请回答“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”有关问题（1）培养基的类型很多，但培养基中一般都...

请回答“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”有关问题

（1）培养基的类型很多，但培养基中一般都含有水、碳源、　　　　　　 和无机盐。

（2）分离纯化微生物最常使用的接种方法是　　　　　　　　　　 和　　　　　　　　　 两种。在接种过程中，接种针或涂布器的灭菌方法是　　　　　　　　　　　 。

（3）可以通过_____________________________来判断细菌是否分解尿素。土壤中的细菌之所以能够分解尿素，是因为它们能合成__________。

（4）对分离得到的土壤细菌如果转移放入大试管进一步培养，则土壤细菌的增长呈现____型曲线增长。

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[生物——选修1:生物技术实践]请回答与“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”的有关问题。

(1)培养基的类型很多,但培养基中一般都含有水、________、________和无机盐。

(2)分离纯化微生物最常使用的接种方法是_____和___________两种。在接种过程中,接种针或涂布器的灭菌方法是_______。

(3)可以通过____________来判断细菌是否分解尿素。土壤中的细菌之所以能够分解尿素,是因为它们能合成____。

(4)对分离得到的土壤细菌如果转移放入大试管进一步培养,则土壤细菌的增长呈现___型曲线增长。

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土壤是“微生物的天然培养基”，下面是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程，请根据下图回答相关问题：

(1)能分解尿素的细菌代谢类型为＿＿，应从富含有机质的土壤表层取土样。

(2)为分离出土壤中分解尿素的细菌，应该用________的培养基进行分离，并加入＿＿＿指示剂进行鉴别。

(3)若取土样5g，应加入＿＿ml的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液。因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，配制成如图所示的不同浓度的土壤溶液。取样稀释前，一定要＿＿＿以减少误差。将10³-10⁷倍的稀释液分别吸取0.1mL加入到固体培养基上，用＿＿＿＿将菌液铺平。这种接种方法称为＿＿＿＿。

(4)将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h～48h，观察并统计具有＿＿＿＿(现象)的菌落数，结果如下表，其中＿＿＿＿倍的稀释比较合适。

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土壤是“微生物的天然培养基”，下面是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程，请根据图回答相关问题：

（1）能分解尿素的细菌代谢类型为 异氧需氧型 ，应从富含有机质的土壤表层取土样．

（2）为分离出土壤中分解尿素的细菌，应该用 尿素为唯一氮源 的培养基进行分离，并加入 酚红 指示剂进行鉴别．

（3）若取土样5g，应加入 45 ml的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液．因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，配制成如图所示的不同浓度的土壤溶液．取样稀释前，一定要 摇均 以减少误差．将103﹣107倍的稀释液分别吸取0.1mL加入到固体培养基上，用 涂布器（玻璃刮刀） 将菌液铺平．这种接种方法称为 稀释涂布（平板）法 ．

（4）将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h～48h，观察并统计具有 红色环带 （现象）的菌落数，结果如下表，其中 105或106 倍的稀释比较合适．

稀释倍数　　 103　　 104　　 105　　 106　　 107

菌落数（个）　　 500　　 367　　 248　　 36　　 18

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自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程，请回答有关问题。

（1）为分离出土壤中分解尿素的细菌，应该用_______________________的培养基进行分离，这种培养基属于______培养基（按功能分类）。可在培养基中加入_________指示剂对该类微生物鉴别。

（2）若取土样6g，应加入_______mL的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液。因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，配制成101～107不同浓度的土壤溶液。将103～107倍的稀释液分别吸取0.2mL加入到固体培养基上，用涂布器将菌液铺平，每个稀释度下至少涂布3个平板，这种接种方法称为_______________。将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h～48h，观察并统计菌落数，结果如下表，其中_______倍的稀释比较合适，由此计算出每克土壤中的菌落数为__________ 。这种方法测定的菌落数往往比活菌的实际数目_______（低/高）。

（3）若研究尿素分解菌的群体生长规律，可采用平板划线法分离土壤中的尿素分解菌。操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是_______________________。将分离纯化后的单个菌落进行液体培养，可采用定期取样的方法进行计数。若以一个大方格（体积为0.1mm3）有25个中方格的计数板为例进行计算，设五个中方格中总菌数为45，菌液稀释倍数为102 ，那么原菌液的菌群密度为________个/mL。

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自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程，请回答有关问题。

（1）为分离出土壤中分解尿素的细菌，应该用_______________________的培养基进行分离，这种培养基属于______培养基（按功能分类）。可在培养基中加入_________指示剂对该类微生物鉴别。

（2）若取土样6g，应加入_______mL的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液。因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，配制成101～107不同浓度的土壤溶液。将103～107倍的稀释液分别吸取0.2mL加入到固体培养基上，用涂布器将菌液铺平，每个稀释度下至少涂布3个平板，这种接种方法称为_______________。将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h～48h，观察并统计菌落数，结果如下表，其中_______倍的稀释比较合适，由此计算出每克土壤中的菌落数为__________ 。这种方法测定的菌落数往往比活菌的实际数目_______（低/高）。

（3）若研究尿素分解菌的群体生长规律，可采用平板划线法分离土壤中的尿素分解菌。操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是_______________________。将分离纯化后的单个菌落进行液体培养，可采用定期取样的方法进行计数。若以一个大方格（体积为0.1mm3）有25个中方格的计数板为例进行计算，设五个中方格中总菌数为45，菌液稀释倍数为102，那么原菌液的菌群密度为________个/mL。

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下面是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程，请根据图回答相关问题：

（1）为分离出土壤中分解尿素的细菌，应该用________________________的培养基进行分离，并加入________指示剂进行鉴别。

（2）若取土样5g，应加入____________ml的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液。因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，配制成如图所示的不同浓度的土壤溶液，分别吸取0.1mL的稀释液涂布到固体培养基上，这种接种方法称为________________。某同学用该方法接种后，在某个平板上没有得到菌落，可能的原因是_______________________________________

（3）将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h～48h，观察并统计符合要求的菌落数，结果如下表，其中_______________倍的稀释比较合适。

（4）若需要将分离的菌种进行长期保藏，应使用的方法是_______________________。

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尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。下列有关土壤中尿素分解菌的分离和培养的叙述，正确的是（　　 ）

A.培养基中加入尿素作为唯一碳源，该培养基是鉴别培养基

B.测定土壤中分解尿素的细菌数量和测定土壤中其他细菌的数量可采用相同的稀释度

C.细菌合成的脲酶能将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高

D.利用稀释涂布平板法可以直接完成土壤中分解尿素的细菌的分离计数和纯化鉴定

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某生物活动小组为测定当地农田土壤中分解尿素的细菌的数量，进行了随机取样、系列梯度稀释、涂布平板、培养、计数等步骤，实验操作如下：

请分析并回答下列问题：

（1）为了筛选和分离尿素分解菌，培养基中需要添加____________作为唯一氮源，除了必需的营养物质外，培养基中还需要添加____________。尿素分解菌能产生脲酶，把尿素分解成____________。

（2）在上述系列梯度稀释时，吸取前一试管（或锥形瓶）中lmL菌液到后一试管的工具是____________，该工具在使用前需要进行____________灭菌。

（3）实验结果：3号试管涂布的三个平板的菌落数为560、601、24，4号试管涂布的三个平板的菌落数为57、59、61，5号试管涂布的三个平板的菌落数为8、15、28。该10克土壤样品中含有尿素分解菌的估算数目是____________。通过该方法计算出来的数值往往比实际值低，原因是____________。在进行实验时，除了涂布的三个平板外，还需要至少准备一个空白培养培养基做对照，目的是____________。

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土壤中的细菌数量多、分布广，人类能根据需要从土壤中分离提纯各种细菌，因此可以从土壤的枯枝败叶层分离出纤维素分解菌。回答下列问题：

（1）培养细菌的培养基除了含有碳源外，还必须含有的基本成分是_____________。

（2）为避免培养皿污染，需将倒平板后的培养皿呈________状态放置。为了排除培养基被污染，需设置接种等量_________的培养基作为空白对照。

（3）若要鉴别所分离的细菌是否为纤维素分解菌，则应该在培养基中加入________，观察培养基中是否出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可以鉴定是否筛选出纤维素分解菌。

（4）为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行_________处理。为了测定培养液中的菌体数量，一般采用__________法将一定量的菌液接种到固体培养基上，统计菌落的数量来代表菌体数，这种检测方法测得的结果一般偏小，原因是________________。

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