下图为限制酶BamHⅠ和BglⅡ的识别序列及切割位点,实验中用BamHⅠ切割DNA获得目的基因,用BglⅡ切割质粒,并将它们拼接得到重组质粒。下列相关叙述正确的是
A. 在酶切过程中,要控制好酶的浓度、温度和反应速率等因素
B. 经两种酶处理得到的重组质粒不能再被这两种酶所识别
C. 目的基因经BglⅡ切割后形成的黏性末端是-CTACG
D. 分别用两种限制酶切割,保证了目的基因定向的插入质粒
高三生物选择题中等难度题
下图为限制酶BamHⅠ和BglⅡ的识别序列及切割位点,实验中用BamHⅠ切割DNA获得目的基因,用BglⅡ切割质粒,并将它们拼接得到重组质粒。下列相关叙述正确的是
A. 在酶切过程中,要控制好酶的浓度、温度和反应速率等因素
B. 经两种酶处理得到的重组质粒不能再被这两种酶所识别
C. 目的基因经BglⅡ切割后形成的黏性末端是-CTACG
D. 分别用两种限制酶切割,保证了目的基因定向的插入质粒
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下图一为含有目的基因的DNA(外源DNA),图二为某质粒,表中是几种限制酶识别序列及其切割位点。用图中的外源DNA与质粒构建重组质粒。
限制酶 | BamHⅠ | SmaⅠ | EcoRⅠ | Hind Ⅲ |
识别序列及切割位点 |
请根据上述信息分析回答:
55、外源DNA、质粒分别有_______、_______个游离的磷酸基团。
56、DNA分子的一条多核苷酸链中,两个脱氧核苷酸之间以_________和_________相连。用SmaⅠ限制酶切割外源DNA,切开的是___________和__________之间相连的键。
57、如果用SmaⅠ酶切割外源DNA和质粒来重组质粒,其结果是_____________。
58、如果使用EcoRⅠ酶切割外源DNA和质粒,将目的基因片段与切割后的质粒混合,加入_________酶,获得的环状DNA可能有哪几种情况?______________。
59、如果使用BamHⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理外源DNA和质粒,比用EcoRⅠ酶切割的优点是_____________________。
60、将重组质粒导入大肠杆菌中,培养基中需加入___________进行鉴别和筛选含有___________的细胞。
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限制酶是一种核酸内切酶,可识别并切割DNA分子上特定的核苷酸序列。下图为四种限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ、Hind Ⅲ和BglⅡ的识别序列和切割位点:
切割出来的DNA片段可以互补配对的是:
A.BamHⅠ和EcoRⅠ B.BamHⅠ和 Hind Ⅲ
C.BamHⅠ和BglⅡ D.EcoRⅠ和 Hind Ⅲ
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限制酶是一种核酸内切酶,可识别并切割DNA分子上特定的核苷酸序列。下图为四种限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ、Hind Ⅲ和BglⅡ的识别序列和切割位点:
切割出来的DNA片段可以互补配对的是( )
A.BamHⅠ和EcoRⅠ B.BamHⅠ和 Hind Ⅲ
C.BamHⅠ和BglⅡ D.EcoRⅠ和 Hind Ⅲ
高三生物选择题简单题查看答案及解析
(2008秋•扬州期末)限制酶是一种核酸内切酶,可识别并切割DNA分子上特定的核苷酸序列.如图为四种限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ和BglⅡ的识别序列和切割位点
切割出来的DNA黏性末端可以互补配对的是( )
A.BamHⅠ和EcoRⅠ B.BamHⅠ和 HindⅢ
C.BamHⅠ和BglⅡ D.EcoRⅠ和 HindⅢ
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下图甲表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图乙表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。
1.DNA分子中磷酸和脱氧核糖之间的化学键叫做磷酸二酯键,下列酶中能作用于磷酸二酯键的是( )
A. DNA解旋酶 B. DNA聚合酶 C. DNA连接酶 D. 限制性内切酶
2.写出BamHⅠ酶切后形成的粘性末端(写出一个)_____________;如果用限制酶SmaⅠ完全切割图甲所示的DNA片段,则产物中DNA片段长度分别为_____________________。
3.在基因工程中通常选择质粒作为目的基因的运载体,原因是__________________;为了将图甲所示的目的基因D导入图乙所示的质粒,应选择的限制酶是__________。
4.成功导入重组质粒的大肠杆菌具有的特点是( )(多选)
A. 能在含有抗生素A的培养基上生长
B. 能在含有抗生素B的培养基上生长
C. 在含有抗生素A的培养基上不能生长
D. 在含有抗生素B的培养基上不能生长
5.为了获得含重组质粒的单个大肠杆菌的菌落,常用的接种方法是________________。
高三生物非选择题中等难度题查看答案及解析
某质粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三种限制酶切割位点,它们的识别序列和黏性末端各不相同。质粒同时也含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示,请回答下列问题。
(1)将抗盐基因导入烟草细胞内,使烟草植株产生抗盐性状,这种变异属于________。
(2)如果将抗盐基因直接导入烟草细胞,一般情况下,烟草不会具有抗盐特性,原因是抗盐基因在烟草细胞中不能________________________________。
(3)在构建重组质粒时,应选用________和________两种酶对质粒和含抗盐基因的DNA进行切割,以保证重组DNA序列的唯一性。
(4)基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤。为筛选出导入了重组质粒的农杆菌,下图表示运用影印培养法(使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法)检测基因表达载体是否导入了农杆菌。
培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外,培养基A和培养基B分别还含有________、________。从检测筛选的结果分析,含有目的基因的是________(填数字)菌落中的细菌。为了确定抗盐烟草是否培育成功,既要用__________标记的含抗盐基因的DNA片段作探针进行分子杂交检测,又要用______________的方法从个体水平鉴定烟草植株的耐盐性。
(5)将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用________技术,愈伤组织经________进而形成完整植株,此过程除营养物质外还必须向培养基中添加______。
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下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点。
下图是转基因抗病香蕉的培育过程,含目的基因的外源DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题:
(1) 用图中的质粒和目的基因构建重组质粒,不能使用SmaI酶切割,原因__________________________________________。
(2) 构建含目的基因的重组质粒A时,选 用 BamhHI 和HindⅢ酶对_______和 _______进行切割,可以防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化。
(3) ①〜⑤中存在碱基互补配对的是____________。
(4) 香蕉组织细胞具有__________,因此,可以利用组织培养技术将导入目的(抗病)基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中④、⑤依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的_________、____________。培养皿中的培养基除添加营养物质外,还需要添加_________和__________以诱导外植体完成④、⑤生理过程,培养成完整的植物体。在形成愈伤组织的过程中,细胞的新陈代谢类型是_____________。
(5) 如何检测图示过程最终是否取得成功?____________________________。
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下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点。
下图是转基因抗病香蕉的培育过程,含目的基因的外源DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题:
(1) 用图中的质粒和目的基因构建重组质粒,不能使用SmaI酶切割,原因是__________________________________________。
(2) 构建含目的基因的重组质粒A时,选 用 BamhHI 和HindⅢ酶对_______和 _______进行切割,可以防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化。
(3) ①〜⑤中存在碱基互补配对的是____________。
(4) 香蕉组织细胞具有__________,因此,可以利用组织培养技术将导入目的(抗病)基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中④、⑤依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的_________、____________。培养皿中的培养基除添加营养物质外,还需要添加_________和__________以诱导外植体完成④、⑤生理过程,培养成完整的植物体。在形成愈伤组织的过程中,细胞的新陈代谢类型是_____________。
(5) 如何检测图示过程最终是否取得成功?____________________________。
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下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点。
下图是转基因抗病香蕉的培育过程,含目的基因的外源DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题:
(1) 用图中的质粒和目的基因构建重组质粒,不能使用SmaI酶切割,原因是__________________________________________。
(2) 构建含目的基因的重组质粒A时,选 用 BamhHI 和HindⅢ酶对_______和 _______进行切割,可以防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化。
(3) ①?⑤中存在碱基互补配对的是____________。
(4) 香蕉组织细胞具有__________,因此,可以利用组织培养技术将导入目的(抗病)基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中④、⑤依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的_________、____________。培养皿中的培养基除添加营养物质外,还需要添加_________和__________以诱导外植体完成④、⑤生理过程,培养成完整的植物体。在形成愈伤组织的过程中,细胞的新陈代谢类型是_____________。
(5) 如何检测图示过程最终是否取得成功?____________________________。
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