研究人员将抗盐基因转入普通烟草培育出抗盐烟草,该过程所用的质粒与含抗盐基因的DNA上相关限制酶的酶切位点分别如图1、图2所示。限制性核酸内切酶BamHI、BclⅠ、Sau3AⅠ、HindⅢ,它们识别的碱基序列和酶切位点分别为G↓GATCC、T↓GATCA、↓GATC、A↓AGCTT。图3表示该过程中利用含目的基因的农杆菌进行转化作用的示意图。请回答下列问题。
(1)图1质粒中没有标注出来的基本结构是 。
(2)用图中质粒和目的基因构建基因表达载体时,应选用限制酶 切割质粒,选用 限制酶切割含目的基因的DNA片段。限制酶切断的是DNA分子中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的 键。
(3)将上述切开的质粒与目的基因混合,加入DNA连接酶连接后,导入受体受体细胞,受体细胞的类型(对两种抗生素表现出抗性R或敏感性S)包含 (不考虑基因突变)。
①XR、YR ②XR、YS ③XS、YR ④XS、YS
(4)将图3过程 (填序号)中发生了基因重组,过程②、③所用的培养基中,通常要调控好 两类激素的比例。
(5)从个体水平鉴定抗盐转基因烟草是否培育成功的方法是 。
高三生物综合题困难题
研究人员将抗盐基因转入普通烟草培育出抗盐烟草,该过程所用的质粒与含抗盐基因的DNA上相关限制酶的酶切位点分别如图1、图2所示。限制性核酸内切酶BamHI、BclⅠ、Sau3AⅠ、HindⅢ,它们识别的碱基序列和酶切位点分别为G↓GATCC、T↓GATCA、↓GATC、A↓AGCTT。图3表示该过程中利用含目的基因的农杆菌进行转化作用的示意图。请回答下列问题。
(1)图1质粒中没有标注出来的基本结构是 。
(2)用图中质粒和目的基因构建基因表达载体时,应选用限制酶 切割质粒,选用 限制酶切割含目的基因的DNA片段。限制酶切断的是DNA分子中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的 键。
(3)将上述切开的质粒与目的基因混合,加入DNA连接酶连接后,导入受体受体细胞,受体细胞的类型(对两种抗生素表现出抗性R或敏感性S)包含 (不考虑基因突变)。
①XR、YR ②XR、YS ③XS、YR ④XS、YS
(4)将图3过程 (填序号)中发生了基因重组,过程②、③所用的培养基中,通常要调控好 两类激素的比例。
(5)从个体水平鉴定抗盐转基因烟草是否培育成功的方法是 。
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科学家从某细菌中提取抗盐基因,转入烟草并培育成转基因抗盐烟草。下图是转基因抗盐烟草的培育过程,含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请分析回答下列问题:
(1)在该过程中,研究人员首先获取了抗盐基因(目的基因),并采用 技术对目的基因进行扩增,该技术需要的条件是 、酶、原料、模板,该技术必须用 酶;然后构建基因表达载体,基因表达载体中除了具有目的基因、启动子和终止子之外,还需具有 。
(2)用图中的质粒和目的基因构建重组质粒,不能使用SmaⅠ酶切割,原因是 。图中①②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化,应选用 酶对外源DNA、质粒进行切割。
(3)为确定转基因抗盐烟草是否培育成功,既要用放射性同位素标记的 作探针进行分子杂交检测,又要在个体水平上鉴定,后者具体过程是 __________。
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科学家从某细菌中提取抗盐基因,转入烟草并培育成转基因抗盐烟草。下图是转基因抗盐烟草的培育过程,含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请分析回答下列问题。
(1)在该过程中,研究人员首先获取了抗盐基因(目的基因),并采用__________技术对目的基因进行扩增,该技术需要的条件是____、酶、原料、模板,该技术必须用_______________________________酶;然后构建基因表达载体,基因表达载体中除了具有目的基因、启动子和终止子之外,还需具有________。
(2)用图中的质粒和目的基因构建重组质粒,不能使用SmaⅠ酶切割,原因是_____________________________________________。图中①②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化,应选用_____________酶对外源DNA、质粒进行切割。
(3)为确定转基因抗盐烟草是否培育成功,既要用放射性同位素标记的___________作探针进行分子杂交检测,又要在个体水平上鉴定,后者具体过程是____________________。
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科学家从某细菌中提取抗盐基因,转入烟草并培育成转基因抗盐烟草。如图是转基因抗盐烟草的培育过程,含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请分析回答:
(1)①过程获得的抗盐基因可用PCR技术进行扩增,该技术必须用________酶,所需的原料是______________。
(2)已知几种限制酶识别序列及其切割位点如表:
限制酶 | BamHⅠ | HindⅢ | EcoRⅠ | SmaⅠ |
识别序列 及切割位点 | G↓GATCC CCTAGG↑ | AA↓GCTT TTCGAA↑ | GA↓ATTC CTTAAG↑ | CCCG↓GG GGGC↑CC |
用图中的质粒和目的基因构建重组质粒,不能使用Sma Ⅰ酶切割,原因是______________________________。图中①②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化,应选用____________________酶对外源DNA、质粒进行切割。
(3)图中⑤、⑥依次表示组织培养过程中抗盐烟草细胞的________、________过程。
(4)为确定转基因抗盐烟草是否培育成功,既要用放射性同位素标记的________作探针进行分子杂交检测,又要在个体水平上鉴定,后者具体过程是_____________________________________
___________________________________________________________________________________。
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(12分)普通烟草转入抗盐基因培育抗盐烟草的过程如下图所示。已知含抗盐基因的DNA和质粒上均有salⅠ、HindⅢ、BamHⅠ酶切位点,质粒上另有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。请回答问题:
1.构建重组质粒时,应选用限制酶____________对____________进行切割,以保证它们定向连接。限制酶切断的是DNA分子中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的键,具体说就是____________和____________之间的键。
2.如果目的基因直接注入烟草细胞,一般会被烟草细胞____________。质粒的作用是____________。
3.切割后的目的基因与质粒由____________酶连接成重组质粒。筛选导入重组质粒的细菌,应在其培养基中加入___________,理由是__________________。
4.烟草细胞经_______________形成愈伤组织。某研究性学习小组以愈伤组织为材料进行了下列实验:一组在培养基中加30%的蔗糖,另一组不加蔗糖,接种后,每组再分成两个小组,分别在光下和黑暗中培养。1个月后,观察其生长、分化情况,结果见下表:
培养条件 | 加蔗糖 | 不加蔗糖 |
光照 | 正常生长,分化 | 不生长,死亡 |
黑暗 | 只生长,不分化 | 不生长,死亡 |
你能得出什么结论?______________________________________。
5.从个体水平鉴定抗盐转基因烟草是否培育成功的方法是___________________。
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[生物——选修3:现代生物科技专题]科学家从某细菌中提取抗冻基因,转入番茄并培育出抗冻番茄。下图是转抗冻基因番茄的培育过程,含抗冻基因的DNA片段和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。分析回答问题:
(1)若要获得抗冻基因,可以从细菌中提取;也可以通过分析抗冻蛋白 的序列推测基因的结构,进而人工合成抗冻基因。对获得的抗冻基因可用 技术进行扩增。
⑵上述两种途径获得的抗冻基因 (填“是”或“否”)一定相同,原因是 。
(3)用图中的质粒和抗冻基因构建重组质粒,不能使用SmaI酶切割,原因是 。图中①②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化,应选用 酶对外源DNA、质粒进行切割。
(4)图中过程⑤表示 。
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科学家从某细菌中提取抗冻基因,转入番茄并培育出抗冻番茄。下图是转抗冻基因番茄的培育过程,含抗冻基因的DNA片段和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。分析回答问题:
(1)若要获得抗冻基因,可以从细菌中提取;也可以通过分析抗冻蛋白____________的序列推测基因的结构,进而人工合成抗冻基因。对获得的抗冻基因可用____________技术进行扩增。
⑵上述两种途径获得的抗冻基因____________ (填“是”或“否”)一定相同,原因是________________________________________________________________________。
(3)用图中的质粒和抗冻基因构建重组质粒,不能使用SmaI酶切割,原因是______________。图中①②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化,应选用_____________酶对外源DNA、质粒进行切割。
(4)图中过程⑤表示______________________________。
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下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点。
下图是转基因抗病香蕉的培育过程,含目的基因的外源DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题:
(1) 用图中的质粒和目的基因构建重组质粒,不能使用SmaI酶切割,原因__________________________________________。
(2) 构建含目的基因的重组质粒A时,选 用 BamhHI 和HindⅢ酶对_______和 _______进行切割,可以防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化。
(3) ①〜⑤中存在碱基互补配对的是____________。
(4) 香蕉组织细胞具有__________,因此,可以利用组织培养技术将导入目的(抗病)基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中④、⑤依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的_________、____________。培养皿中的培养基除添加营养物质外,还需要添加_________和__________以诱导外植体完成④、⑤生理过程,培养成完整的植物体。在形成愈伤组织的过程中,细胞的新陈代谢类型是_____________。
(5) 如何检测图示过程最终是否取得成功?____________________________。
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下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点。
下图是转基因抗病香蕉的培育过程,含目的基因的外源DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题:
(1) 用图中的质粒和目的基因构建重组质粒,不能使用SmaI酶切割,原因是__________________________________________。
(2) 构建含目的基因的重组质粒A时,选 用 BamhHI 和HindⅢ酶对_______和 _______进行切割,可以防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化。
(3) ①〜⑤中存在碱基互补配对的是____________。
(4) 香蕉组织细胞具有__________,因此,可以利用组织培养技术将导入目的(抗病)基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中④、⑤依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的_________、____________。培养皿中的培养基除添加营养物质外,还需要添加_________和__________以诱导外植体完成④、⑤生理过程,培养成完整的植物体。在形成愈伤组织的过程中,细胞的新陈代谢类型是_____________。
(5) 如何检测图示过程最终是否取得成功?____________________________。
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下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点。
下图是转基因抗病香蕉的培育过程,含目的基因的外源DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题:
(1) 用图中的质粒和目的基因构建重组质粒,不能使用SmaI酶切割,原因是__________________________________________。
(2) 构建含目的基因的重组质粒A时,选 用 BamhHI 和HindⅢ酶对_______和 _______进行切割,可以防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化。
(3) ①?⑤中存在碱基互补配对的是____________。
(4) 香蕉组织细胞具有__________,因此,可以利用组织培养技术将导入目的(抗病)基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中④、⑤依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的_________、____________。培养皿中的培养基除添加营养物质外,还需要添加_________和__________以诱导外植体完成④、⑤生理过程,培养成完整的植物体。在形成愈伤组织的过程中,细胞的新陈代谢类型是_____________。
(5) 如何检测图示过程最终是否取得成功?____________________________。
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