-
某研究团队拟从餐厨垃圾中分离具有高效降解能力的微生物，并制成菌制剂，用于餐厨垃圾高效无害化处理。设计实验如下：
步骤一：取一定量的餐厨垃圾样品，筛除大块杂质后，装入无菌袋中密封，备用。
步骤二：配制用于培养菌种的培养基，配方如下：
| 成分 | 蛋白胨 | 牛肉膏 | 氯化钠 | 琼脂 |
| 含量（g/L） | 10 | 15 | 10 | 5 |
1.根据配方可知，该培养基属于
A.固体培养基 B.液体培养基
C.通用培养基 D.选择培养基
步骤三：制备样品稀释液，并将不同浓度的样品稀释液涂布于平板培养基表面进行培养，48h后观察结果。
2.在涂布过程中需要用到的工具有
A.无菌圆纸片 B.无菌玻璃刮铲 C.酒精灯 D.接种环 E.无菌滴管
3.培养后，培养基上长出了35个菌落，通过观察菌落的____________，可初步判断是20种不同的菌种。为进一步确定菌种类型，还需从分子水平进行的检测方法是_____________。
步骤四：对20种菌种进行分离纯化。为了比较这些菌种对餐厨垃圾的降解效果，分别配制含有餐厨垃圾主要成分（淀粉、蛋白质、脂肪和纤维素）的培养基，分别用于测定各菌种对其主要成分的降解效果，并进行测定。图表示其中4种菌种（X1-X4）在淀粉培养基上的培养结果，表3为这四种菌的测定结果。
四种菌种对餐厨垃圾各成分的降解系数
| 菌种 编号 | 淀粉 （D/D0） | 蛋白质 （D/D0） | 脂肪 （D/D0） | 纤维素 （D/D0） |
| X1 | 2.26±0.20 | 2.26±0.08 | 1.06±0.05 | 1.17±0.05 |
| X2 | 1.90±0.08 | 1.90±0.08 | 1.10±0.09 | 1.05±0.11 |
| X3 | 1.78±0.05 | 1.78±0.19 | 1.20±0.11 | 3.13±0.26 |
| X4 | 2.09±0.07 | 2.09±0.08 | 2.10±0.02 | 2.39±0.14 |
备注：降解系数（D/D0）越大，降解效果越明显。
4.写出图所示的测定菌种对淀粉降解效果的实验原理：_______________。
5.根据表中数据判断，降解餐厨垃圾能力最强的菌种是______________。
-
拟从餐厨垃圾中分离具有高效降解能力的微生物制成菌剂，用于餐厨垃圾高效无害化处理。配制用于培养菌种的培养基（如下表），为比较这些菌种的降解效果，分别配制含有餐厨垃圾主要成分（淀粉、蛋白质、脂肪和纤维素）的培养基，检测效果如图。相关说法不正确的是（ ）
培养菌种用培养基
| 成分 | 蛋白胨 | 牛肉膏 | 氯化钠 | 琼脂 |
| 含量（g/L） | 10 | 15 | 10 | 5 |
A.根据配方可知，该培养基属于固体培养基
B.在涂布过程中需要用到涂布器和酒精灯
C.透明圈表示菌种可降解培养基中含有的餐厨垃圾成分
D.D0/D的值越大，说明菌种的降解效果越好
-
近期垃圾分类逐步推行，采用微生物法是处理餐厨垃圾的研究热点。研究人员拟筛选出能高效降解有机物的耐高温菌株，以期实现餐厨垃圾的减量化和无害化。技术流程如下：
（1）样品采集；样品取自某食堂的餐厨垃圾，原因是_______________________________。
（2）分离纯化：利用_______（方法）进行菌株的分离纯化，选择______℃（填“37”或“55”）恒温箱中进行培养，原因是：此温度有利于___________。
（3）鉴别培养：对餐厨垃圾组分进行分析发现，其中纤维素类含量较高。若对菌株的纤维素降解活性进行鉴别，需将分离纯化得到的各菌种，接种于加入____________的培养基中，通过比较菌落的________，来判断降解活性的高低。
（4）现将各类有机物降解活性较高的3个菌株分别制成菌剂，测定其对餐厨垃圾实际降解能力，实验思路如下：
①配制培养基：将纤维素、淀粉、脂肪、蛋白质和水，按照餐厨垃圾的组分比例配制。其中提供碳源的是_______，提供氮源的是____________。
②____________________。
③____________________ 。
-
对于农作物秸秆的处理手段越来越倾向于添加高效降解微生物进行腐熟堆肥。为了寻求高效降解纤维素的微生物，某科研团队进行了纤维素优势分解菌的筛选实验。主要步骤如下：
①制备培养基。
②纤维素分解菌的分离、纯化。取富集培养后的土样培养液，经适当稀释后，移取培养液各0.1mL分别接种到能分别筛选出细菌、真菌和放线菌的固体培养基上进行分离、纯化培养。
③纤维素分解菌的初筛。将已经纯化的菌株接种到同一个以纤维素为唯一碳源的固体培养基上，使用刚果红染色法，根据培养基平板上透明圈直径（D）与菌落直径（d）比值的大小，初步筛选出纤维素优势分解菌。
回答下列问题：
（1）为了制成固体培养基，除了水、碳源、氮源和无机盐等基本配方以外，培养基中通常还需加入________。微生物吸收的无机盐的作用是_________________________________________________________________（答出两点即可）。
（2）步骤②、③中，若将稀释后且富含多种类型微生物的土样培养液直接涂布于同一个以纤维素为唯一碳源的固体培养基上，可能导致错过优势纤维素分解菌的发现，原因是___________________________。某研究人员将1mL培养液稀释100倍后，在4个平板上分别接入0.1mL的稀释液，经适当培养后，4个平板上的菌落数分别是15、151、155、159，据此可得出1L培养液中的活菌数是__________个。
（3）步骤③中，刚果红可以与纤维素形成______色复合物。接种在培养基上初筛分离得到的4个菌株的观察结果如下表。据表分析，哪号菌株产生的纤维素酶活性最高或其纤维素酶量最大？理由是什么？_______________________________________________
| 菌株编号 | 菌落直径d（cm） | 透明圈直径D（cm） | D/d |
| 1 | 0.3 | 0.9 | 3.00 |
| 2 | 0.3 | 0.6 | 2.00 |
| 3 | 0.3 | 1.3 | 4.33 |
| 4 | 0.6 | 2.0 | 3.33 |
-
分离筛选降解纤维素能力强的微生物对于解决秸秆等废弃物资源的再利用和环境污染问题具有理论和实际意义。研究人员从土壤和腐烂的秸秆中分离筛选出能高效降解纤维素的菌株，并对筛选出的菌株进行了初步研究。
（1）对培养基进行灭菌的常用方法是 。为在培养基表面形成单个菌落，若以接种环为工具，则用 法进行接种。
（2） 先将样品悬液稀释后涂在放有滤纸条的固体培养基上进行筛选得到初筛菌株。再将初筛菌株接种到以 为唯一碳源的培养基培养2～5天，加入 溶液后，依据出现的颜色反应进行筛选，观察菌落特征并测量 。同时将初筛菌株制备成的菌液放入加有滤纸条的液体培养基中，恒温振荡培养8天，观察滤纸条的破损情况。结果见表。由表可知，8种菌株中1、3、7号菌株产酶能力较强,原因是 。
注: ① DP = （D / d） 2，其中d表示菌落直径（cm） ，D表示水解圈直径（cm）
②“+”为滤纸边缘膨胀， “+ + ”为滤纸整齐膨胀并弯曲，“+ + + ”为滤纸不定形“+ + + +”为成团糊状“+ + + + +” 为半清状
（3） 为进一步研究1、3、7号菌株对秸秆降解的效果。分别用这三种菌株对秸秆进行处理，并在第5天和第10天对秸秆和秸秆中含有的纤维素、半纤维素以及木质素等组分的降解情况进行了测定。结果见下图。
由图分析可知，三种菌株对 的降解最强，与第5天结果相比，第10天秸秆各组分中 的降解率变化最大。整体分析 号菌株的降解效果最好。
-
研究认为，用固定化酶技术处理污染物是很有前途的，如将大肠杆菌得到的三酯磷酸酶固定到尼龙膜上制成制剂，可用于降解残留在土壤中的有机磷农药，与微生物降解相比，其作用不需要适宜的（ ）
A．温度 B．酸碱度 C．水分 D．营养
-
咔唑（含N有机物）具有潜在致癌性，且结构稳定难以清除。为了获得高效降解咔唑的微生物，研究人员设计了如图所示的实验方案。下列针对该方案的表述正确的是（ ）
A.油田淤泥样品需要作灭菌处理
B.本实验用稀释涂布平板法的目的是计数菌落数
C.平板培养中生长因子均为无机物
D.咔唑浓度最低的摇瓶内为目标微生物
-
某研究小组设计了以下实验探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌)。实验步骤如图所示，培养基成分如下表所示。请分析回答问题：
(1)培养基中加入尿素的目的是筛选________，这种培养基属于________培养基。
(2)“目的菌”生长所需的氮 源和碳源分别来自培养基中的________和________，实验需要振荡培养，原因是。
(3)转为固体培养时，常采用________的方法接种，获得________后继续筛选。
(4)下列材料或用具中：①培养细菌用的培养基与培养皿；②玻璃棒、试管、锥形瓶和吸管；③实验操作者的双手。需要灭菌的是________；需要消毒的是________。(填序号)
(5)在进行分离分解尿素的细菌的实验时，A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50 个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有________(填序号)。
①由于土样不同 ②由于培养基污染 ③由于操作失误 ④没有设置对照
（6）在该实验中，可以通过检测培养基pH的变化来判断尿素是否被分解，所依据的原理是
________。所用方法是在培养基中加入________，若尿素被分解，则培养基变成红色。
-
Ⅰ.苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中，对环境有严重危害。小明同学设计实验从处理废水的活性污泥中分离筛选苯酚降解高效菌株，请回答下列问题：
（1）苯酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HP04、MgS04、苯酚和水，其中可作为碳源的有__________。
（2）将采集到的样品进行选择培养，苯酚用量应随转接次数增加而逐渐____________，以达到增加苯酚降解菌浓度的目的。
（3）下图为平板划线法示意图，在图中____________（填图中序号）区域更易获得单菌落。制备平板培养基时除了需要水、无机盐及各种营养物质外，还必须添加______________________。
（4）采用比色测定法（使用苯酚显色剂）检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应，下表中2〜5号比色管的苯酚浓度应分别为______________________。
| 试管号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
| 苯酚浓度（mg/L） | 0 | | | | | 1 |
Ⅱ.番茄红素是一种类胡萝卜素（脂溶性），不溶于水，化学性质比较稳定，主要存在于番茄、西瓜等植物中。
（1）提取番茄红素常用____________（填“乙醇”或“石油醚”）萃取，理由是____________________。
（2）番茄红素提取实验的流程为：植物→粉碎→①→萃取→②→浓缩→番茄红素，其中，①表示________，②表示_____________。
（3）该实验操作过程中萃取环节采用水浴加热的原因__________________________。
（4）番茄红素粗品的鉴定方法是__________________________。
-
回答下列（一）（二）小题
（一）苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中，对环境有严重危害。小明同学准备依据下图操作步骤，从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。请回答下列问题:
（1）酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水，其中可作为碳源的有_____________。
（2）下图为连续划线法示意图，在图中_________（填图中序号）区域更易获得单菌落。
（3）将采集到的样品接种培养，苯酚用量应随转接次数增加而逐渐_____________。制备平板培养基时除了需要水、营养物质外，还必须添加_____________。以达到富集酚降解菌的目的。若上图平板中菌落过于密集，应进一步_____________，以便于菌落计数与分离。
（4）采用比色测定法（使用苯酚显色剂）检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应，下表中1 ~5号比色管的苯酚浓度应分别为_____________。
| 管号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
| 苯酚浓度（mg/ L） | | | | | | 1 |
如果废水为50mg/L苯酚溶液，降解后约有21%的苯酚残留，则需将残留液稀释_____________（填序号：①5 ②10 ③20）倍后，再进行比色。
（二）回答下列关于遗传信息的传递与表达的问题
为了探究基因在高等动物体内不同发育阶段和不同类型的细胞中表达的持异性，通常以绿色荧光蛋白编码基因（GFP）作为目的基因构建转基因动物．
（1）获得GFP基因的方法一般包括________和___________．
（2）若使用限制酶PstI（识别序列和切割位点如图2A所示）切开GFP，其产生的末端应该为图1中_______________．
（3）已知图2B所示质粒经EcoRI和AatII联合酶切后形成1.0kb和3.2kb （1kb=1000对碱基）两种DNA片段，若将0.8kb的单个基因插在质粒的PstI位点处，所形成的重组质粒用EcoRI和AatII联合酶切后，能形成两种DNA片段，其大小应分别为____kb和____kb．
（4）将上述重组质粒导入小鼠受精卵雄性原核中的常规方法是_______________．
（5）经上述受精卵移植发育而成头部发荧光的转基因小鼠中，全身各种组织或细胞均含有的物质是 ____．
①GFP蛋白 ②GFPmRNA ③GFP基因
A．① B．①② C．③ D．①②③