利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似(如图所示)。图中引物为单链DNA...

利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似(如图所示)。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。下列叙述正确的有(　　)

A. 用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列

B. 设计引物时需要避免引物之间形成碱基互补配对而造成引物自连

C. 退火温度过高可能导致PCR反应得不到任何扩增产物

D. 第四轮循环产物中同时含有引物A和引物B的DNA片段所占的比例为15/16

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利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。下列叙述错误的是

A. 用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列

B. 设计引物时需要避免引物之间形成碱基互补配对而造成引物自连

C. 退火温度过高可能导致PCR反应得不到任何扩增产物

D. 第四轮循环产物中同时含有引物A和引物B的DNA片段所占的比率为15/16

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利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。下列叙述错误的是

A. 用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列

B. 设计引物时需要避免引物之间形成碱基互补配对而造成引物自连

C. 退火温度过高可能导致PCR反应得不到任何扩增产物

D. 第四轮循环产物中同时含有引物A和引物B的DNA片段所占的比率为15/16

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请回答基因工程方面的有关问题：

(1)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。  图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。

①从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为________。

②在第________轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。

(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物（只标注了部分碱基序列）都不合理（如下图），请分别说明理由。

①第1组：引物I和引物Ⅱ局部发生碱基互补配对而失效；  ②第2组：________。

(3) PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能，这是因为________。

(4)用限制酶EcoRV、Mbol单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如下图(1 kb

即1000个碱基对)，请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、Mbol的切割位点。

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请回答基因工程方面的有关问题:

(1)利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。图中引物为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础。

①从理论上推测,第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为　　 。

②在第　　 轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。

(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理(如下图),请分别说明理由。

①第1组:　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 ;

②第2组:　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

(3) PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶,下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能,这是因为　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

(4)用限制酶EcoRV、MboⅠ单独或联合切割同一种质粒,得到的DNA片段长度如下图(1 kb即1 000个碱基对),请画出质粒上EcoRV、MboⅠ的切割位点。

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利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。以下叙述错误的是

A. 由原来的母链为模板合成的两个新DNA分子中，只含有引物A或引物B

B. 推测第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为1/8

C. 变性过程中被切断的是DNA分子内碱基对之间的氢键

D. PCR与细胞内DNA复制相比所需酶的最适温度较高

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（10分）请回答基因工程方面的有关问题：

(1)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。  图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。

①从理论上推测，第四轮循环产物中只含有引物A，不含有引物B的DNA片段所占的比例为______。

②至少完成_____轮循环，才能获得两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。

(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的一组引物（只标注了部分碱基序列）是不符合要求的（如下图），请说明理由____________________________________________。

(3) PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的  功能，这是因为________________________________________。

(4)用限制酶EcoRV、Mbol单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如下图(1 kb

即1000个碱基对)，请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、Mbol的切割位点。

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（8分）请回答基因工程方面的有关问题：

(1)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。

①从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为________。

②在第________轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。

(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的一组引物（只标注了部分碱基序列）不合理（如下图），请说明理由。

________；

(3) PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的  功能，这是因为________。

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研究人员利用PCR技术扩增了目的基因，并培育了能合成凝乳酶的转基因酵母菌。请结合下图回答：

（1）利用PCR技术扩增目的基因原理_____________________。左图中引物为单链DNA片段，它是根据___________________的脱氧核苷酸序列合成的。从理论上推测，第2轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为________。

（2）右图所示的基因表达载体中的URA3基因能编码乳清苷5-磷酸脱羧酶，该酶能催化酵母菌尿嘧啶的合成，若酵母菌缺乏乳清苷5-磷酸脱羧酶，就无法生长，除非在培养基中加入尿嘧啶。利用URA3基因作为__________基因来筛选转化成功的酵母菌，要选择_______________的酵母菌作为受体细胞，所使用培养基___________（填“需要”或“不需要”）添加尿嘧啶。

（3）奶酪生产中的凝乳酶是一种分泌蛋白。工业生产过程中，________（能/否）选用大肠杆菌作为受体细胞表达出凝乳酶？原因是______________________。

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【生物选修模块3：现代生物科技专题】

根据基因工程的有关知识回答下列问题。

（1）利用PCR技术扩增目的基因时，需要加入两种引物，原因是_______________，引物I延伸而成的DNA单链会与引物II结合，进行DNA的延伸，这样，DNA聚合酶只能特异地复制

_____________________的DNA序列，一个DNA分子三轮复制以后，含有两种引物的DNA分子有_________个。

（2）基因工程的核心步骤是___________。其目的是使目的基因在受体细胞中 _______，并可遗传给下代。

（3）大肠杆菌作为受体细胞最常用的转化方法是：首先用Ca2+处理细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，这种细胞称为________细胞。

（4）检测目的基因是否发挥功能作用的第一步是____________________________。

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