为研究洗手对防护传染病的作用，科学家对某地400名志愿者洗手前手上微生物进行提取和培养，统...

为研究洗手对防护传染病的作用，科学家对某地400名志愿者洗手前手上微生物进行提取和培养，统计菌落数目。下表列出的是实验室培养的有关结果。请回答下列问题。

（1）微生物培养通常使用__________（填“牛肉膏蛋白胨”或“MS”）培养基，制备该培养基的步骤是计算、__________、熔化、灭菌和倒平板。表格中X可能是__________，它与表格中其他微生物的结构的主要区别是___________。

（2）将金黄色葡萄球菌纯化后，接种到液体培养基培养，然后取1mL该液体培养基稀释10000倍，在3个平板分别接种0．1mL稀释液。适宜条件下培养，3个平板上的菌落数分别为39、38和37，则5mL液体培养基中金黄色葡萄球菌约__________个。

（3）胡萝卜素对保护视力有重要作用，日常生活中人们烹饪胡萝卜时要适当多放点油，原因是__________。从胡萝卜中萃取胡萝卜素的生产过程中，为提高萃取效率，萃取前要将胡萝卜进行__________。

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为研究洗手对防护传染病的作用，科学家对某地400名志愿者洗手前手上微生物进行提取和培养，统计菌落数目。下表列出的是实验室培养的有关结果。请回答下列问题。

（1）微生物培养通常使用____（填“牛肉膏蛋白胨”或“MS”）培养基，制备该培养基的步骤是计算、___ 、熔化、灭菌和倒平板。表格中X可能是____，它与表格中其他微生物的结构的主要区别是____。

（2）将金黄色葡萄球菌纯化后，接种到液体培养基培养，然后取ImL该液体培养基稀释10000倍，在3个平板分别接种0．lmL稀释液。适宜条件下培养，3个平板上的菌落数分别为39、38和37，则5mL液体培养基中金黄色葡萄球菌约____个。

（3）胡萝卜素对保护视力有重要作用，日常生活中人们烹饪胡萝卜时要适当多放点油，原因是____。从胡萝l中萃取胡萝l素的生产过程中，为提高萃取效率，萃取前要将胡萝卜进行____。

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回答下列有关生物技术方面的问题。

（1）在微生物培养中为了防止杂菌污染培养基的检验方法是将　　　　　　 的培养基在适宜条件下培养，观察有无菌落生长。统计微生物样品中活菌数目一般用　 　　 　　 方法；若某样品统计的5组菌落数分别为120、118、25、121、121，那么该样品活菌数的平均值为 　　 　　 。

（2）腐乳是用豆腐发酵制成，有多种微生物参与发酵，其中起主要作用的是　　　　　 。在腐乳的制作过程中，从微生物培养的角度来看，豆腐应该属于　　　　 　　 。

（3）胡萝卜素是重要的药物和食品添加剂，在胡萝卜素的萃取中，所用的有机萃取溶剂应该具有较高的　 　　 　　 ，能充分溶解胡萝卜素，而且　　　 　 。对萃取的胡萝卜素样品和标准样品进行点样层析时，如果出现　　　　　 现象，则说明胡萝卜素提取成功。

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民间传统酒曲中含有大量的微生物，现进行下述实验分离酒曲中的主要微生物。

实验一：将酒曲制成悬液后，分别取不同稀释度的酒曲悬液接种到GPDA培养基上，经培养后根据每个平板的菌落特征，统计不同微生物的菌落数，发现酒曲中主要有两类微生物，即酵母菌和霉菌。

（1）上述操作过程中的接种方法是______________。

（2）根据菌落特征鉴别微生物时，能够观察的菌落特征有_____________。

A．形状　　　　 B．颜色　　　　 C．隆起程度　　　　 D．大小

实验二：在液体中，酵母菌比霉菌生长快；而酸性培养基中酵母菌比细菌生长更适宜。下述方案将酵母菌从酒曲中进行了分离。用小刀切开曲块，挖取米粒大小一块投入酸性蔗糖豆芽汁培养液中，然后置于25℃培养箱中培养两天。

（1）酸性蔗糖豆芽汁培养液的成分包括黄豆芽、蔗糖、乳酸和水，其中碳源物质主要是___

（2）上述实验操作中，需要灭菌的有_______________________。

实验三：取浑浊的培养液1mL转接到另一瓶酸性蔗糖豆芽汁培养液中并培养，如此重复多次。多次转接后，取稀释液用图所示方法接种在蔗糖豆芽汁平板上。

（1）图中所用接种方法是____________________。

（2）与酸性蔗糖豆芽汁培养液成分相比，蔗糖豆芽汁平板培养基中少了乳酸，多了琼脂。这种成分改变的原因是：_________________________________________________________

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为研究使R型菌转化为S型菌的转化因子的化学本质，某科研小组进行了肺炎双球菌的体外转化实验，其基本过程如图所示。下列有关叙述正确的是（　　 ）

A.甲组培养基上长出的菌落种类与乙组不同

B.S型菌提取物经甲、丙两组处理后转化因子活性基本相同

C.将试管中培养液转移到培养基上，只能用稀释涂布平板法

D.若增加RNA酶或酯酶处理提取物的对照实验，会更有说服力

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研究人员用磷酸盐、石油、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选出一种能高效降解石油的细菌A。研究人员还进行了如下实验，以测定培养液中降解石油的细菌A的数量。经统计A、B、C平板的菌落数分别为251、265、276个。回答下列问题：

（1）在培养基中加入石油能为细菌A提供_______；按功能分，该培养基属于______培养基。细菌A不能以CO2作为碳源，原因是_________________________________。

（2）制备细菌A的培养基过程中，对培养皿灭菌的常用方法是____________。

（3）图中①②③所示的接种方法为__________。根据三个平板中的菌落数，可推算细菌培养液中细菌A的浓度为_______个/mL。该方法测定的细菌A的含量和实际值相比，一般_______（填“偏大”或“偏小”）。

（4）研究细菌A的生长规律时，可采用抽样检测法，利用__________，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量。

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科学家采用“影印培养法”研究微生物的抗药性突变是自发产生的还是在环境因素的作用下产生的。具体操作步骤如下：

①首先将大量对链霉素敏感的大肠杆菌涂布在不含链霉素的培养基平板1上，待其长出密集的小菌落后，用影印法接种到不含链霉素的培养基平板2上，随即再影印到含有链霉素的培养基平板3上。经培养后，在平板3上出现了个别抗链霉素的菌落。

②对培养皿2和3进行比较，在平板2上找到与平板3上相对应的抗性菌落，挑取其中一个菌落接种至不含链霉素的培养液4中，经培养后，再涂布在平板5上。

③重复以上各步骤，最后在试管12中获得了较纯的抗性菌落。

根据以上材料回答下列问题：

（1）若要获得抗链霉素的大肠杆菌，实验设计思路是：　　　　　　　　　　 。

（2）大肠杆菌抗链霉素基因存在于　　 上，该结构在基因工程中是最常用的载体。

（3）3号、7号、11号培养皿中加入链霉素的作用是　　　　 　　　　　　　　 ，3号培养皿中的菌落比1号、2号中的菌落少很多，这说明 　 　　　　　　　　 。

该实验结论是：　　　　 ，依据是　　　　　　　　　　 　　 　　 。

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请回答下列有关生物技术实践方面的问题：

（1）培养基配制的步骤为：计算-称量-_______-_______-倒平板；为统计样品中活菌的数目，在37℃培养箱中培养适当时间后形成菌落，一般选择菌落数在_________个的平板进行计数。

（2）泡菜虽然好吃，但其中的亚硝酸盐会危害人体健康。亚硝酸盐在特定条件下会转变成________，这是一种致癌物，测定亚硝酸盐含量的原理是在__________条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色物质。

（3）腐乳制作的流程是：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。配制卤汤时，要使卤汤中酒的含量控制在___________左右。

（4）某同学釆用血细胞计数板计数(规格为16×25，O.lmm3)，统计4个中格中的细菌数，计算出每个小格所含细菌的平均数为2个，则每毫升样品中的细菌数是(稀释倍数为103) _________个。

（5）对于频繁使用的菌种可将试管放入_____________保藏。

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某小组从发酵的豇豆中提取发酵液，进行菌种培养并分离，得到了三个品系的乳酸菌菌株，编号后分别接种在四种不同的培养基上，培养并统计培养基上的菌落数，结果如下表所示。请回答下列问题：

（1）在分离菌株的四种培养基中都有水、无机盐、________等营养物质，其中的无机盐包括适量的NaCl溶液，NaCl溶液的作用是________（答出两点）。

（2）无菌技术是获得纯化菌株的关键，该技术能防止培养物被外来微生物污染，也能________。分离纯化菌株时要进行梯度稀释，目的是________。

（3）据表分析，在Ⅰ～Ⅳ号培养基中，用________号培养基培养菌株的效果最好，理由是________。

（4）临时保存上述三种菌株，应将菌种先接种到试管的________上进行培养，然后置于4℃冰箱中保藏。

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请回答与微生物分离和培养有关的问题：

（1）稀释涂布平板法分离纯化土壤中微生物的正确操作步骤是 　　　　　　　 （填序号）。为减少误差，在设置平板是一般要　　　　　　 或以上数目平板；若统计出在稀释倍数为105的平板上的平均菌落数为30个，所用稀释液的体积为0．2ml，则每克样品中的菌落数为　　　　　　　　 。

①土壤取样

②称取10g土壤加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中制备土壤提取液

③吸取0．1mL溶液进行涂布平板

④依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度

（2）无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。其中对培养基进行灭菌的常用方法分别是　　　　　 ；要求实验操作应在　　　　　　　　 进行，以避免周围环境中微生物的污染。

（3）下图是某同学对萃取的胡萝卜素样品所做的鉴定实验的结果。图中实验组是　　　　　　　 ，实验得出的结论是　　　　　　　　　　　 。

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