自然界中有很多种微生物，尚未能分离纯化培养，科研人员开发了新的微生物分离技术以筛选微生物。...

自然界中有很多种微生物，尚未能分离纯化培养，科研人员开发了新的微生物分离技术以筛选微生物。

（1）配制培养基并分离微生物的步骤是：计算→称量→溶化→调pH→灭菌→倒平板→_______→培养。筛选微生物的一般思路是，根据表型特征利用_______培养基进行筛选。

（2）若某种微生物没有明显表型特征时，就无法通过上述方法筛选，科研人员通过图1所示的流程进行筛选。

①据图分析，科研人员利用目标微生物的基因获取大量膜蛋白，需要构建_______，并导入用________处理的大肠杆菌细胞中。

②利用兔子制备单克隆抗体时，第一次筛选获得多种_______，第二次筛选利用_______原理筛选得到分泌抗膜蛋白抗体的杂交瘤细胞，进行克隆培养。 用目的微生物的膜蛋白而不是胞内蛋白作为抗原的原因_______。

（3）将上述带有荧光的单克隆抗体与待分离微生物群体混合，用流式细胞仪分离不同荧光强度的细胞，结果如图2所示。对结果进行比较，应从区域_______（选填图中数字）的细胞中筛选目标微生物。

高三生物综合题中等难度题查看答案及解析

自然界中有很多种微生物，尚未能分离纯化培养，科研人员开发了新的微生物分离 技术以筛选微生物。

（1）配制培养基并分离微生物的步骤是：计算→称量→溶化→调pH→______________→倒平板→______________→培养。筛选微生物的一般思路是，根据表型特征利用____培养基进行筛选。

（2）若某种微生物没有明显表型特征时，就无法通过上述方法筛选，科研人员通过图所示的流程进行筛选。

①据图分析，科研人员利用目标微生物编码膜蛋白的____________________，构建表达载体，并导入用________________处理的大肠杆菌细胞中，获取大量膜蛋白。

②用获取的膜蛋白作为抗原，利用兔子制备单克隆抗体的具体流程是：_____。

（3）将上述带有荧光的单克隆抗体与待分离微生物群体混合，目的是_____目标微生物。 用流式细胞仪分离不同荧光强度的细胞，结果如图2所示。对结果进行比较，应从区域_____（选填图中数字）的细胞中筛选目标微生物。

高三生物综合题困难题查看答案及解析

发酵面团中含有较为丰富的酵母菌，科研人员从酵母菌中筛选含有高活性淀粉酶的菌株，用于实际生产。回答下列有关酵母菌分离、纯化的相关问题：

（1）在配制的用于分离高活性淀粉酶的酵母菌的培养基中，除含有水、淀粉、氮源和_______等营养成分外，培养基还需要满足微生物生长对_______________的要求。

（2）纯化酵母菌的关键步骤是_____________，最常用的方法是__________________。

（3）筛选具有高产淀粉酶的酵母菌时，如果菌落周围的培养基上出现___________，则可以判定此处酵母菌产淀粉酶的能力强于其他酵母菌。

（4）分离得到的高活性酵母菌菌株需留一部分进行长期保存，可釆用______________的方法进行保存。

（5）活性淀粉酶的合成场所位于___________。科研人员可以从培养酵母菌的培养液中提取活性淀粉酶，此方法的依据是_______________________。

高三生物非选择题困难题查看答案及解析

果胶酶的应用领域非常广泛，它存在于各种微生物中。为获得土壤中果胶酶高产菌株，科研人员进行了下列分离、筛选、鉴定和酶的工业生产等工作。

（1）实验过程中，科研人员配制了下表所示成分的培养基，该表空白处的两种成分是:A______、B_______。用此配方进行选择培养，目的是__________________________ 。

（2）为在培养基表面形成单个菌落，以接种环为工具，则用______法进行接种。灼烧接种环之后，要等冷却才可继续操作，理由是：_____________。

（3）完善“探究果胶酶的最适用量”的实验方案：向分别盛有1.0、1.5、2.0……4.0mL2%果胶酶溶液的一组试管内同时加入5mL苹果泥，__________________________，适温水浴30分钟后，过滤每支试管的反应液，比较滤出的果汁体积或_____________________。

（4）当果胶酶与苹果泥混合在一起时，酶很难回收，不能再次利用，还可能影响了产品的质量。科研人员认为引进_______________技术，可解决生产中遇到的这些问题了。

高三生物非选择题中等难度题查看答案及解析

Ⅰ．为了分离和纯化高效分解石油的细菌，科研人员配制了下表所示成分的培养基:

（1）该表①处的成分是　　　　　　 ，该培养基具有选择作用的原因是　　　　　　　　　　 。

（2）制备的培养基常用　　　　　　 法进行灭菌。

（3）固体培养时，常采用　　　　　　 法接种，获得单菌落后继续筛选纯化。

Ⅱ．今年许多地区的冰糖橙由于阴雨天气的影响，导致果实不如往年甜，容易腐烂果农遭受到了很大的损失，当地政府想尽一切办法帮助橘农尽量减少损失。

（1）有人想用橙皮提取精油，提取橙皮精油一般采用　　　　　　 法。

（2）科研人员发现一棵树上的冰糖橙不易腐烂能长期保存，为子决速大量繁殖该品种，可采用　　　　　　 技术。若用花药进行离体培养，则选择花粉发育至　　　　　　 期的花药培养成功率最高。确定花粉发育时期最常用的染色方法是　　　　　　 法，如果花粉不易着色，则采用　　　　 法。

（3）影响植物组织培养的因素很多，其中最关键的激素有　　　　　　 和　　　　　　 。

高三生物综合题中等难度题查看答案及解析

为获得果胶酶高产菌株，科研人员进行了下列分离、筛选、鉴定工作。

（1）为分离果胶酶产生菌，科研人员配制了下表所示成分的培养基，该表空白处的两种成分是　　　　　　 。制备的培养基常用　　　　　　　　 法进行灭菌。

（2）科研人员将采集的果园土壤放入无菌水中，震荡混匀，制成悬液。为获得较均匀分布的单菌落，还需要将悬液进行　　　　　　　 ,用　　　　　　 法接种于固体培养基上。接种后的培养基　　　　 状态放人培养箱。

（3）选择单菌落数目适宜的培养基，加入一定浓度的刚果红溶液（果胶与刚果红结合后显红色），一段时间后洗去培养基表面的刚果红溶液，观察并比较菌落和　　　　　　 直径的比值，筛选果胶酶高产菌株。

（4）将获得的菌株进行液体培养后，从培养液的　　　　　　　　 （填“上清液”或“沉淀物”）获得粗提的果胶酶。将一定量的粗提果胶酶与适量果胶溶液混合，一定时间后测定吸光值来测定酶活性。进行吸光值测定时，需将　　　　　　　　 与等量果胶溶液混合，作为实验的对照。

高三生物综合题中等难度题查看答案及解析

为获得纤维素酶高产菌株，科研人员进行了下列分离、筛选、鉴定工作。

（1）为分离纤维素分解菌，科研人员配制了下表所示成分的培养基，该表空白处的两种成分是_________。

（2）科研人员将采集的富含纤维素的土壤放入无菌水中，振荡混匀，制成悬液。为获得较均匀分布的单菌落，还需要将悬液进行___________，用_________法接种于固体培养基上。

（3）选择单菌落数目适宜的培养基，加入一定浓度的刚果红溶液，一段时间后洗去培养基表面的刚果红溶液，观察并比较菌落和透明圈直径的比值，该比值_________（“大”、“小”）的菌落纤维素酶产量更高。

（4）将获得的菌株进行液体培养后，从培养液的_______（填“上清液”或“沉淀物”）提取获得纤维素酶。

高三生物综合题中等难度题查看答案及解析

回答下列（一）、（二）两个小题：

（一）为获得果胶酶，科研人员进行了下列果胶酶高产菌株的分离、筛选、鉴定及果胶酶在生产上的应用试验。

（1）为分离果胶酶产生的某种霉菌，科研人员配制了下表所示成分的培养基，该表中应加入的成分a是_____________，该成分在培养基中的作用为___________________。在各种成分溶解配制好后应将pH调到___________，再进行高压蒸汽灭菌。

（2）将获得的菌株进行扩大培养后，再用_________________（工具）从滤液中获得粗提的果胶酶。如要检测获得的果胶酶活性，可先将等量的果胶酶和果胶混合处理适宜时间，再加入等量的______________，最后根据沉淀物的生成量来判断。

（3）在果汁和果酒制作过程中，常用果胶酶处理来提高相应产品的__________________。生产上通过明胶、海藻酸钠（包埋剂）或戊二醛（交联剂）等对果胶酶进行___________处理，以减少酶的使用量，降低生产成本。

（二）拟南芥中有抗冻基因CBF。苜蓿是温带地区重要的牧草，低温是制约其生长的限制因子之一。下图是培育转基因抗冻苜蓿植株的过程示意图，据图回答下列问题：

（1）图中的①先要用某种限制性核酸内切酶断开DNA片段中的___________个磷酸二酯键得到目的基因，再通过_________________技术获得大量的目的基因。这些目的基因必须要与质粒等载体重组后再导入宿主细胞，其主要原因是目的基因经重组后在宿主细胞内能实现___________（A．转录　 B．复制　　 C．翻译　　 D．整合到宿主DNA中）。

（2）图中的②过程的农杆菌经转化成功后再去感染苜蓿组织块，这种转基因方法的主要优点有______________________________、____________________________（至少写出二点）。

（3）图中的③过程若是通过胚胎发生途径实现，须将愈伤组织经______________培养得到大量的单细胞，再转移到含有适当配比的____________________________的培养基中继续分化成胚状体，最后形成相应的植株。

高三生物综合题中等难度题查看答案及解析

为了分离和纯化高效分解石油的细菌，科研人员利用被石油污染过的土壤进行如图A所示的实验。

（1）配制好的培养基通常使用______________法灭菌．步骤③与步骤②中培养基成分相比，最大的区别是______________。

（2）同学甲进行步骤④的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图B所示．该同学的接种方法是______________，出现图B结果可能的操作失误是______________。

（3）同学乙也按照同学甲的接种方法进行了步骤④的操作：将1mL样品稀释100倍，在3个平板上分别接人0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、58和57。据此可得出每升样品中的活菌数为______________个。

（4）步骤⑤需要振荡培养，原因是____________________________。

（5）步骤⑤后取样测定石油含量的目的是______________。

高三生物综合题简单题查看答案及解析

为了分离和纯化高效分解石油的细菌，科研人员利用被石油污染过的土壤进行如图A所示的实验。

（1）配制好的培养基通常使用______________法灭菌．步骤③与步骤②中培养基成分相比，最大的区别是______________。

（2）同学甲进行步骤④的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图B所示．该同学的接种方法是______________，出现图B结果可能的操作失误是______________。

（3）同学乙也按照同学甲的接种方法进行了步骤④的操作：将1mL样品稀释100倍，在3个平板上分别接人0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、58和57。据此可得出每升样品中的活菌数为______________个。

（4）步骤⑤需要振荡培养，原因是____________________________。

（5）步骤⑤后取样测定石油含量的目的是______________。

高三生物综合题简单题查看答案及解析