____________用来合成引物。PCR反应体系的主要成分应包含:扩增缓冲液(含ATP和Mg2+)、4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、引物和_____________。
(2)凝乳酶基因可从构建的凝乳酶基因组文库中获取,也可以从其cDNA文库中获取,从前者获取的凝乳酶基因__________(填“含有”或“不含有”)启动子。
(3)利用PCR技术扩增目的基因后需要构建基因表达载体,其目的是___________。
(4)构建基因表达载体过程中需要用__________(酶)处理。目的基因转录过程中,__________能使转录在所需要的地方停止下来。
(5)分子水平上检测目的基因是否成功导入酵母菌的方法是___________________。
(6)工业生产过程中,使用酵母菌作为受体,而不选用大肠杆菌的原因是_______。
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凝乳酶能够使乳汁中的蛋白质凝聚形成奶酪,主要来源为未断奶的小牛胃粘膜。随着社会发展,传统来源的凝乳酶已不能满足生产需要。研究人员利用PCR技术扩增了目的基因,并培育了能合成凝乳酶的转基因酵母菌,从而获得足够的凝乳酶。回答下列问题:
(1)利用PCR技术扩增目的基因的前提条件是要有____________用来合成引物。PCR反应体系的主要成分应包含:扩增缓冲液(含ATP和Mg2+)、4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、引物和_____________。
(2)利用PCR技术扩增目的基因后需要构建基因表达载体,其目的是___________。构建的基因表达载体中通常含有标记基因,其作用是__________________。
(3)分子水平上检测目的基因是否成功导入酵母菌的方法是___________________。
(4)工业生产过程中,使用酵母菌作为受体,而不选用大肠杆菌的原因是_____________________________________。
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(生物—选修3 现代生物科技专题)
下图为科学家培育能生产人血清白蛋白乳腺生物反应器的过程,据图回答下列问题:
(1)利用PCR技术扩增目的基因,前提是______________,以便据此合成________。一个DNA分子三轮复制以后,含有两种引物的DNA分子有____个。
(2)得到的转基因母牛通过有性生殖产生的雌性后代不一定能产生人血清白蛋白,为了保证其遗传性状不变,科学家可通过_______技术保证其优良性状,该技术的成功证明了_______。该技术的最后一个环节是_______,其优势是_____________________。若想提高同卵双胎或多胎的概率,可利用_______技术。
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研究人员利用小鼠的单倍体ES细胞(只有一个染色体组),成功培育出转基因小鼠。其主要技术流程如图所示,请分析回答下列问题:
(1)利用PCR技术可以扩增目的基因,PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP(包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP)、引物外,还应含有____;引物应选用下图中____(填图中字母)。
(2)在基因工程操作步骤中,过程①②称为 ___。已知氨苄青霉素不能有效杀死小鼠细胞,而一定浓度的G418能有效杀死不具有Neo′的小鼠细胞。结合上图推测, 过程①选用的两种限制酶是 ___(填图中的编号),③处的培养液应添加____(填“氨苄青霉素”或“G418”)。
(3)图中桑椹胚需通过____技术移入代孕小鼠子宫内继续发育,进行该操作前需对受体小鼠进行____处理。
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请回答下列与基因工程、细胞工程、胚胎工程和生态工程有关的问题:
(1)利用PCR技术扩增目的基因,前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成______。在培育抗虫棉的过程中,我国科学家用独创的______法将目的基因导入了棉花细胞。检测抗虫棉是否培育成功的具体方法是______。
(2)胚胎工程的最后一道工序是______,进行该工序的优势是______。
(3)在治疗癌症时,把抗癌细胞的单克隆抗体与放射性同位素相结合,制成“生物导弹”,借助单克隆抗体的______作用,将药物带到癌细胞位置,在原位将其杀死,这体现“生物导弹”______的优点。
(4)我国西北一些地区年降雨量较少,适宜种植灌木和草,却被硬性规定种植属于乔木的杨树,致使许多地方的杨树长成半死不活状,结果防护林成为残败的“灰色长城”。其失败的原因主要是违背了______原理。
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下图为转基因抗病毒马铃薯培育过程图,请据图回答有关问题:
(1)PCR技术利用的基本原理是_________。利用该技术扩增目的基因(子链的延伸方向从→),应选择图中的引物_________(填字母)与模板DNA结合。
(2)在构建基因表达载体时,需要的工具是__________________。
(3)重组细胞经过G_________、H_________过程成功地培育出了转基因抗病毒马铃薯植株。
(4)制造抗病毒植株的人工种子可利用植物组织培养技术得到的_________等材料经过人工薄膜包装得到。
(5)研究表明,转基因植物可以通过花粉将外源基因扩散到其他植物,从而对生态环境造成潜在的危害。请你提出一种解决此问题的合理生物学方法:__________________。
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如图为科学家培育能生产人血清白蛋白乳腺生物反应器的过程,据图回答下列问题:
(1)利用PCR技术扩增目的基因,前提是________,以便据此合成________.一个DNA分子三轮复制以后,含有两种引物的DNA分子有________个.
(2)得到的转基因母牛通过有性生殖产生的雌性后代不一定能产生人血清白蛋白,为了保证其遗传性状不变,科学家可通过________技术保证其优良性状,该技术的成功证明了________.该技术的最后一个环节是________,其优势是________.若想提高同卵双胎或多胎的概率,可利用________技术.
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研究人员将乙肝病毒的表面抗原(HBsAg)基因转入番茄幼叶细胞中,获得能产生乙肝疫苗的番茄植株。回答下列问题:
(1)利用PCR技术扩增HBsAg基因时,目的基因DNA受热变性后的单链与引物互补序列结合,在_______酶的作用下进行延伸。设计的引物含有ClaⅠ酶切位点和SacⅠ酶切位点,用作载体的DNA分子________(填“含有”或“不含有”)ClaⅠ酶切位点和SacⅠ酶切位点,理由是________________。
(2)将HBsAg基因导入番茄幼叶细胞最常用的方法是______________,该方法可以使目的基因插入到细胞中______________的DNA上。
(3)可利用植物组织培养技术获得转基因番茄植株,该技术利用的原理是________________。
(4)通过电镜对番茄果实提取物进行观察,发现了HBsAg颗粒,说明目的基因导入受体细胞后_________。用获得的转基因番茄果实饲喂小鼠,如果在小鼠血清中检测到_____________,说明转基因植物疫苗可口服。
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