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产脂肪酶酵母可用于含油废水处理。为筛选产脂肪酶酵母菌株，科研人员开展了相关研究。请回答下列问题：
（1）常规微生物实验中，下列物品及其灭菌方法错误的是__________（填编号）。
| 编号 | ① | ② | ③ | ④ |
| 物品 | 培养基 | 接种环 | 培养皿 | 涂布器 |
| 灭菌方法 | 高压蒸汽 | 火焰灼烧 | 干热 | 臭氧 |
（2）称取1．0g某土壤样品，转入99mL无菌水中，制备成菌悬液，经__________后，获得细胞密度不同的菌悬液。分别取0．1mL菌悬液涂布在固体培养基上，其中10倍稀释的菌悬液培养后平均长出了46个酵母菌落，则该样本中每克土壤约含酵母菌__________个。
（3）为了进一步提高酵母菌产酶能力，对分离所得的菌株，采用射线辐照进行__________育种。将辐照处理后的酵母菌涂布在以__________为唯一碳源的固体培养基上，培养一段时间后，按照菌落直径大小进行初筛，选择直径__________的菌落，纯化后获得A、B两突变菌株。
（4）在处理含油废水的同时，可获得单细胞蛋白，实现污染物资源化。为评价A、B两菌株的相关性能，进行了培养研究，结果如图。据图分析，应选择菌株__________进行后续相关研究，理由是__________。
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淀粉填充聚乙烯类塑料（淀粉—PE）是一种聚乙烯类塑料替代材料，科研人员开展相关研究，从垃圾堆埋场中筛选到能够更高效降解淀粉—PE的菌株。回答下列问题：
（1）科研人员从垃圾堆埋场的土样中筛选分离该菌株的原因是_________。
（2）在进行该菌株的分离筛选时，需将适宜稀释倍数的土壤溶液接种在以_________为碳源的液体培养基上，进行为期5天的富集培养；进一步分离纯化该微生物应采用的接种方法是_________。
（3）研究发现，该菌株能降解淀粉—PE可能是分泌了_________酶和_________酶。研究人员提纯相应的酶需用到凝胶色谱法，该方法是根据_________分离蛋白质。
（4）若要了解相应的酶的最适温度，请设计实验加以探究_________（针对一种酶写出实验思路即可）。
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发酵面团中含有较为丰富的酵母菌，科研人员从酵母菌中筛选含有高活性淀粉酶的菌株，用于实际生产。回答下列有关酵母菌分离、纯化的相关问题：
（1）在配制的用于分离高活性淀粉酶的酵母菌的培养基中，除含有水、淀粉、氮源和_______等营养成分外，培养基还需要满足微生物生长对_______________的要求。
（2）纯化酵母菌的关键步骤是_____________，最常用的方法是__________________。
（3）筛选具有高产淀粉酶的酵母菌时，如果菌落周围的培养基上出现___________，则可以判定此处酵母菌产淀粉酶的能力强于其他酵母菌。
（4）分离得到的高活性酵母菌菌株需留一部分进行长期保存，可釆用______________的方法进行保存。
（5）活性淀粉酶的合成场所位于___________。科研人员可以从培养酵母菌的培养液中提取活性淀粉酶，此方法的依据是_______________________。
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反硝化细菌能将硝态氮(如N03-)转化为氮气(2N03-+l0e-+12H+→N2+6H20)，广泛用于污水处理。科研人员开展好氧反硝化细菌的筛选和固定化研究，主要过程及结果如下。请回答：
步骤1菌株初筛、纯化和鉴定将1g活性污泥稀释成不同浓度的溶液，各取50μL稀释液均匀涂布到含有溴麝香草酚蓝（BTB)的初筛培养基上（BTB是一种酸碱指示剂，在弱酸性溶液中呈黄色，弱碱性溶液中呈蓝色，中性溶液中呈绿色，初筛培养基呈绿色），在适宜条件下培养获得单菌落，再进行纯化和遗传鉴定。
步骤2制备固定化细菌配制海藻酸钠等溶液并灭菌。在无菌条件下制备固定化小球，用无菌水冲洗并保存。
步骤3不同C/N(碳氮比）对反硝化效率的影响研究配制不同C/N的培养液，每种培养液分两组，分别加入100粒固定化小球和0.8mL的菌液，在30下振荡培养48h后，测定培养液中NO3-的去除率，结果如图。
(1)步骤1中，初筛培养基中的氮源应是____。在细菌培养过程中，需要放置未接种的培养基一起培养，其目的是____。初培结束时，选择的目标菌落周围应呈____色。
(2)步骤2中，海藻酸钠等溶液的灭菌方法是____。制作的凝胶球不宜过大，否则会使小球的____减小，影响小球内外物质交换.进而影响反硝化效率。
(3)步骤3中，若每个固定化小球包埋的细菌数量为19×l06个，则实验接种的菌液中反硝化细菌的密度约为____(保留一位小数)个•mL-1。实验结果表明，固定化会使细菌的反硝化效率略有下降，可能的原因是____。
(4)用反硝化细菌进行污水处理过程中，有时需要向污水中加入少量淀粉。结合实验结果分析，添加淀粉的主要目的是____。
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随着能源和环境问题日益严峻，利用纤维素酶降解秸秆生产燃料乙醇，对缓解全球能源危机有着重大意义。科研人员开展筛选、诱变及选育高产纤维素酶菌株的相关研究，过程如下图。请回答：
（1）从物理状态来看CMC平板属于__________培养基，培养基中应以___________为唯一碳源，常用的灭菌方法是___________。
（2）富集培养后的菌种常采用____________法接种于CMC平板，培养一段时间后，可根据___________初步鉴定并挑取产纤维素酶菌株XZ-33。
（3）诱变选育高产纤维素酶的菌株时，通过向培养基中加入刚果红染液筛选出____________与菌落直径比大的菌落（刚果红能与纤维素形成红色复合物，但不与纤维素水解产物结合）。
（4）如图是筛选获得菌株UV-Col6过程中60Co-γ辐照剂量与致死率和正突变率（符合生产需要的突变菌数占诱变后活菌数的比例）的关系。实验结果表明，用60Co-y射线诱变处理时合适的辐照剂量为__________KGy。从基因突变的特点分析，正突变率低的原因是_________、________________。
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脂肪酶广泛应用于工业生产，某科研小组开展紫外线诱变选育脂肪酶高产菌株的研究。原始菌株1444粗壮假丝酵母经连续两次紫外线诱变，反复筛选，得到的突变株Z6和Z8。在40℃、pH 7.5条件下测定所产脂肪酶活性，分别比原始菌株提高了l26％、150％。
回答下列问题：
(1)由于突变是不定向，可能发生的相关突变有________等类型
(2)科研人员对上述三个菌株所产生的脂肪酶特性进行研究，获如下结果：
实验一：为测定脂肪酶在不同pH值条件下的稳定性，科研人员分别取上述三种菌株所产的酶液各20 mL，分别与等体积的pH5～9的缓冲液混匀，置于4℃冰箱保存24小时后，将pH调至7．5，再加入等量的底物溶液，测定酶的相对活性。结果如图，与原始菌株1 444相比，z6
和z8的酶在不同pH条件下的________。测定酶的活性的实验温度为________℃。
(3)实验二：分别取上述三种菌株的酶液各20mol，置于50℃恒温水浴处理60min，每隔10min取样一次，测定酶活性，同时测定三个对照组的酶活性并进行比较。本实验目的是________，对照组所用的酶液应是________。
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脂肪酶广泛应用于工业生产，某科研小组开展紫外线诱变选育脂肪酶高产菌株的研究。原始菌株1444粗壮假丝酵母经连续两次紫外线诱变，反复筛选，得到的突变株Z6和Z8。在40℃、pH 7.5条件下测定所产脂肪酶活性，分别比原始菌株提高了l26％、150％。
回答下列问题：
(1)由于突变是不定向，可能发生的相关突变有 等类型
(2)科研人员对上述三个菌株所产生的脂肪酶特性进行研究，获如下结果：
实验一：为测定脂肪酶在
不同pH值条件下的稳定性，科研人员分别取上述三种菌株所产的酶液各20 mL，分别与等体积的pH5～9的缓冲液混匀，置于4℃冰箱保存24小时后，将pH调至7．5，再加入等量的底物溶液，测定酶的相对活性。结果如图，与原始菌株1 444相比，z6
和z8的酶在不同pH条件下的 。测定酶的活性的实验温度为 
℃。
(3)实验二：分别取上述三种菌株的酶液各20mol，置于50℃恒温水浴处理60min，每隔10min取样一次，测定酶活性，同时测定三个对照组的酶活性并进行比较。本实验目的是 ，对照组所用的酶液应是 。
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（9分）脂肪酶广泛应用于工业生产，某科研小组开展紫外线诱变选育脂肪酶高产菌株的研究。原始菌株1444粗壮假丝酵母经连续两次紫外线诱变，反复筛选，得到的突变株Z6和Z8。在40℃、pH 7.5条件下测定所产脂肪酶活性，分别比原始菌株提高了l26％、150％。回答下列问题：
(1)由于突变是不定向，可能发生的相关突变有等类型
(2)科研人员对上述三个菌株所产生的脂肪酶特性进行研究，获如下结果：
实验一：为测定脂肪酶在不同pH值条件下的稳定性，科研人员分别取上述三种菌株所产的酶液各20 mL，分别与等体积的pH5～9的缓冲液混匀，置于4℃冰箱保存24小时后，将pH调至7．5，再加入等量的底物溶液，测定酶的相对活性。结果如图，与原始菌株1 444相比，z6和z8的酶在不同pH条件下的________。测定酶的活性的实验温度为________℃。
(3)实验二：分别取上述三种菌株的酶液各20mol，置于50℃恒温水浴处理60min，每隔10min取样一次，测定酶活性，同时测定三个对照组的酶活性并进行比较。本实验目的是________，对照组所用的酶液应是________。
（4）为了解决脂肪酶应用于工业生产时，溶液中的脂肪酶很难回收，不能被再次利用及脂肪酶通常对强酸、强碱非常敏感，容易失活等实际问题，科研人员采用了固定化脂肪酶、固定化脂肪酶高产菌株的技术，你认为采用技术较可行，理由是。
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下图1表示研究人员为筛选纤维素酶高产菌株进行的相关实验流程，其中透明圈是微生物在固体培养基上消耗特定营养物质形成的。请回答下列问题：
（1）本实验中，选择蘑菇培养基质作为纤维素酶高产菌株的来源，这是因为______________________。
（2）筛选用的培养基应以___________作为唯一碳源，并在配制培养基时加入___________作为凝固剂。筛选时应选择D/d较大的菌株，因为这一指标值越大说明______________________。
（3）图2、图3是研究纤维素酶的最适温度和热稳定性的结果。
①研究纤维素酶的热稳定性时，首先将纤维素酶液置于35—65℃的不同温度条件下保温2h，再取上述不同温度处理的纤维素酶液和 ___________，并在___________℃下测定纤维素酶的催化速率，计算酶活性残留率。
②生产中使用该纤维素酶时，最好将温度控制在4O℃左右，依据是______________________。
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下图1表示研究人员为筛选纤维素酶高产菌株进行的相关实验流程，其中透明圈是微生物在固体培养基上消耗特定营养物质形成的。请回答下列问题：
（1）本实验中，选择蘑菇培养基质作为纤维素酶高产菌株的来源，这是因为______________________。
（2）筛选用的培养基应以___________作为唯一碳源，并在配制培养基时加入___________作为凝固剂。筛选时应选择D/d较大的菌株，因为这一指标值越大说明______________________。
（3）图2、图3是研究纤维素酶的最适温度和热稳定性的结果。
①研究纤维素酶的热稳定性时，首先将纤维素酶液置于35—65℃的不同温度条件下保温2h，再取上述不同温度处理的纤维素酶液和 ___________，并在___________℃下测定纤维素酶的催化速率，计算酶活性残留率。
②生产中使用该纤维素酶时，最好将温度控制在4O℃左右，依据是______________________。
不同pH值条件下的稳定性，科研人员分别取上述三种菌株所产的酶液各20 mL，分别与等体积的pH5～9的缓冲液混匀，置于4℃冰箱保存24小时后，将pH调至7．5，再加入等量的底物溶液，测定酶的相对活性。结果如图，与原始菌株1 444相比，z6