如图1表示某质粒，该质粒含有抗氨苄青霉素抗性基因（amp＇）和LacZ基因，LacZ基因能...

如图1表示某质粒，该质粒含有抗氨苄青霉素抗性基因（amp＇）和LacZ基因，LacZ基因能合成β-半乳糖苷酶，该酶能将白色底物X-Gal转化为蓝色产物，图2表示含目的基因的DNA片段，实验小组利用该质粒为载体将目的基因导入大肠杆菌，并筛选成功导入重组质粒的受体细胞（ScaⅠ、ApaⅠ、EcoRⅠ表示限制酶切割位点）。请回答下列问题：

（1）构建基因表达载体的目的是_________。在构建基因表达载体时应选用的限制酶是__________。

（2）将重组质粒导入大肠杆菌时，应用__________处理大肠杆菌，制备感受态细胞，实验室选用微生物作为受体细胞的优点是_________。

（3）重组质粒导入大肠杆菌后，应将大肠杆菌置于以X-Gal为底物，并添加_______________的培养基上培养，挑选出__________（填“白色”或“蓝色”）菌落。

（4）检测目的基因是否成功导入受体细胞常用的方法是__________，该方法依据的原理是__________。

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利用转基因技术可以生产出更多廉价的胰岛素，斜土为转基因实验过程示意图，其中数字表示相应过程。

天然大肠杆菌质粒一般含有LacZ基因而不含氨苄青霉素抗性基因；人工合成的大肠杆菌puc118质粒中除含有LacZ基因外，还含有氨苄青霉素抗性基因。

若lacZ基因完整，便可表达出β-半乳糖苷酶，β-半乳糖苷酶能将培养基中含有的IPTG和X-gal水解成蓝色，形成蓝色菌落；若lacZ基因中插入了外源基因，带有puc118质粒的大肠杆菌便不能表达β-半乳糖苷酶，将形成白色菌落。此实验方法可以用于鉴别转基因实验是否获得成功。

（1）过程①②一般需要的限制性内切酶主要是从____________分离纯化出来的；过程③④需要______酶。

（2）检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒。培养一段时间后出现三种类型：蓝色菌落、白色菌落、无菌落形成。成功导入重组质粒的菌落的表现是________________。

（3）图中的培养基中除含有大肠杆菌必需营养成分外，还应加入____________等物质，用于筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌。

（4）大肠杆菌细胞最常用的转化方法是：首先用_____________处理细胞，使细胞处于一种____________的生理状态，这种细胞称为感受态细胞。第二步是将____________与感受态细胞混合，在一定的温度下完成转化。

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下图是某质粒的示意图，其中ori为复制必需的序列，amp为氨苄青霉素抗性基因，tet为四环素抗性基因，箭头表示酶切后目的基因插入位点。下列有关叙述正确的是（     ）

A．质粒都含有抗性基因，该基因常常作为标记基因

B．将重组质粒1导入一个大肠杆菌，该菌不能在含氨苄青霉素培养基上长出一个菌落

C．为了便于筛选含重组质粒的受体细胞，应首选重组质粒2导入受体细胞

D．将重组质粒4导入大肠杆菌，目的基因至少会表达出一个蛋白质分子

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科研工作者拟将人胰岛素基因导入大肠杆菌的质粒保存，图示质粒中含有氨苄青霉素抗性基因和LacZ基因。回答下列有关问题：

（1）PCR技术能在短时间内大量扩增目的基因。PCR每一次循环包含_______、_______和______三个阶段。以一个分子的目的基因为例，一般要在第3次循环后才会得到完整的目的基因，至此共消耗______个引物分子。Taq聚合酶耐高温的特点在对于PCR链式反应的自动进行的意义是_____________。

（2）构建上图所示的表达载体过程中，所用的限制酶酶切位点位于质粒的_______基因中。重组质粒载体的构建还需要__________将目的基因与质粒相连

（3）LacZ基因编码的半乳糖苷酶可以将无色的X—ga l分解，产生蓝色物质，将重组质粒导入大肠杆菌后，为识别大肠杆菌是否成功导入表达载体，培养基中应加入__________和________，出现_______色菌落表明成功导入表达载体。

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下面是四种不同质粒的示意图，其中ori为复制必需的序列，amp为氨苄青霉素抗性基因，tet为四环素抗性基因，箭头表示同一种限制性核酸内切酶的酶切位点。下列有关叙述正确的是                                       （    ）

A．基因 amp和tet是一对等位基因，常作为基因工程中的标记基因

B．质粒指细菌细胞中能自我复制的小型环状的DNA利动植物病毒的DNA

C．限制性核酸内切酶的作用部位是DNA分子中特定的两个核苷酸之间的氢键

D．有质粒4将目的基顺导入大肠杆菌，该菌不能在含四环素的培养基上生长

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下面是四种不同质粒的示意图，其中ori为复制必需的序列，amp为氨苄青霉素抗性基因，tet为四环素抗性基因，箭头表示同一种限制性核酸内切酶的酶切位点。下列有关叙述正确的是                                              （    ）

A．基因 amp和tet是一对等位基因，常作为基因工程中的标记基因

B．质粒指细菌细胞中能自我复制的小型环状的DNA利动植物病毒的DNA

C．限制性核酸内切酶的作用部位是DNA分子中特定的两个核苷酸之间的氢键

D．有质粒4将目的基顺导入大肠杆菌，该菌不能在含四环素的培养基上生长

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下面是四种不同质粒的示意图，其中ori为复制必需的序列，amp为氨苄青霉素抗性基因，tet为四环素抗性基因，箭头表示同一种限制性核酸内切酶的酶切位点。下列有关叙述正确的是

A.基因 amp和tet是一对等位基因，常作为基因工程中的标记基因

B.质粒指细菌细胞中能自我复制的小型环状的DNA和动植物病毒的DNA

C.限制性核酸内切酶的作用部位是DNA分子中特定的两个核苷酸之间的氢键

D.由质粒4将目的基因导入大肠杆菌，该菌不能在含四环素的培养基上生长

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下面是四种不同质粒的示意图，其中ori为复制必需的序列，amp为氨苄青霉素抗性基因，tet为四环素抗性基因，箭头表示一种限制性核酸内切酶的酶切位点。若要得到一个能在四环素培养基上生长而不能在氨苄青霉素培养基上生长的含重组DNA的细胞，应选用的质粒是

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下面是四种不同质粒的示意图，其中ori为复制必需的序列，amp为氨苄青霉素抗性基因，tet为四环素抗性基因，箭头表示一种限制性核酸内切酶的酶切位点。若要得到一个能在四环素培养基上生长而不能在氨苄青霉素培养基上生长的含重组DNA的细胞，应选用的质粒是

A. 　　 B. 　　 C. 　　 D.

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下面是四种不同质粒的示意图，其中ori为复制必需的序列，amp为氨苄青霉素抗性基因，tet为四环素抗性基因，箭头表示一种限制性核酸内切酶的酶切位点。若要得到一个能在四环素培养基上生长而不能在氨苄青霉素培养基上生长的含重组DNA的细胞，应选用的质粒是（　 ）

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