下表为培养某种微生物的培养基配方，请回答有关问题：（1）该培养基只允许分解尿素的细菌生长，...

下表为培养某种微生物的培养基配方，请回答有关问题：

（1）该培养基只允许分解尿素的细菌生长，这种培养基称为________培养基。该培养基会 抑制其他种类微生物生长，其原因是该培养基______。

（2）若要通过统计培养基中菌落数来估计样品中的细菌数，上述培养基中还需要添加的成 分是_____，接种时应采用______法，该方法接种培养基后的菌落，不可能是下图中的_______（单选）。

（3）从土壤中分离出分解尿素的细菌后，要对其作进一步的鉴定，可在上述培养基中加入_______指示剂，培养该菌后，如果指示剂变_____，可初步鉴定该种细菌能够分解尿素。

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回答下列（一）、（二）小题

（一）尿素是一种农业上常用的高浓度氮肥，但尿素只有经土壤中某些细菌的分解后才能被植物吸收利用。某同学欲分离出土壤中能分解尿素的细菌，培养基配方如下：

（1）“无菌操作”是微生物培养的基本要求，该实验的培养基在配置时，应先对不含尿素的基本培养基进行_____________法灭菌，待冷却至60°C时，再加入经_____________的尿素溶液。

（2）土壤中能分解尿素的细菌通过____________分解尿素，该种菌对生态平衡所起的作用是___________．

（3）该同学_____________（“能”或“不能”）分离出该种菌。理由是____________。

（二）人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因羊的羊乳中获得（人染色体组成44+XX/YY,羊染色体组成40+XX/YY），流程如下：

（1）在上述基因工程中，获得htPA基因的方法最可能是_______________。基因工程的核心是_______________。

（2）图中①为体外受精，卵（母）细胞一般数量较多，是对供体母羊进行__________激素处理后采集到并培养使之成熟的，而B是经筛选过的、染色体组成为______________且达到_________状态的精子。③过程应将早期胚胎植入到代孕母羊的_________部位。

（3）下列关于胚胎工程的叙述中，错误的是（　 ）

A．体细胞核移植不属于胚胎工程研究的内容

B．图中①过程与体内受精的实质是相同的

C．图中的转基因羊也属于“试管动物”

D．胚胎工程打破了物种间远缘杂交不亲和的障碍

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培养基中含有微生物生长繁殖所需的各种营养成分。分解尿素的细菌的培养基各营养成分如下表所示，请回答下列问题：

（1）根据上表中培养基的成分可推测，其从物理形态上看属于______培养基，从功能上看属于_________培养基，其中为分解尿素的细菌提供碳源的物质是_______。

（2）实验中发现不能分解尿素的微生物不能在该培养基上存活，原因是____。当样品的稀释度足够高时，平板上的菌落数较能准确地反映样品中的______数。

（3）培养过程中若某一组平板上菌落平均数为 56 个/平板，而空白对照组的一个平板上出现了 6 个菌落，某同学将 50（即 56-6）个/平板作为本组菌落数的平均值，该做法是否正确？_____________。请说明理由：_____________________ 。

（4）假设在培养过程中，某培养基经紫外线照射后其上的分解尿素的细菌不能正常生长，需添加某种维生素才能恢复生长，请推测最可能的原因是__________：

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施加到土壤中尿素只有被尿素分解菌分解成氨之后，才能被植物吸收。下表所示配方的培养基可筛选尿素分解菌，它可以在该培养基上生长、形成菌落。请回答下列问题：

（1）该培养基从功能上看属于___________培养基。如果从土壤中获取的样本含尿素分解菌的数量较少，则需要对样本中的细菌进行扩大培养，不能用表格中的培养基，因为________________。

（2）如果对该细菌进行计数，则将得到的细菌用法接种。若实验中每个平板中的菌落数都超过了300，应对样本菌液进行_______________处理。

（3）甲、乙两位同学用（2）中方法测定土壤样品中尿素分解菌的数量，在同一稀释倍数下得到以下结果：甲同学在该浓度下涂布了1个平板，统计的菌落数为49；乙同学在该浓度下涂布了3个平板，统计的菌落数分别为43、54、287，然后取其平均值128作为统计结果。这两位同学的实验结果都是无效的，理由是：

①甲同学：______________________。

②乙同学：__________________。

（4）另一接种细菌的方法是．第二区域划线的起点是_____________。

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土壤是“微生物的天然培养基”，下面是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程，请根据下图回答相关问题：

(1)能分解尿素的细菌代谢类型为＿＿，应从富含有机质的土壤表层取土样。

(2)为分离出土壤中分解尿素的细菌，应该用　　　 的培养基进行分离，并加入＿＿＿指示剂进行鉴别。

(3)若取土样5g，应加入＿＿ml的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液。因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，配制成如图所示的不同浓度的土壤溶液。取样稀释前，一定要＿＿＿以减少误差。将103-107倍的稀释液分别吸取0.1mL加入到固体培养基上，用＿＿＿＿将菌液铺平。这种接种方法称为＿＿＿＿。

(4)将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h～48h，观察并统计具有＿＿＿＿(现象)的菌落数，结果如下表，其中＿＿＿＿倍的稀释比较合适。

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下列有关微生物培养与应用的说法正确的是 （　　）

A. 分离分解尿素的细菌时，尿素是培养基中唯一的氮源和碳源

B. 大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段

C. 微生物在固体培养基上生长时可形成肉眼可见的单个细菌

D. 接种前需要对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手等进行消毒处理

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请回答微生物的培养和应用的有关问题

尿素是一种重要的农业氮肥，但是，尿素并不能直接被农作物吸收。只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后，才能被植物利用。某研究人员尝试从土壤中对分解尿素的微生物进行分离与计数。

1.分解尿素的微生物中含有的酶是______________；为筛选出能分解尿素的微生物，配制培养基时应以______________作为唯一氮源，因此该培养基属于______________培养基。

2.该培养基在接种前应该用______________法灭菌。

3.对初步筛选得到的分解尿素的微生物进行纯化并计数，常用来统计样品中活菌数目的方法是____________________________。在接种前，随机取若干菌后的空白平板先行培养一段时间，这样做的目的是__________________________________________。

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某生物兴趣小组想对土壤中能分解尿素的细菌进行分离，并统计每克土壤样品中的活菌数目，确定了培养基配方(如下表)。将配方中各种物质溶解后，用蒸馏水定容到l 000 mL，再经高温灭菌，制成固体培养基以备用。

（1）为保持干燥，培养皿用________________法灭菌；待培养基冷却到________℃(填“20”“30”“40”或“50”)左右时，在酒精灯附近倒平板；待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，可以防止____________________________，防止造成污染。

（2）根据培养基的成分判断，该同学不能分离出土壤中分解尿素的细菌，原因是____________________________________________。

（3）该同学采用稀释涂布平板法检测样液中细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是________________________________；然后，将l mL样液稀释l00倍，在3个平板上用涂布法分别接入0．1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37，据此可得出每升样液中的活菌数为________________。

（4）若该同学采用显微镜直接计数法测量细菌数量，左下图是一块血细胞计数板正面示意图，其上有________个计数室。右下图是计数室中一个中格的细菌分布示意图，该中格内细菌数量应计为________。

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回答下列有关土壤中微生物分离的问题：

（1）为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培养基时，应选择_______________（填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”）作为氮源，不选择其他两组的原因是______________。

（2）用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有________（答出两点即可）。

（3）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表）：

注：“+”表示有，“—”表示无。

据表判断，培养基甲___（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是______________；培养基乙_________（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是______________。

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[生物--选修1：生物技术实践]

某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下。将各种物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL，再经高温灭菌，制成固体培养基备用。

（1）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌?_____（能／不能），原因是__________________。

（2）培养基用___________方法灭菌，培养皿用__________方法灭菌，待培养基冷却到___________℃左右时，在_____附近倒平板，等平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，可以防止________，以免造成污染。

（3）要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用_________法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的___________就能大约推测出样品中活菌数。

（4）培养分解尿素的细菌时，需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_________。

（5）实验中使用过的培养基及其培养物必须经过___________处理后才能丢弃，以防止微生物的扩散。

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