如图1为某种常用质粒的序列图,Lac Z基因编码的酶能使无色的X﹣gal变为蓝色,Ampr为氨苄青霉素抗性基因.图2为目的基因的序列及其相关限制酶的识别序列.请回答下列问题:
(1)若要筛选成功导入目的基因的重组质粒,培养基中应加入的物质有______________,构建重组质粒时需要的工具酶有___________,对获取的目的基因可用PCR技术对其扩增.
(2)实验小组用BamH I和Bgl II两种限制酶切割目的基因和质粒,构建重组质粒后导入大肠杆菌中,在筛选重组质粒的培养基上,若大肠杆菌菌落显蓝色,说明导入了__________.没有导入任何外源DNA的大肠杆菌_____(填“能”或“不能”)在该培养基上生存.
(3)若质粒和目的基因用BamH I和Bgl II两种限制酶切割后,用DNA连接酶相连,然后再用BamH I和EcoR I切割成功连接后的重组质粒,可获得长度不同的_____种DNA片段.
高二生物非选择题中等难度题
如图1为某种常用质粒的序列图,Lac Z基因编码的酶能使无色的X﹣gal变为蓝色,Ampr为氨苄青霉素抗性基因.图2为目的基因的序列及其相关限制酶的识别序列.请回答下列问题:
(1)若要筛选成功导入目的基因的重组质粒,培养基中应加入的物质有______________,构建重组质粒时需要的工具酶有___________,对获取的目的基因可用PCR技术对其扩增.
(2)实验小组用BamH I和Bgl II两种限制酶切割目的基因和质粒,构建重组质粒后导入大肠杆菌中,在筛选重组质粒的培养基上,若大肠杆菌菌落显蓝色,说明导入了__________.没有导入任何外源DNA的大肠杆菌_____(填“能”或“不能”)在该培养基上生存.
(3)若质粒和目的基因用BamH I和Bgl II两种限制酶切割后,用DNA连接酶相连,然后再用BamH I和EcoR I切割成功连接后的重组质粒,可获得长度不同的_____种DNA片段.
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如图1为某种常用质粒的序列图,Lac Z基因编码的酶能使无色的X﹣gal变为蓝色,Ampr为氨苄青霉素抗性基因。图2为目的基因的序列及其相关限制酶的识别序列。请回答下列问题:
(1)若要筛选成功导入目的基因的重组质粒,培养基中应加入的物质有________________________,构建重组质粒时需要的工具酶有________________,对获取的目的基因可用PCR技术对其扩增。
(2)实验小组用BamH I和Bgl II两种限制酶切割目的基因和质粒,构建重组质粒后导入大肠杆菌中,在筛选重组质粒的培养基上,若大肠杆菌菌落显蓝色,说明导入了____________________________。没有导入任何外源DNA的大肠杆菌_________(填“能”或 “不能”)在该培养基上生存。
(3)若质粒和目的基因用BamH I和Bgl II两种限制酶切割后,用DNA连接酶相连,然后再用BamH I和EcoR I切割成功连接后的重组质粒,可获得长度不同的_______种DNA片段。
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下图1为某种常用质粒的序列图,Lac Z基因编码的酶能使无色的X—gal变为蓝色,Ampr为氨苄青霉素抗性基因。图2为目的基因的序列及其相关限制酶的识别序列。请回答下列问题:
(1)若要筛选成功导入目的基因的重组质粒,培养基中应加入的物质有________,构建重组质粒时需要的工具酶有_______________,对获取的目的基因可用____________技术对其扩增。
(2)实验小组用BamH I和Bgl II两种限制酶切割目的基因和质粒,构建重组质粒后导入大肠杆菌中,在筛选重组质粒的培养基上,若大肠杆菌菌落显蓝色,说明导入了_____________。没有导入任何外源DNA的大肠杆菌_____________(填“能”或“不能”)在该培养基上生存。
(3)若质粒和目的基因用BamH I和Bgl II两种限制酶切割后,用DNA连接酶相连,然后再用BamH I和EcoR I切割成功连接后的重组质粒,可获得长度不同的_____________种DNA片段。(假定每一种限制酶都充分切割。)
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下图1为某种常用质粒的序列图,Lac Z基因编码的酶能使无色的X—gal变为蓝色,Ampr为氨苄青霉素抗性基因。图2为目的基因的序列及其相关限制酶的识别序列。请回答下列问题:
(1)若要筛选成功导入目的基因的重组质粒,培养基中应加入的物质有________,构建重组质粒时需要的工具酶有_______________,对获取的目的基因可用____________技术对其扩增。
(2)实验小组用BamH I和Bgl II两种限制酶切割目的基因和质粒,构建重组质粒后导入大肠杆菌中,在筛选重组质粒的培养基上,若大肠杆菌菌落显蓝色,说明导入了_____________。没有导入任何外源DNA的大肠杆菌_____________(填“能”或“不能”)在该培养基上生存。
(3)若质粒和目的基因用BamH I和Bgl II两种限制酶切割后,用DNA连接酶相连,然后再用BamH I和EcoR I切割成功连接后的重组质粒,可获得长度不同的_____________种DNA片段。(假定每一种限制酶都充分切割。)
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下图1为某种常用质粒的序列图,Lac Z基因编码的酶能使无色的X—gal变为蓝色,Amp为氨苄青霉素抗性基因。图2为目的基因的序列及其相关限制酶的识别序列。请回答下列问题:
(1)若要筛选成功导入目的基因的重组质粒,培养基中应加入的物质有_________________和_________________,构建重组质粒时需要的工具酶有_________________,对获取的目的基因可用_________________技术对其扩增。
(2)实验小组用BamH I和Blg II两种限制酶切割目的基因和质粒,构建重组质粒后导入大肠杆菌中,在筛选重组质粒的培养基上,若大肠杆菌菌落显蓝色,说明导入了_____________。
(3)将若干个质粒和目的基因用BamH I和BlgII两种限制酶切割后,用DNA连接酶相连,然后再用BamH I和EcoR I切割成功连接后的重组质粒,可以获得了_________种长度的DNA片段。
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下图1为某种常用质粒的序列图,LacZ基因编码的酶能使无色的X—gal变为蓝色,Ampr为氨苄青霉素抗性基因。图2为目的基因的序列及其相关限制酶的识别序列。请回答下列问题:
⑴若要筛选成功导入目的基因的重组质粒,培养基中应加入的物质有__________和___________。基因表达载体的组成除了目的基因外,还必须有_______、终止子和标记基因等。对获取的目的基因可用_________技术对其扩增。
⑵实验小组用BamHⅠ和BlgⅡ两种限制酶切割目的基因和质粒,构建重组质粒后导入大肠杆菌中,在筛选重组质粒的培养基上,若大肠杆菌菌落显蓝色,说明导入了__________;若大肠杆菌菌落显白色,说明导入了_________。没有导入任何外源DNA的大肠杆菌_______(填“能”或“不能)在该培养基上生存。
⑶将若干个质粒和目的基因用BamHⅠ和BlgⅡ两种限制酶切割后,用DNA连接酶相连,若仅考虑质粒与目的基因相连接,会有________种连接方式。然后再用BamHⅠ和EcoRⅠ切割成功连接后的产物,获得了长度为0.8kb、3.8kb、1.1kb和3.5kb四种长度的DNA片段,则目的基因的长度为______kb(已知目的基因的长度大于2kb,1kb=1000个碱基对)。
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下图1为某种常用质粒的序列图,LacZ基因编码的酶能使无色的X—gal变为蓝色,Ampr为氨苄青霉素抗性基因。图2为目的基因的序列及其相关限制酶的识别序列。请回答下列问题:
(1)基因工程的核心步骤是______________。
(2)实验小组用BamHⅠ和BlgⅡ两种限制酶切割目的基因和质粒,若要筛选成功导入目的基因的重组质粒,培养基中应加入的物质有__________和________。
(3)成功导入重组质粒的大肠杆菌菌落显_______,若大肠杆菌菌落显蓝色,说明导入________。没有导入任何外源DNA的大肠杆菌_______(填“能”或“不能)在该培养基上生存。
(4)将若干个质粒和目的基因用BamHⅠ和BlgⅡ两种限制酶切割后,用DNA连接酶相连,然后再用BamHⅠ和EcoRⅠ切割成功连接后的产物,获得了长度为0.7kb、2.8kb、1kb和2.5kb四种长度的DNA片段,则目的基因的长度为______kb(已知目的基因的长度大于1kb,1kb=1000个碱基对)。
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下图1为某种质粒结构,LacZ基因编码的酶能使无色的X—gal变为蓝色,Amp为氨苄青霉素抗性基因。图2为目的基因的序列及其相关限制酶的识别序列和切点。回答下列问题
(1)若要筛选成功导入目的基因的重组质粒,培养基中应加入的物质有______________和_________________。构建重组质粒时需要的工具酶有_________________。
(2)用BamHI和BglII两种限制酶切割目的基因和质粒,构建重组质粒后导入大肠杆菌中,在筛选重组质粒的培养基上,若大肠杆菌菌落显蓝色,说明导入了_____________。
(3)BamHI酶切的DNA末端与BglII酶切的DNA末端连接,连接部位的6个碱基对序列为_____________(要求写出双链)。如用BamHI酶、BglII酶和EcoRI酶对于该重组质粒进行切割,能切开_______个切口。
(4)下图中A、B、C、D表示利用PCR扩增目的基因过程中可能用到的四种引物,回答下列相关问题:
①PCR技术需要用到_____________酶。
②若需要扩增图中目的基因,由于DNA复制时,子链只能由5′向3′方向延伸,则利用PCR技术扩增该基因时需要选择_____________(A、B、C、D)的组合作为引物。
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pBR322是一个由普通质粒经过人工添加许多限制酶识别序列而构建的重要质粒,有万能质粒之称,图甲是pBR322结构示意图(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因)。图乙表示几种限制酶识别序列及其切割位点。回答下列问题:
(1)质粒是基因工程中常用的工具,其作用是____________________。人工构建pBR322过程中需要的酶是__________________________________________________。
(2)为扩增目的基因可采用PCR技术,该技术利用了_________原理,该技术的前提是需要根据________合成引物。
(3)由图乙可知,经Sau3AⅠ酶切割得到的目的基因可以与被__________酶切割的pBR322连接成重组质粒,原因是____________________。将切割后的目的基因与pBR322质粒混合,加入相应酶反应后,用得到的混合物直接转化处于感受态的大肠杆菌,感受态是指____________________的生理状态。
(4)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌,应在筛选平板培养基中添加__________,平板上长出的菌落,需要进一步鉴定才能筛选出含有目的基因的大肠杆菌的单菌落,原因是____________________。
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pBR322是一个由普通质粒经过人工添加许多限制酶识别序列而构建的重要质粒,有万能质粒之称,图甲是pBR322结构示意图(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因)。图乙表示几种限制酶识别序列及其切割位点。回答下列问题:
(1)质粒是基因工程中常用的工具,其作用是____________________。人工构建pBR322过程中需要的酶是__________________________________________________。
(2)为扩增目的基因可采用PCR技术,该技术利用了_________原理,该技术的前提是需要根据________合成引物。
(3)由图乙可知,经Sau3AⅠ酶切割得到的目的基因可以与被__________酶切割的pBR322连接成重组质粒,原因是____________________。将切割后的目的基因与pBR322质粒混合,加入相应酶反应后,用得到的混合物直接转化处于感受态的大肠杆菌,感受态是指____________________的生理状态。
(4)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌,应在筛选平板培养基中添加__________,平板上长出的菌落,需要进一步鉴定才能筛选出含有目的基因的大肠杆菌的单菌落,原因是____________________。
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