已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA...

已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖。将这两种细胞在培养皿中混合，加促融剂促进细胞融合，获得杂种细胞，并生产单克隆抗体。请回答下列有关问题：

（1）生产单克隆抗体时，一般不直接利用B淋巴细胞，主要原因是____________________________________________________________________。

（2）①过程中，常用的与植物细胞融合相同的诱导剂是__________。

（3）②过程为________培养，培养液中还需通入气体物质，其中通入CO2的目的是__________________________________________________________________。

（4）④表示杂交瘤细胞的扩大培养，其既可在体外培养，也可注射到小鼠________内培养，体内培养与体外培养相比，其优点是____________________。

（5）为了从培养液中分离出杂交瘤细胞，需要③过程向培养液中加入_____________，理由是杂交瘤细胞可利用__________________途径合成DNA，从而才能在该培养液中增殖。

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已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖。将这两种细胞在培养皿中混合，加促融剂促进细胞融合，获得杂种细胞，并生产单克隆抗体。请回答下列有关问题：

（1）生产单克隆抗体时，一般不直接利用B淋巴细胞，主要原因是____________________________________________________________________。

（2）①过程中，常用的与植物细胞融合相同的诱导剂是__________。

（3）②过程为________培养，培养液中还需通入气体物质，其中通入CO2的目的是__________________________________________________________________。

（4）④表示杂交瘤细胞的扩大培养，其既可在体外培养，也可注射到小鼠________内培养，体内培养与体外培养相比，其优点是____________________。

（5）为了从培养液中分离出杂交瘤细胞，需要③过程向培养液中加入_____________，理由是杂交瘤细胞可利用__________________途径合成DNA，从而才能在该培养液中增殖。

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已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖。将这两种细胞在培养皿中混合，加促融剂促进细胞融合，获得杂种细胞，并生产单克隆抗体。请回答：

（1）生产单克隆抗体时，一般不直接利用效应B淋巴细胞，主要原因是_____________________ 。

（2）①过程中，常用的与植物细胞融合相同的诱导剂是_____________________。

（3）②过程为_______________培养，培养液中还需通入气体物质，其中通入CO2的目的是____________。

（4）④表示杂交瘤细胞的扩大培养，其既可在体外培养，也可注射到小鼠_______内培养。体内培养与体外培养相比，其优点是_____________________。

（5）为了从培养液中分离出杂交瘤细胞，需在③过程向培养液中加入________________，理由是杂交瘤细胞可利用______________________途径合成DNA，从而才能在该培养液中增殖。

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[生物——现代生物科技专题]（15分）

已知细胞合成DNA有D和S两条途径， 其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径， 但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径， 但能不断分裂增殖。将这两种细胞在培养皿中混合， 加促融剂促进细胞融合， 获得杂种细胞， 并生产单克隆抗体。请回答：

（1）细胞融合后， 试管中细胞的种类是_____种。

（2）生产单克隆抗体时， 一般不直接利用一个B淋巴细胞， 主要原因是_____________。

（3）①过程中， 常用的诱导因素有________________________等。

（4）②过程为_____培养， 培养液中还需通入气体， 其中通入CO2的目的主要是_______。

（5）④表示杂交瘤细胞的扩大培养， 其既可在体外培养， 也可注射到小鼠________内培养。体内培养与体外培养相比， 其优点是_____________________________。

（6）为了从培养液中分离出杂种细胞， 需在③过程向培养液中加入________， 理由是杂交瘤细胞可利用__________________途径合成DNA， 从而才能在该培养液中增殖。

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【生物选修3—现代生物技术】（15分）已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基蝶呤阻断。人淋巴细胞中有DNA合成的S途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖。将这两种细胞在试管中混合，加入聚乙二醇促进融合，获得杂种细胞（一般只考虑细胞两两融合）。请回答：

（1）试管中除融合的杂种细胞外，还有            种融合细胞。

（2）设计方法是（不考虑机械方法）从培养液中分离出杂种细胞，分析回答：

方法：在培养液中添加入                再收集增殖的细胞。

原理：加入该物质后，使        合成途径阻断，仅有该合成途径的    　　　　　　     细胞就不能增殖，但人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞可以利用淋巴细胞中的　　　　　　　　　 　　　　　　　　　 途径合成DNA而增殖。

（3）将分离出的杂种细胞在不同条件下继续培养，获得A、B、C三个细胞株。各细胞株内含有的人染色体如右表（“+”有，“－”无）。

测定各细胞株中人体所具有五种酶的活性。结果是：①B株有a酶活性；②A、B、C株均有b酶活性；③A、B株有c酶活性；④C株有d酶活性；⑤A、B、C株均无e酶活性。如果人的基因作用不受鼠基因影响，则支配c、d和e酶合成的基因依次位于人的第　　　　　　　　　 　　　　　　　　　 　　 　　　　　　　　　 、　　　　　　　　　 　　　　　　　　　 　　　　　　　　　 和　　　　　　　　　 　　　　　　　　　 号染色体上。

（4）下图为细胞融合的简略过程（只考虑两个细胞的融合），请据下图回答：

若该过程是制备治疗流感的单克隆抗体，A为人的B淋巴细胞（染色体组成为2A+XX=46），B为鼠骨髓瘤的细胞（染色体组成为2A+XX=40）。A细胞来自于　　　　　　　　　 　　　　　　　　　 　　　　　　　　　 人。杂种细胞C中共有　　　　　　　　　 　　　　　　　　　 个染色体组，一个染色组可表示为　　　　　　　　　 　　　　　　　　　 　　　　　　　　　 。

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【生物选修3—现代生物技术】（15分）已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基蝶呤阻断。人淋巴细胞中有DNA合成的S途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖。将这两种细胞在试管中混合，加入聚乙二醇促进融合，获得杂种细胞（一般只考虑细胞两两融合）。请回答：

（1）试管中除融合的杂种细胞外，还有________种融合细胞。

（2）设计方法是（不考虑机械方法）从培养液中分离出杂种细胞，分析回答：

方法：在培养液中添加入________

再收集增殖的细胞。

原理：加入该物质后，使________合成途径阻断，仅有该合成途径的 细胞就不能增殖，但人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞可以利用淋巴细胞中的________途径合成DNA而增殖。

（3）将分离出的杂种细胞在不同条件下继续培养，获得A、B、C三个细胞株。各细胞株内含有的人染色体如右表（“+”有，“－”无）。测定各细胞株中人体所具有五种酶的活性。结果是：①B株有a酶活性；②A、B、C株均有b酶活性；③A、B株有c酶活性；④C株有d酶活性；⑤A、B、C株均无e酶活性。如果人的基因作用不受鼠基因影响，则支配c、d和e酶合成的基因依次位于人的第 、________和________号染色体上。

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单克隆抗体在诊断和治疗中具有广泛的应用。已知一般细胞的DNA合成途径有起始合成途径和中间合成途径两种，氨基蝶呤（A）可以阻碍起始合成途经，次黄嘌呤（H）及胸腺嘧啶核苷（T）则是中间合成途径所必需的物质。骨髓瘤细胞只有起始合成途径。在HAT培养基中含有次黄嘌呤（H）、氨基蝶呤（A）及胸腺嘧啶核苷（T）。下面是制备单克隆抗体的基本步骤：

步骤1：对小鼠多次注射特定抗原，制备淋巴细胞。

步骤2：细胞融合与杂交瘤细胞的选择性培养。最后一次免疫后第3天制备脾细胞悬液；筛选出？途径缺失的骨髓瘤细胞，于对数生长期（又称指数生长期，即细胞以指数形式增加）制备骨髓瘤细胞悬液；取适量的脾细胞与骨髓瘤细胞进行混合，对它们进行诱导融合处理；用HAT培养基对处理后的细胞进行培养。

步骤3：二次筛选。

步骤4：大规模培养杂交瘤细胞，批量生产单克隆抗体。

回答下列问题：

（1）步骤1中对小鼠多次注射特定抗原的目的是________________________；实验所需淋巴细胞可由________________细胞增殖分化而来。

（2）于对数生长期制备骨髓瘤细胞悬液的原因是________________________________；为使HAT培养基上只有杂交瘤细胞可以存活，步骤2中应填________。

（3）步骤3中二次筛选可通过________________________法进行目的抗体的检测，筛选出________________细胞。

（4）在体外对杂交瘤细胞进行克隆化培养时，为维持无菌无毒的环境，应进行的操作是_______________________________________________________________________。实验发现，在杂交瘤细胞的体外培养过程中，加入饲养层细胞比不加的生长要好，可能的原因是________________________________________。

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“筛选”是生物学中培育生物新类型常用的手段，下列有关技术筛选不成功的是（    ）

A．细胞中DNA的合成有D和S两种途径，效应B细胞中这两种合成途径都有，该细胞一般不增殖；骨髓瘤细胞中只有D途径。在细胞工程中若要将杂交瘤细胞从中筛选出来，可在培养基中加入能阻断D途径的药物。

B．可以用添加伊红和美蓝的培养基分离大肠杆菌

C．将具有不同优良性状的亲本杂交后，不断自交，并不断淘汰不符合要求的个体，直至后代不在发生性状分离，可培育出具有优良性状的新品种。

D．在基因工程中，通过对细胞单独培养并检测目的基因表达的产物来筛选基因工程细胞

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【生物——选修3：现代生物科技专题】制备单克隆抗体的过程中，需筛选出杂交瘤细胞。一般情况下，细胞内DNA合成除了主要途径以外还有一条辅助途径，而骨髓瘤细胞没有此辅助途径，DNA合成的主要途径可以被氨基碟呤阻断，利用这一特性可以筛选出杂交瘤细胞。

(1)制备单克隆抗体时，选用B淋巴细胞的原因是_______，选用骨髓瘤细胞的原因是____。研究发现，被激活的B淋巴细胞内含有发达的粗面内质网，这与_____的功能相适应。

(2)加入适量氨基碟呤的培养基称为_______ 培养基，氨基喋呤的作用主要是为了淘汰____细胞。

(3)诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞进行融合常用的化学试剂是____。对杂交瘤细胞进行体外培养需要适CO2，CO2的作用是 ___ 。

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正常细胞合成DNA有两条途径，a通路（主通路）和b通路（旁路）。用于进行单克隆抗体制备的骨髓瘤细胞，是DNA合成b通路的缺陷型细胞株。让B淋巴细胞与这种缺陷型细胞融合，再在加入DNA合成a通路阻断剂（氨基嘌呤）的培养液中培养，这种培养会产生以下哪些效果?                                                                 （    ）

①促进细胞融合                                       ②淘汰B淋巴细胞

③淘汰骨髓瘤细胞                                   ④阻断杂交细胞DNA合成

A．①②③④          B．②③④              C．②③                 D．③

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