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下图是利用转基因技术生产干扰素的简化流程。请分析回答：
（1）过程①使用的 酶能使特定部位的两个脱氧核苷酸之间的 （化学键）断开。运载体的黏性末端与目的基因DNA片段的黏性末端就可通过 __而结合。过程②需要用到 酶。
（2）A上应有RNA聚合酶识别和结合的部位，
以驱动干扰素基因转录，该部位称为 。为直接检测干扰素基因是否转录，可从细胞中提取 __与用放射性同位素标记的____________作探针进行分子杂交，。
（3）利用PCR扩增仪大量扩增目的基因的前提是目的基因的核苷酸序列要有一段是已知的，以便根据这一序列合成 ，除了该物质和目的基因外，扩增仪中还需加入四种脱氧核苷酸和 酶，并适时调整温度，才能使目的基因数量成指数式增长。
（4）在该工程中所用的基因“剪刀”能识别的序列和切点是—G′GATCC—。
请画出质粒被切割形成黏性末端的过程图
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（12分）下图是利用转基因技术生产干扰素的简化流程。请分析回答：
(1) 过程①使用的________酶能使特定部位的两个脱氧核苷酸之间的________（化学键）断开。运载体的黏性末端与目的基因DNA片段的黏性末端就可通过________ 而结合。 过程②需要用到________酶，
(2图中A的名称是____________，它重组成功的物质基础是__________________ __________的结构组成相同。
(3) A上应有RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动干扰素基因转录，该部位称为 。为直接检测干扰素基因是否转录，可从细胞中提取 __与用放射性同位素标记的____________作探针进行分子杂交，。
（4）利用PCR扩增仪大量扩增目的基因的前提是目的基因的核苷酸序列要有一段是已知的，以便根据这一序列合成________，除了该物质和目的基因外，扩增仪中还需加入四种脱氧核苷酸和________酶，并适时调整温度，才能使目的基因数量成指数式增长。
（5）在该工程中所用的基因“剪刀”能识别的序列和切点是—G′GATCC—。
请画出质粒被切割形成黏性末端的过程图
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改造盐碱化草原是利用多种恢复生态学技术治理退化的生态系统，使这一区域生态系统的结构和功能恢复到或接近受干扰前的状态，如图所示为一个简化的技术流程。下列分析错误的是 （ ）
A.改造盐碱化草地的过程主要利用的是生物群落演替原理
B.盐碱化草地在被人类改造的过程中丰富度不变
C.演替过程中优势物种被替代主要是植物之间竞争的结果
D.人为恢复生态系统时需要向生态系统输入一定的物质和能量
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为生产具有特定性能的α-淀粉酶，研究人员从某种海洋细菌中克隆了α-淀粉酶基因（1656个碱基对），利用基因工程大量制备琢α-淀粉酶，实验流程见下图。请回答下列问题：
(1)利用PCR技术扩增α-淀粉酶基因前，需先合成两条引物，并获得细菌的_______________________。
(2)为了便于扩增的DNA片段与表达载体连接，需在引物的____________________端加上限制性酶切位点，且常在两条引物上设计加入不同的限制性酶切位点，主要目的_________________________。
(3)进行扩增时，反应的温度和时间需根据具体情况进行设定，下列选项中________的设定与引物有关，________的设定与扩增片段的长度有关。（填序号）
①加热至90～95℃(变性)
②冷却至55～60℃(复性)
③加热至70～75℃(延伸)
④90～95℃维持时间
⑤55～60℃维持时间
⑥70～75℃维持时间
(4)下图表示筛选获得的工程菌中编码α-淀粉酶的mRNA的部分碱基序列：
图中虚线框内mRNA片段包含________个密码子，如虚线框后的序列未知，预测虚线框后的第一个密码子最多有________种。
(5)获得工程菌表达的α-淀粉酶后，为探究影响酶活性的因素，以浓度为1%的可溶性淀粉为底物测定酶活性，结果如下：
| 缓冲液 | 50 mmol/LNa2HPO4-KH2PO4 | 50 mmol/LGly-NaOH | 50 mmol/LTris-HCl |
| pH | 6.0 | 6.5 | 7.0 | 7.5 | 7.5 | 8.0 | 8.5 | 9.0 | 9.0 | 9.5 | 10.0 | 10.5 |
| 酶相对活性% | 25.4 | 40.2 | 49.8 | 63.2 | 70.1 | 99.5 | 95.5 | 85.3 | 68.1 | 63.7 | 41.5 | 20.8 |
| | | | | | | | | | | | | |
根据上述实验结果，初步判断该α-淀粉酶活性最高的条件为___________________________
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为生产具有特定性能的α-淀粉酶，研究人员从某种海洋细菌中克隆了α-淀粉酶基因（1656个碱基对），利用基因工程大量制备琢α-淀粉酶，实验流程见下图。请回答下列问题：
（1）利用PCR技术扩增α-淀粉酶基因前，需先获得细菌的_________。
（2）为了便于扩增的DNA片段与表达载体连接，需在引物的____端加上限制性酶切位点，且常在两条引物上设计加入不同的限制性酶切位点，主要目的是________________。
（3）进行扩增时，反应的温度和时间需根据具体情况进行设定，下列选项中_______的设定与引物有关，________的设定与扩增片段的长度有关。（填序号）
①变性温度②退火温度③延伸温度④变性时间⑤退火时间⑥延伸时间
（4）下图表示筛选获得的工程菌中编码α-淀粉酶的mRNA的部分碱基序列：
图中虚线框内mRNA片段包含___个密码子，如虚线框后的序列未知，预测虚线框后的第一个密码子最多有__种。
（5）获得工程菌表达的α-淀粉酶后，为探究影响酶活性的因素，以浓度为1%的可溶性淀粉为底物测定酶活性，结果如下：
| 缓冲液 | 50mmol/LNa2HPO4-KH2PO4 | 50mmol/LTris-HCl | 50mmol/LGly-NaOH |
| pH | 6．0 | 6．5 | 7．0 | 7．5 | 7．5 | 8．0 | 8．5 | 9．0 | 9．0 | 9．5 | 10．0 | 10．5 |
| 酶相对活性% | 25．4 | 40．2 | 49．8 | 63．2 | 70．1 | 95．5 | 99．5 | 85．3 | 68．1 | 63．7 | 41．5 | 20．8 |
根据上述实验结果，初步判断该α-淀粉酶活性最高的条件为______。
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在药品生产中，人们逐步利用基因工程技术生产出如干扰素，白细胞介素，凝血因子等各种高质量低成本的药品，请分析回答：
(1)在用目的基因与质粒形成重组DNA过程中，一般要用到的工具酶是限制酶和DNA连接酶，其中限制酶切割的是___________________键,其特点是___________________________。
(2)将含有“某激素基因”的质粒导入细菌细胞后，能在细菌细胞内直接合成“某激素”，则该激素在细菌体内的合成包括______________________和_________________两个阶段。
(3)基因工程形成工程菌的遗传学原理是______________________________。
(4) 基因工程操作的第四步是目的基因的检测与鉴定，其中分子水平的检测又分三步：首先要检测转基因生物的DNA是否插入了目的基因，采用技术是______________________；其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是____________________________；最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是__________________________________________。
(5)为了解基因结构，通常选取一特定长度的线性DNA分子，先用一种限制酶切割，通过某种技术将单酶水解片段分离，计算相对大小；然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解，分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。
| 已知一线性DNA序列共有5000bp（bp为碱基对） | 第一步水解 | 产物（单位bp） | 第二步水解 | 产物（单位bp） |
| A酶切割 | 1900 | 将第一步水解产物分离后，分别用B酶切割 | 1700 200 |
| 1500 | 800 700 |
| 1600 | 1100 500 |
由实验可知，在这段已知序列上，A酶与B酶的识别序列分别为______个和_____个。
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下图为利用物种A（2N =36）和B（2N =40）的细胞进行有关技术操作的简化流程图。请据图分析回答：
（1）若原生质体A、B分别来源于植物A和植物B的体细胞，则过程①常用的试剂是___________。融合的原生质体C形成杂种细胞需要再生出细胞壁，该过程与细胞中___________（细胞器）的活动密切相关。
（2）若原生质体A、B分别来源于植物A和植物B的花粉，则过程②后再应用___________技术把C培养成杂种植株，该植株体细胞中含___________条染色体„
（3）若该过程为制备单克隆抗体，A为小鼠已免疫的B淋巴细胞，则经融合和筛选后的C细胞名称为 ___________，具有___________的特点。
（4）若此图表示克隆动物的培育过程，过程①②涉及的细胞工程技术分别是___________、___________。
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下图为利用农杆菌转化法培育转基因抗虫棉的技术流程图。 请据图回答:
（1）图中A为 ，在构建该结构时, Bt毒蛋自基因与Ti质粒结合的部位是 。
（2）①过程是 ，经采用的方式是 。
（3）通过 _实验，才能最终确定是否成功培育出了抗虫棉植株。
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利用基因编辑技术将病毒外壳蛋白基因导入猪细胞中，然后通过核移植技术培育基因编辑猪，可用于生产基因工程疫苗。下图为基因编辑猪培育流程，请回答下列问题：
（1）对1号猪使用激素处理，使其超数排卵，收集并选取处在__________时期的卵母细胞用于核移植。
（2）采集2号猪的组织块，用__________处理获得分散的成纤维细胞，放置于37℃的CO2培养箱中培养，其中CO2的作用是____________________________。
（3）将重组胚胎移植到3号猪的子宫中，产出的基因编辑猪的性染色体来自于_________号猪。
（4）为检测病毒外壳蛋白基因是否被导入4号猪并正常表达，可采用的方法有__________（填序号）。
①DNA测序 ②染色体倍性分析 ③体细胞结构分析 ④抗原—抗体杂交
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利用基因编辑技术将病毒外壳蛋白基因导入猪细胞中，然后通过核移植技术培育基因编辑猪，可用于生产基因工程疫苗。下图为基因编辑猪培育流程，请回答下列问题：
（1）对1号猪使用_________处理，使其超数排卵，收集并选取处在__________时期的卵母细胞用于核移植。
（2）采集2号猪的组织块，用__________处理获得分散的成纤维细胞，放置于37℃的CO2培养箱中培养，其中CO2的作用是________。
（3）为获得更多基因编辑猪，可在胚胎移植前对胚胎进行__________。产出的基因编辑猪的性染色体来自于_________号猪。
（4）为检测病毒外壳蛋白基因是否被导入4号猪并正常表达，可采用的方法有__________（填序号）。
①DNA测序 ②染色体倍性分析 ③体细胞结构分析 ④抗原—抗体杂交
以驱动干扰素基因转录，该部位称为