为探究SHH基因与角化囊肿发生的相关性,科研人员利用SHH基因的非模板链转录合成的RNA作为探针,进行分子杂交实验,以检测SHH基因在角化囊肿中的表达情况。其基本流程如下图(Amp表示氨苄青霉素抗性基因;LacZ基因被SHH基因插入后不表达)。
请回答:
(1)重组载体中SHH基因转录合成RNA探针时,________(填“需要”或“不需要”)启动子。
(2)步骤②中,用Ca2+处理大肠杆菌,使之成为________细胞,然后导入重组载体。实验中,用添加氨苄青霉素的培养基培养大肠杆菌,未导入质粒的细菌将会死亡,原因是这些细菌不含有________基因。
(3)能表达LacZ基因的大肠杆菌在含有IPTG和Xgal的培养基上会形成蓝色菌落,易于识别。根据上述原理可以初步判断____(填“蓝色”或“白色”)菌落中的大肠杆菌为重组菌。
(4)将制备的探针加入角化囊肿切片中,探针将与__________形成杂交带,进而判断SHH基因的转录情况。
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为探究SHH基因与角化囊肿发生的相关性,科研人员利用SHH基因的非模板链转录合成的RNA作为探针,进行分子杂交实验,以检测SHH基因在角化囊肿中的表达情况。制作RNA探针的基本流程如图所示:
请回答:
(1)步骤①中,需要使用的工具酶有 。
(2)步骤②中,用 处理大肠杆菌,使之成为________细胞,然后导入重组载体。
(3)步骤③中,用添加 的培养基培养大肠杆菌,挑选________(选填“蓝色”或“白色”)菌落中的大肠杆菌为重组菌。
(4)重组载体中SHH基因转录合成RNA探针时,________(选填“需要”或“不需要”)启动子。将制备的探针加入角化囊肿切片中,探针将与____________________形成杂交带,进而判断SHH基因的 情况。
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为探究SHH基因与角化囊肿发生的相关性,科研人员利用SHH基因的非模板链转录合成的RNA作为探针,进行分子杂交实验,以检测SHH基因在角化囊肿中的表达情况。其基本流程如下图(Amp表示氨苄青霉素抗性基因;LacZ基因被SHH基因插入后不表达)。
请回答:
(1)重组载体中SHH基因转录合成RNA探针时,________(填“需要”或“不需要”)启动子。
(2)步骤②中,用Ca2+处理大肠杆菌,使之成为________细胞,然后导入重组载体。实验中,用添加氨苄青霉素的培养基培养大肠杆菌,未导入质粒的细菌将会死亡,原因是这些细菌不含有________基因。
(3)能表达LacZ基因的大肠杆菌在含有IPTG和Xgal的培养基上会形成蓝色菌落,易于识别。根据上述原理可以初步判断____(填“蓝色”或“白色”)菌落中的大肠杆菌为重组菌。
(4)将制备的探针加入角化囊肿切片中,探针将与__________形成杂交带,进而判断SHH基因的转录情况。
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为探究SHH基因与角化囊肿发生的相关性,科研人员利用SHH基因的非模板链转录合成的RNA作为探针,进行分子杂交实验,以检测SHH基因在角化囊肿中的表达情况。其基本流程如下图(Amp表示氨苄青霉素抗性基因;LacZ基因被SHH基因插入后不表达)。
请回答:
(1)重组载体中SHH基因转录合成RNA探针时,________(需要/不需要)启动子。
(2)步骤②中,用Ca2+处理大肠杆菌,使之成为_________细胞,然后导入重组载体。实验中,用添加氨苄青霉素的培养基培养大肠杆菌,未导入质粒的细菌将会死亡,原因是这此细菌不含有________基因。
(3)能表达LacZ基因的大肠杆菌在含有IPTG和X-gal的培养基上会形成蓝色菌落,易于识别。根据上述原理可以初步判断________(蓝色/白色)菌落中的大肠杆菌为重组菌。
(4)将制备的探针加入角化囊肿切片中,探针将与_________形成杂交带,进而判断SHH基因的转录情况。
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为探究SHH基因与角化囊肿发生的相关性,科研人员利用SHH基因的非模板链转录合成RNA作为探针,进行分子杂交实验,以检测SHHH基因在角化囊肿中的表达情况。其基本流程如下图:(Amp表示氨苄青霉素抗性基因;LacZ基因被SHH基因插入后不表达)
请回答:
(1)重组载体中SHH基因转录合成RNA探针时, (需要/不需要)启动子。
(2)步骤②中,用Ca2+处理大肠杆菌,使之成为 细胞,然后导入重组载体。实验中,用添加氨苄青霉素的培养基培养大肠杆菌,未导入质粒的细菌将会死亡,原因是这此细菌不含有 基因。
(3)能表达LacZ基因的大肠杆菌在含有IPTG和X-gal的培养基上会形成蓝色菌落,易于识别。根据上述原理可以初步判断 (蓝色/白色)菌落中的大肠杆菌为重组菌。
(4)将制备的探针加入角化囊肿切片中,探针将与 形成杂交带,进而判断SHH基因的转录情况。
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科研人员提取出真核细胞中的RNA后,将其作为探针与基因组DNA进行分子杂交,得到如下的实验结果。
以下关于实验的叙述中,正确的是( )
A.图中突起的环状结构是DNA或RNA分子
B.不完全杂交的原因是DNA中存在非基因片段
C.科研人员提取的RNA经过了剪接加工过程
D.RNA经逆转录后再做分子杂交,不会出现突起
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为了研究视神经病变诱导基因(OPTN)的分子机制,科研人员用OPTN基因的部分DNA片段构建表达载体,导入细胞后转录出的RNA会抑制细胞中OPTN蛋白的合成。实验中使用的DNA片段和载体上限制酶的识别序列如下:
限制酶 | BglⅡ | BamHⅠ | HindⅢ | XhoⅠ |
识别序列和切割位点 | A↓GATCT TCTAG↑A | G↓GATCC CCTAG↑G | A↓AGCTT TTCGA↑A | G↓TCGAG GAGCT↑C |
请回答:
(1)应选用BamHⅠ和HindⅢ切割载体质粒,理由是____________。
(2)重组质粒上____________(填“有”或“无”)BamHⅠ的识别序列,因此可通过酶切法鉴定质粒是否重组成功,方法如下:用BamHⅠ和XhoⅠ两种限制酶处理质粒,未重组的质粒将产生____________种片段,重组的质粒将产生____________种片段。
(3)重组质粒导入细胞后,能抑制细胞中OPTN蛋白合成的原因是____________。
(4)要证明导入重组质粒的细胞中OPTN基因的表达受到抑制,需要设置____________作为对照组。通常采用____________法检测细胞中OPTN蛋白的表达水平。
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结合题图分析,下列叙述正确的是( )
A. 在人体正常细胞中以RNA作为模板合成生物大分子的过程包括逆转录和翻译
B. 人体不同组织细胞的相同DNA进行转录时启用的起始点不完全相同
C. DNA编码序列发生碱基对的替换,其相应蛋白质的氨基酸序列就会改变
D. DNA上的基因对生物体性状的控制都是通过控制蛋白质的结构来实现的
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当某些基因转录形成的mRNA分子难与模板链分离时,会形成RNA-DNA杂交体,这时非模板链、RNA—DNA杂交体共同构成R环结构。下图是原核细胞DNA复制及转录相关过程的示意图。下列分析错误的是( )
A.R环中的嘌呤数不一定等于嘧啶数 B.酶A和酶C只作用于磷酸二酯键
C.R环中存在A-U、T-A碱基互补配对 D.图示体现了DNA半保留复制的特点
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R环是由一条RNA链与双链DNA中的一条链杂交而组成的三链核酸结构,可以由基因转录所合成的RNA链不能与模板分开而形成。下列有关说法错误的是
A. R环中未配对的DNA单链可以进行转录R环
B. R环的产生对基因突变可能存在阻碍作用
C. 杂合链中A-U/T碱基对的比例影响R环的稳定性
D. RNA链未被快速转运到细胞质中可导致R环形成
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R环是由一条RNA链与双链DNA中的一条链杂交而组成的三链核酸结构,可以由基因转录所合成的RNA链不能与模板分开而形成。下列有关说法错误的是
A. R环中未配对的DNA单链可以进行转录R环
B. R环的产生对基因突变可能存在阻碍作用
C. 杂合链中A-U/T碱基对的比例影响R环的稳定性
D. RNA链未被快速转运到细胞质中可导致R环形成
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