抗菌肽具有热稳定性以及广谱抗细菌等特点,其广泛的生物学活性显示了在医学上良好的应用前景。科研工作者将若干编码抗菌肽(ABP)序列按照首尾相连的方式插在质粒PLG339的布康唑抗性基因内部,形成长度为4 800bp(1bp为一个碱基对)的重组质粒PLG339-nABP,相关过程如图所示。已知重组质粒中,每个编码ABP序列中都含有限制酶AccⅢ的一个切点,基因trpA的表达产物可使细胞利用无机氮源合成色氨酸(色氨酸是微生物生长必须的氨基酸)。请据图回答下列问题:
(1)质粒PLG339的基本单位是______。
(2)若PLG339-nABP经限制酶AccⅢ处理后,产生66bp和4140bp两种长度的DNA片段,单个抗菌肽(ABP)最多由______个氨基酸构成(不考虑终止密码)。
(3)现有大肠杆菌和酵母菌两种菌群,可作为导入PLG339-nABP的受体细胞是______,理由是______。
(4)若选定的受体细胞为trpA基因缺陷型,则需采用两步法筛选含重组质粒的细胞。第一步筛选的固体培养基在营养成分上的要求是:______,不含色氨酸;第二步采用“影印法”,将第一步所得菌落转移到新的培养基上进行培养,该培养基中应添加______。通过对照,最终选出能在第一步培养基上生长,而不能在第二步培养基上生长的菌落即为符合要求的成功导入重组质粒的细胞。
(5)在测试转基因表达产物ABP对金黄色葡萄球菌的杀菌效果时获得了如图所示的结果,据此可获得的结论是:ABP抑菌效果与ABP的______和金黄色葡萄球菌的______有关。
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抗菌肽具有热稳定性以及广谱抗细菌等特点,其广泛的生物学活性显示了在医学上良好的应用前景。科研工作者将若干编码抗菌肽(ABP)序列按照首尾相连的方式插在质粒PLG339的布康唑抗性基因内部,形成长度为4 800bp(1bp为一个碱基对)的重组质粒PLG339-nABP,相关过程如图所示。已知重组质粒中,每个编码ABP序列中都含有限制酶AccⅢ的一个切点,基因trpA的表达产物可使细胞利用无机氮源合成色氨酸(色氨酸是微生物生长必须的氨基酸)。请据图回答下列问题:
(1)质粒PLG339的基本单位是______。
(2)若PLG339-nABP经限制酶AccⅢ处理后,产生66bp和4140bp两种长度的DNA片段,单个抗菌肽(ABP)最多由______个氨基酸构成(不考虑终止密码)。
(3)现有大肠杆菌和酵母菌两种菌群,可作为导入PLG339-nABP的受体细胞是______,理由是______。
(4)若选定的受体细胞为trpA基因缺陷型,则需采用两步法筛选含重组质粒的细胞。第一步筛选的固体培养基在营养成分上的要求是:______,不含色氨酸;第二步采用“影印法”,将第一步所得菌落转移到新的培养基上进行培养,该培养基中应添加______。通过对照,最终选出能在第一步培养基上生长,而不能在第二步培养基上生长的菌落即为符合要求的成功导入重组质粒的细胞。
(5)在测试转基因表达产物ABP对金黄色葡萄球菌的杀菌效果时获得了如图所示的结果,据此可获得的结论是:ABP抑菌效果与ABP的______和金黄色葡萄球菌的______有关。
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纳米银具有广谱持久的抗菌性能而被广泛应用,科研人员利用小球藻进行实验以探究纳米银释放到水环境中可能带来的风险,实验结果如下。下列说法正确的是( )
A. 随纳米银浓度的提高,对小球藻光合作用的促进作用加强
B. 随纳米银浓度的提高,对小球藻呼吸作用的抑制作用加强
C. 测量小球藻呼吸作用溶解氧的消耗量应在光照条件下进行
D. 纳米银中的Ag+不会通过影响酶而影响小球藻的生命活动
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纳米银具有广谱持久的抗菌性能而被广泛应用,科研人员利用小球藻进行实验以探究纳米银释放到水环境中可能带来的风险,实验结果如下。下列说法正确的是( )
A. 随纳米银浓度的提高,对小球藻光合作用的促进作用加强
B. 随纳米银浓度的提高,对小球藻呼吸作用的抑制作用加强
C. 测量小球藻呼吸作用溶解氧的消耗量应在光照条件下进行
D. 纳米银中的Ag+不会通过影响酶而影响小球藻的生命活动
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纳米银具有广谱持久的抗菌性能而被广泛应用,科研人员利用小球藻进行实验以探究纳米银释放到水环境中可能带来的风险,实验结果如下。下列说法正确的是
A. 随纳米银浓度的提高,对小球藻光合作用的促进作用加强
B. 随纳米银浓度的提高,对小球藻呼吸作用的抑制作用加强
C. 测量小球藻呼吸作用溶解氧的消耗量应在光照条件下进行
D. 纳米银中的Ag+不会通过影响酶而影响小球藻的生命活动
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(22分)Ⅰ、抗菌肽是生物体内广泛存在用来抵御外来病原体的一类小分子蛋白质。它具有广谱抗菌活性。请回答下列问题:
(1)从免疫调节的方式上,抗菌肽的作用属于________免疫。研究发现,抗菌肽可以在细菌细胞膜上穿孔而成离子孔道,从而改变细菌细胞膜的________,导致细菌死亡。
(2)采用基因工程的方法人工合成抗菌肽时,首先根据其氨基酸排列顺序,用________
________的方法获得家蚕抗菌肽基因,该基因与家蚕体内原有的基因相比不具有。
(3)将该基因与________结合导入大肠杆菌细胞中,再将重组大肠杆菌置于适宜条件下培养,当大肠杆菌的群体生长处于________期时,细胞内会大量积累抗菌肽,这时就可以分离提取抗菌肽。
Ⅱ、右图是对一位患有胃瘘的妇女所进行的临床实验结果。
实验Ⅰ让该妇女吃麦片粥,但该妇女明显对麦片粥厌恶;
实验Ⅱ让该妇女吃自选喜欢的食物如新鲜蔬菜、炸鸡腿、蛋糕等。两次实验中食物经咀嚼后都没有进入胃内。
(1)实验Ⅱ胃液分泌量高于实验Ⅰ,说明________会影响
低级神经中枢对胃液分泌的调节作用。
(2)把食物通过胃瘘灌入该妇女胃内,一段时间后有胃液分泌;若阻断神经联系,食物在胃内仍能引起少量胃液分泌,该实验结果说明________。
(3)有人提出了胃泌素的假说,认为胃黏膜可分泌一种物质——胃泌素,能影响胃液的分泌。请探究胃泌素的作用。
①主要实验材料和用品:小鼠若干只、0.9%生理盐水、胃黏膜提取液。
②假设_________________________________________________。
③实验步骤
a.把生长发育相同的健康小鼠分成数量相等的甲、乙两组
b.甲组静脉注射一定浓度的胃黏膜液,乙组注射等量的0.9%生理盐水。
c.在相同且适宜的条件下饲养,观察并记录小鼠胃液的分泌状况。
④实验结果预测:
a.如果出现________,假设成立 。
b.如果出现,假设不成立 。
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抗菌肽通常是由短氨基酸序列构成的小分子肽,具有广谱抗菌活性,对病毒和癌细胞都有一定的杀伤力,科研人员将抗菌肽基因导入大肠杆菌细胞内获得了能高效表达抗菌肽的工程菌。请回答下列问题。
(1)利用PCR技术扩增抗菌肽基因时,设计的引物之间不能________,以避免引物自连。反应体系中,使模板DNA解旋的操作方法是________,加入的Taq酶所起的作用是________。
(2)大肠杆菌含有许多蛋白酶,在制备抗菌肽目的基因表达载体时宜选用分泌型载体。分泌型载体能将抗菌肽在信号序列的指引下运出细胞外,使用分泌型载体的突出优点是________。将基因表达载体导入大肠杆菌前,需要用________处理大肠杆菌制备________细胞。
(3)抗菌肽本身对大肠杆菌具有一定的杀伤性,对抗菌肽的分子构造进行改造,可得到对大肠杆菌杀伤性小的抗菌肽,该改造技术直接改造的对象是________。
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纳米银由于抗菌性能良好而被广泛应用于食物容器、个人护理品等商品中,但其释放到水环境中的风险也引起了研究者的重视。某科研小组用单细胞真核生物小球藻为实验材料,采用溶氧法探究不同浓度纳米银对小球藻生长情况的影响,进行了如下实验:
图1
①材料用具:不同浓度的纳米银溶液,培养液,小球藻若干,溶解氧测定仪,蒸馏水等
②实验步骤:
第一步:将小球藻平均分为4组,分别放入含有等量培养液的图1所示装置的样品池中,编号A、B、C、D。
第二步:在A、B、C样品池中分别添加等量1 mg/L、5 mg/L、10 mg/L的纳米银溶液,D组加入等量蒸馏水,将各装置放在相同且适宜的条件下培养。
第三步:培养10分钟后,检测各样品池中溶氧量的变化,结果如图2所示。
第四步:把样品池中的小球藻取出,进行色素的提取和测定,结果如图3所示。
图2
图3
请回答下列问题:
(1)通过改变图1中光源,可研究________、________对光合作用的影响。
(2)小球藻光合作用产生氧气的场所是________。
(3)如果用计数法研究纳米银对小球藻生长的影响,实验中需要使用________和显微镜,对小球藻进行色素提取时需要用到________试剂。
(4)由图2、图3的实验结果可知纳米银对小球藻生长的影响是________,原因是_____________________。
(5)科研人员想要探究纳米银对小球藻呼吸作用的影响,请简要写出实验设计思路:____________。
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纳米银由于抗菌性能良好而被广泛应用于食物容器、个人护理品等商品中,但其释放到水环境中的风险也引起了研究者的重视。某科研小组用单细胞真核生物小球藻为实验材料,采用溶氧法探究不同浓度纳米银对小球藻生长情况的影响,进行了如下实验:
①材料用具:不同浓度的纳米银溶液,培养液,小球藻若干,溶解氧测定仪,蒸馏水等
②实验步骤:
第一步:将小球藻平均分为4组,分别放入含有等量培养液的图1所示装置的样品池中,编号A、B、C、D。
第二步:在A、B、C样品池中分别添加等量1 mg/L、5 mg/L、10 mg/L的纳米银溶液,D组加入等量蒸馏水,将各装置放在相同且适宜的条件下培养。
第三步:培养10分钟后,检测各样品池中溶氧量的变化,结果如图2所示。
第四步:把样品池中的小球藻取出,进行色素的提取和测定,结果如图3所示。
请回答下列问题:
(1)通过改变图1中光源,可研究________、________对光合作用的影响。
(2)小球藻光合作用产生氧气的场所是________。
(3)如果用计数法研究纳米银对小球藻生长的影响,实验中需要使用________和显微镜,对小球藻进行色素提取时需要用到________试剂。
(4)由图2、图3的实验结果可知纳米银对小球藻生长的影响是________,原因是______________________。
(5)科研人员想要探究纳米银对小球藻呼吸作用的影响,请简要写出实验设计思路:________________。
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抗生素滥用导致的耐药性目前已成为一个严重的公共健康问题,近年来,“超级细菌”等事件的发生更显示出这一问题的严重性。抗菌肽(AMPs)是一类具有广谱抗菌性,而且其不易产生耐药性。为了改善抗菌肽的抗菌功能,常利用基因工程技术使抗菌肽在不同来源的宿主细胞内进行蛋白的重组表达。β-防御素是一种抗菌肽。构建β-防御素(β-defensin130)表达载体在大肠杆菌中表达。表达载体(PET-28a)和含有目的基因β-防御素(defensin130)的片段如下,结合已知条件回答下列问题:
(说明:Kanr和Ampr分别表示卡那霉素和氨苄青霉素抗性基因;promoter表示基因的启动部位)
(1)获得含有目的基因的重组DNA分子,需用___________和___________两种酶分别切割表达载体和含有目的基因的片段,并用___________酶将它们连接。
(2)把构建好的重组DNA分子导入到受体细胞,用适宜浓度的氯化钙处理受体细胞增加细胞壁的通透性的目的是___________。
(3)筛选含有目的基因β-防御素(β-defensin130)的受体细胞,先将菌液涂布在含有___________(抗生素)的培养基中培养,然后将所有菌落转移至含有___________(抗生素)的培养基中培养,最后挑选出目的菌落。
(4)在无菌操作下将目的单菌落用接种环取出,再用划线法接种在斜面上,37°C培养24小时后,置于___________冰箱中保存。
(5)若受体细胞为双子叶植物,常用___________法将目的基因导入植物体细胞,再将体细胞进行组织培养,得到转基因植物。
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【生物——选修1:生物技术实践】用红酵母发酵生产胡萝卜素具有成本低、周期短、菌体无毒,并含有多种其他生物活性物质的优点,因此被认为具有广泛的应用前景。请回答:
(1)下列发酵过程起主要作用的微生物中与红酵母的细胞结构类似的是________________。
A.制作果醋 B.制作腐乳 C.制作泡菜 D.制作酸奶
(2)实验室培养红酵母所需要培养基常用的灭菌方法是___________。在分离红酵母的培养基中添加青霉素,目的是___________________________________。
(3)为将分离得到的红酵母菌株纯化,可以用_________和__________方法接种。
(4)实验室用红酵母提取胡萝卜素的过程是先收集菌体细胞,然后进行研磨破碎细胞壁,最后用有机溶剂进行萃取和浓缩。现有乙醇和乙酸乙酯两种溶剂,应选用____________作为萃取剂,原因是_______。
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