酿酒厂常用酸性脲酶去除酒精类饮品中的尿素，以改善酒精类饮品的品质。请回答下列问题：（1）从...

酿酒厂常用酸性脲酶去除酒精类饮品中的尿素，以改善酒精类饮品的品质。请回答下列问题：

（1）从土壤中筛选酸性脲酶生产菌，其培养基的主要成分有葡萄糖、尿素、琼脂等，从功能上分析，该培养基属于________培养基。该培养基的氮源来自_________。

（2）筛选和纯化酸性脲酶生产菌常用的两种接种方法是___________和_____________。配制浓度梯度为10-1的系列稀释液时，需用移液管将lmL菌液移入盛有____mL蒸馏水的试管中。

（3）对同一浓度的酸性脲酶生产菌稀释液，分别用血球计数板计数和稀释涂布平板法计数，若不存在实验误操作，则前者的数量_______（多于／等于／小于）后者，其原因是________________________。

（4）若用海藻酸钠固定含酸性脲酶的细菌时，应将海藻酸钠溶液和细胞混合滴入溶液中。下表是不同浓度海藻酸钠形成的凝胶珠状况，从表中看出，海藻酸钠的浓度应选用__________g／dL。若利用固定化酶技术，它的优点是___________________。

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酵母菌作为一种常见的微生物，在传统和现代生物技术中得到了广泛的应用。请回答下列问题：

（1）酵母菌广泛分布在自然界中，科研人员为了分离、筛选蓝莓果酒专用酵母来改善蓝霉果酒的品质，进行了如下实验：

①　 取不同品种的成熟蓝莓制果浆，置于适宜温度的恒温培养箱中自然发酵，直至产生大量气泡和明显酒味。取不同品种成熟蓝莓的原因是　　 。

②将蓝莓发酵液用　　 进行梯度稀释后，进行涂布平板操作（每个梯度3个平板），恒温培养2d，根据酵母菌菌落特征挑取单菌落。

③将挑取的单菌落扩大培养后，通过　　 法分离纯化，然后保存菌种。

④检测筛选菌株的发酵性能，根据实验结果推知，　　 （品种）对乙醇和酸的耐受性最强，是较理想的酿酒菌种。

（注：+数量表示菌落数量的多少，-表示没有菌落生长）

（2）下图是固定化酵母发酵与游离酵母制作蓝莓果酒发酵的对比结果，从图中可以看出，两者发酵速率相近，但发酵前期游离发酵比固定发酵产生的酒精量多，主要原因是　　 ；后期游离酵母发酵速度减慢，除了底物浓度降低外，还可能是因为　　 。相较于固定化酶技术，固定化酵母细胞常用的方法是　　 ，固定化酵母发酵的主要优点是　　 。

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某研究小组按下图所示过程从土壤中筛选能高效降解尿素的细菌。请回答下列问题。

（1）步骤②是　　　　　　　　　　　　 。为了筛选目的菌，步骤③的培养基中加入的唯一氮源为　　　　　　　 ，这种培养基属于　　　　　　　　　　 （填“鉴别”或“选择”）培养基。

（2）用平板划线法接种细菌是，不需用下列哪种器具？　　　　　　　　　　　 （填字母）。在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线，原因是　　　　　　　　　　 。

（3）将接种后的培养基和作为对照的　　　　　　　　 培养基同时放入恒温培养箱中培养，为了对初步筛选出来的菌种作进一步的鉴定，可在培养基中加入　　　　　　　　　　 指示剂，若指示剂变成　　　　　　 色，则说明该菌种能够分解尿素。

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[选修1一生物技术实践]

人和哺乳动物的尿液中含有尿素，大量尿素的排放会对环境造成污染。已知土壤中有些细菌含有脲酶，可降解尿素。下图是某同学从土壤中筛选降解尿素的细菌的实验流程。请回答有关问题：

配制土壤溶液→系列稀释→涂布平板与培养→菌落计数

（1）为筛选能分泌脲酶的细菌，一般选用__________的培养基（从营养物质方面答）。从功能上讲，该培养基属于__________培养基。

（2）__________法是将样液进行一系列的梯度稀释，然后接种培养细菌并统计菌落数目。在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在__________旁进行操作。稀释处理的目的是___________________。

（3）若培养基中存在含有脲酶的细菌，则其菌落周围会出现红色分解圈，这是由于尿素被分解产生____，遇到培养基中所加酚红指示剂产生了颜色变化。

（4）实验中使用过的培养基在实验完成后应如何处理？__________；为什么？____________________。

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人和哺乳动物的尿液中含有尿素，大量尿素的排放会对环境造成污染，已知土壤中有含有脲酶，可降解尿素，下图是某同学从土壤中筛选降解尿素的细菌的实验过程，请回答有关问题：

配制土壤溶液→系列稀释→涂布平板与培养→菌落计数

（1）为筛选能分泌脲酶的细菌，一般选用　　　　　　 的培养基（从营养物质方面答）。从功能上讲，该培养基属于　　　　　　 培养基。

（2）　　　　　　　 法是将样液进行一系列的梯度稀释，然后接种培养细菌并统计菌落数目，在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在　　　　　　　　 旁进行操作。稀释处理的目的是　　　　　　　 。

（3）若培养基中存在还有脲酶的细菌，则其菌落周围会出现红色分解圈，这是由于尿素被分解产生　　　　 ，

遇到培养基中所加酚红指示剂产生了颜色变化。

（4）实验中使用过的培养基在实验完成后应如何处理？　　　　　　　　 ；

为什么？　　　　　　　　　　　　　　 。

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生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，为从土壤中微生物筛选到能分解尿素的细菌。培养基成分如下表所示，实验步骤如图1所示。回答下列问题

（1）分解尿素的细菌能分泌________酶，能将尿素分解成__________。

（2）培养基中为“目的菌”生长提供氮源和碳源的物质分别来自________和_________。为了满足图示锥形瓶中目的菌对氧气的需求，在培养时应采用的操作方法是_______________________________。

（3）图中将细菌转到固体培养基上时，应采用________法接种以获得单个菌落。初步筛选出来的菌种还需要用生化的方法作进一步的鉴定，鉴定方法是检测初步筛选目的菌种培养基的pH，若pH_______（降低/不变/升高），说明该菌种能够分解尿素。

（4）A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。有同学认为造成A同学实验结果的原因是培养基被杂菌污染。为了证实该说法，则进一步实验的操作思路是________________。

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施加到土壤中尿素只有被尿素分解菌分解成氨之后，才能被植物吸收。下表所示配方的培养基可筛选尿素分解菌，它可以在该培养基上生长、形成菌落。请回答下列问题：

（1）该培养基从功能上看属于___________培养基。如果从土壤中获取的样本含尿素分解菌的数量较少，则需要对样本中的细菌进行扩大培养，不能用表格中的培养基，因为________________。

（2）如果对该细菌进行计数，则将得到的细菌用法接种。若实验中每个平板中的菌落数都超过了300，应对样本菌液进行_______________处理。

（3）甲、乙两位同学用（2）中方法测定土壤样品中尿素分解菌的数量，在同一稀释倍数下得到以下结果：甲同学在该浓度下涂布了1个平板，统计的菌落数为49；乙同学在该浓度下涂布了3个平板，统计的菌落数分别为43、54、287，然后取其平均值128作为统计结果。这两位同学的实验结果都是无效的，理由是：

①甲同学：______________________。

②乙同学：__________________。

（4）另一接种细菌的方法是．第二区域划线的起点是_____________。

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回答下列有关土壤中微生物分离的问题：

（1）为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培养基时，应选择_______________（填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”）作为氮源，不选择其他两组的原因是______________。

（2）用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有________（答出两点即可）。

（3）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表）：

注：“+”表示有，“—”表示无。

据表判断，培养基甲___（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是______________；培养基乙_________（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是______________。

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下图是从土壤中筛选分解尿素细菌的过程，请回答下列问题。

（1）图中选择培养基应以______为唯一氮源；鉴别培养基还需添加________作指示剂，分解尿素细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的指示剂将变成_____色。

（2）土壤中的细菌将尿素分解为______之后，才能被植物利用，土壤中的细菌之所以能将尿素分解，是因为细菌能合成______________。

（3）制备实验所需的培养基时，在各成分都溶化后和分装前，要进行的是________和灭菌，对培养基进行灭菌的常用方法是 ______________。倒平板时要待平板冷凝后，将平板倒置，其主要原因是______________________________。

（4）在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为105的土壤样品溶液0.1 mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为191、16、326、173和182。该过程采取的接种方法是_____，每克土壤样品中的细菌数量为 ______×108个；与血细胞计数板相比，此计数方法测得的细菌数较_____（填“多”或 “少”）。

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下图是从土壤中筛选分解尿素细菌的过程，请回答下列问题。

（1）图中选择培养基应以______为唯一氮源；鉴别培养基还需添加________作指示剂，分解尿素细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的指示剂将变成_____色。

（2）土壤中的细菌将尿素分解为______之后，才能被植物利用，土壤中的细菌之所以能将尿素分解，是因为细菌能合成______________。

（3）为了统计尿素分解菌的数量，我们常采用______________，但计数值往往偏____________，是因为__________________________________。同时为了计数的准确性，我们往往只统计菌落数____________范围的平板。

（4）将实验获得的优质尿素分解菌进行短期保藏，常将其接种到____________上，4℃下可保藏3～6个月。

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