大肠杆菌是寄生于人和动物肠道中的细菌，其代谢产物能与染料伊红美蓝反应，使菌落呈黑色。测定水...

大肠杆菌是寄生于人和动物肠道中的细菌，其代谢产物能与染料伊红美蓝反应，使菌落呈黑色。测定水样是否符合饮用水卫生标准，常用滤膜测定大肠杆菌的数目。流程如下图所示：

（滤膜法的大致流程：用滤膜过滤待测水样→水样中的细菌留在滤膜上→将滤膜转移到伊红美蓝的培养基（EMB 培养基）上培养→统计菌落数目。）

（1）培养大肠杆菌时，常用的接种方法有______________，过滤待测水样需要用到滤杯、滤膜和滤瓶，其中需要进行灭菌处理的是______________。

（2）从物理性质上划分，EMB培养基属于______________培养基，为检测培养基灭菌是否彻底，对于固体培养基应采用的检测方法是______________。

（3）为检测严重污染水体中大肠杆菌数量，将水样适当稀释后，取样涂布在上述平板培养基中，应选择颜色为______________的菌落进行计数。该方法是通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数，其原理是______________。

（4）该同学进一步思考，利用滤膜法也可能用于测定待测水样中其他微生物的数目。他取了两份水样，一份待测水样来自变酸的果酒，从中检测到两种微生物，它们在结构上的主要区别是_____________________。另一份来自湖泊，若要通过测量蓝藻的数目来研究水华，则培养基配方中则必须添加___________（水、无机盐、碳源、氮源）。

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大肠杆菌是人和动物肠道寄生菌，在一定条件下会引起胃肠道等局部组织感染。检验水样中大肠杆菌数目是否符合生活饮用水卫生标准，常用滤膜法测定，其操作流程如图。大肠杆菌的代谢产物能与伊红美蓝（EMB培养基的指示剂）反应，菌落呈黑色。下列对实验操作的分析，错误的是（　　 ）

A.测定前，滤杯、滤膜和滤瓶均可用干热灭菌法灭菌处理

B.过滤操作要在酒精灯火焰旁进行，防止杂菌污染

C.将过滤完的滤膜紧贴在EMB培养基上，完成大肠杆菌的接种操作

D.EMB培养基属于选择培养基，只有大肠杆菌能正常生长并形成黑色菌落

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测定水样是否符合饮用水卫生标准，常用滤膜法测定大肠杆菌的数目。流程如图所示，滤膜法的大致流程：用滤膜过滤待测水样→水样中的细菌留在滤膜上→将滤膜转移到伊红美蓝的培养基(EMB 培养基)上培养→统计菌落数目。据图回答问题：

(1)过滤待测水样需要用到滤杯、滤膜和滤瓶，其中需要进行灭菌处理的是___________。与过滤有关的操作都要在_______________旁进行。

(2)将完成过滤之后的滤膜紧贴在EMB培养基上，这属于微生物培养中的_________操作。从物理状态角度分析，EMB 培养基属于___________培养基。

(3)某生物兴趣小组的某同学尝试按照上述方法进行测定，无菌操作下将 10ml 待测水样加入到 90ml 无菌水中，稀释后的菌液通过滤膜法测得 EMB 培养基上的菌落数平均为124，黑色菌落数平均为31，则推测1升待测水样中的大肠杆菌数目为________个。

(4)该同学进一步思考，利用滤膜法也可能用于测定待测水样中其他微生物的数目。他取了两份水样，一份待测水样来自变酸的果酒，另一份来自明德中学屈子湖，若要通过测量蓝藻的数目来研究水华，应更换上述过滤装置中的滤膜，为了减少细菌的干扰，应选择孔径________(填 “更小”或“不变”或“更大”)的滤膜。

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测定水样是否符合饮用水卫生标准，常用滤膜法测定大肠杆菌的数目。流程如图所示，滤膜法的大致流程：用滤膜过滤待测水样→水样中的细菌留在滤膜上→将滤膜转移到伊红美蓝的培养基（EMB培养基）上培养→统计菌落数目。据图回答问题：

（1）过滤待测水样需要用到滤杯、滤膜和滤瓶，其中需要进行灭菌处理的是________。与过滤有关的操作都要在________________进行。

（2）将完成过滤之后的滤膜紧贴在EMB培养基上，这属于微生物培养中的________操作，从物理状态角度分析，EMB培养基属于________培养基。

（3）某生物兴趣小组的某同学尝试按照上述方法进行测定，无菌操作下将10ml待测水样加入到90ml无菌水中，稀释后的菌液通过滤膜法测得EMB培养基上的菌落数平均为124，黑色菌落数平均为31，则推测1升待测水样中的大肠杆菌数目为________个。

（4）该同学进一步思考，利用滤膜法也可能用于测定待测水样中其他微生物的数目。他取了两份水样，一份待测水样来自变酸的果酒，从中检测到两种微生物，它们在结构上的主要区别是________，另一份来自昌源河，若要通过测量蓝藻的数目来研究水华，应更换上述过滤装置中的滤膜，为了减少细菌的干扰，应选择孔径________（填“更小”或“不变”或“更大”）的滤膜。

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伊红—美蓝培养基常用来鉴别大肠杆菌，其原理是

A．大肠杆菌在该培养基中形成特定的菌落

B．大肠杆菌能使培养基改变颜色

C．大肠杆菌菌的代谢产物与伊红—美蓝结合，使菌落呈黑色，并有金属光泽

D．大肠杆菌能在该培养基中很好生活，其余微生物不能很好生活

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下列关于实验现象的叙述，正确的是

A．DNA鉴定实验中，DNA被二苯胺直接染成蓝色

B．刚果红染料可以和纤维素的分解产物形成红色复合物

C．在伊红美蓝培养基上，大肠杆菌菌落呈现黑色

D．焙花青-铬矾法可将细胞核染成红色

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大肠杆菌是基因工程常用的受体菌。它既可生活在人和动物肠道内，又可随粪便排出污染环境，因而常用作饮水和食物（或药物）的卫生学标准（国家规定，每升饮用水中大肠杆菌数不应超过3个）。请回答下列与大肠杆菌有关的问题：

（1）从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于________；从生存环境分析推测，它的新陈代谢类型应该是________。

（2）某研究性学习小组对本校自来水进行了检测。一同学用无菌吸管吸取1 mL水样至盛有________ mL无菌水的试管中，得到10¹倍稀释的样品；依次稀释，得到10²、10³倍稀释的样品；把每种稀释度的样品分别接种到3个平板培养基上培养，最后统计菌落数。若3种稀释度的平均菌落数分别为402、30、2，应以_______倍稀释的样品来计算水样中的菌体数；若接种量均为0.1 mL，则该水样中大肠杆菌超标_______万倍。

（3）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。

将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL。根据用途划分该培养基属于________(选择/鉴别)培养基。该培养基中的碳源是________。

（4）培养大肠杆菌时，常用的接种方法是平板划线法和______________。为防止杂菌污染需要对培养基和培养皿进行____________。

（5）以下微生物发酵生产特定产物时，所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是________(双选)。

A．制作果酒      B．由果酒制作果醋      C．制作泡菜      D．制作腐乳

（6）利用培养基不仅可以分离培养微生物，也可以进行植物组织培养。与微生物培养明显不同的是，用于组织培养的培养基中还需要加入________。

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伊红—美蓝培养基常用来鉴别大肠杆菌，其原理是（  ）

A．大肠杆菌在该培养基中形成特定的菌落

B．大肠杆菌能使培养基改变颜色

C．大肠杆菌菌的代谢产物与伊红—美蓝结合，使菌落呈深紫色，并有金属光泽

D．大肠杆菌能在该培养基中很好生活，其余微生物不能很好生活

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伊红—美蓝培养基常用来鉴别大肠杆菌，其原理是

A．大肠杆菌在该培养基中形成特定的菌落     B．大肠杆菌能使培养基改变颜色

C．大肠杆菌的代谢产物与伊红—美蓝结合，使菌落呈深紫色，并有金属光泽

D．大肠杆菌能在该培养基中很好生活，其余微生物不能很好生活

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（8分）国家饮用水标准规定，每升饮用水中大肠杆菌不超过3个。某小组欲通过实验来检测自来水中大肠杆菌的含量，已知大肠杆菌在伊红—美蓝培养基培养，大肠杆菌菌落呈深紫色。请根据下列有关实验步骤回答问题。

(1) 配制培养基：配制伊红—美蓝培养基时，除蛋白胨、乳糖、伊红、美蓝等原料外，还需要水、无机盐和________。在这些成分中，能为大肠杆菌提供氮源的是________。搅拌加热至完全溶解后调节________，分装到锥形瓶。

(2) 倒平板：配制好的培养基用____________法灭菌后，待培养基冷却到50℃左右倒平板。平板冷凝后应将平板______　　　 __放置，以防止皿盖上的水珠落入培养基。

(3) 接种：在右图的系列稀释操作中(101、102、103表示稀释倍数)，依次将1 mL液体移入下一个盛有________mL蒸馏水的试管中。过程a所用的接种方法为　　　　　　　　　　　　 。

(4) 观察与计数：通过一段时间的培养，观察统计培养皿表面深紫色菌落的数目，结果如图所示，则自来水样本中大肠杆菌超标　　　　　　　　　　　　 万倍

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