禾草灵（FE）是一种现代农业常用除草剂，大量使用后造成的环境污染日益严重，为获得能高效降解...

禾草灵（FE）是一种现代农业常用除草剂，大量使用后造成的环境污染日益严重，为获得能高效降解FE的菌株，科学家通过实验获得W1菌株并利用紫外分光光度计检测其对FE的降解效果（FE特征吸收峰在239nm处），以下说法不正确的是（　　）

A.应从大量使用除草剂的土壤中获取菌株

B.将土壤稀释液灭菌后接种到选择性培养基上

C.应使用以FE作为唯一碳源的培养基进行筛选

D.据吸收光谱可知，W1菌株对FE有明显降解能力

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禾草灵（FE）是一种现代农业常用除草剂，大量使用后造成的环境污染日益严重，为获得能高效降解FE的菌株，科学家通过实验获得W1菌株并利用紫外分光光度计检测其对FE的降解效果（FE特征吸收峰在239nm处），以下说法不正确的是（　　）

A.应从大量使用除草剂的土壤中获取菌株

B.将土壤稀释液灭菌后接种到选择性培养基上

C.应使用以FE作为唯一碳源的培养基进行筛选

D.据吸收光谱可知，W1菌株对FE有明显降解能力

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禾草灵（FE）是一种现代农业常用除草剂，大量使用后造成的环境污染日益严重，为获得能高效降解FE的菌株，科学家通过实验获得W1菌株并利用紫外分光光度计检测其对FE的降解效果（FE特征吸收峰在239nm处），以下说法不正确的是（　　）

A.应从大量使用除草剂的土壤中获取菌株

B.将土壤稀释液灭菌后接种到选择性培养基上

C.应使用以FE作为唯一碳源的培养基进行筛选

D.据吸收光谱可知，W1菌株对FE有明显降解能力

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禾草灵（FE）是一种现代农业常用除草剂，大量使用后造成的环境污染日益严重，为获得能高效降解FE的菌株，科学家通过实验获得W1菌株并利用紫外分光光度计检测其对FE的降解效果（FE特征吸收峰在239nm处），以下说法不正确的是（　　）

A.应从大量使用除草剂的土壤中获取菌株

B.将土壤稀释液灭菌后接种到选择性培养基上

C.应使用以FE作为唯一碳源的培养基进行筛选

D.据吸收光谱可知，W1菌株对FE有明显降解能力

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生产中为防治病虫害而大量使用农药，使农产品以及农业生态环境中农药残留严重超标。针对该现状，我国科学家经过多年研究，首创了农药残留微生物降解技术。通过筛选高效农药残留降解菌株，来清除土壤、水体、农产品中的有机污染物。其中有机磷降解菌降解甲基对硫磷（一种含氮有机农药）的效果达100%。

（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以____________为唯一氮源的固体培养基上。

（2）获得纯净培养物的关键是________________________，接种前通常应将培养皿进行_______　　　　　　 灭菌，培养基进行__________　　　　　　　　　　　 灭菌。

（3）纯化菌种时，整个操作过程都应在___________　　　　　　　　 附近进行。

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若长期使用某种除草剂（有机物），会对土壤造成严重污染。如图是从土壤中分离出能降解该除草剂菌株的实验过程。请回答下列问题：

选择土壤→土壤样品选择培养划线纯化获得菌种

（1）为了获取能降解该除草剂的菌株，选择的土壤样品应来自____________。

（2）图中A过程所用的培养基中不能添加其他有机物，理由是____________。若图中B过程在一个平板的5个区域内划线，则划线工具需灼烧灭菌____________次。

（3）图中A、B、C过程所用培养基中应含有四类营养成分，即_______________________。

（4）若要推算该土壤样品中的细菌含量，应采用____________法进行接种。先将1 mL 土壤溶液稀释100倍，然后随机选取6个灭菌处理的平板，其中4个平板上分别接入 0.1 mL稀释液，2个平板未接入稀释液，经适当培养后，6个平板上的菌落数分别为52、49、51、48、0和0。

①由未接入稀释液的平板所长菌落情况，可得出的结论是________________________。

②经计算可得出每毫升土壤溶液中的活菌数为____________个，该结果往往偏小，原因是____________。

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油轮泄漏会造成严重的环境污染，吸油菌可将原油分解为无机物，从而消除原油泄漏造成的海水污染。某科研小组欲筛选分离能高效降解海水中原油的菌株进行以下实验操作，回答下列问题。

（1）采集样品与选择培养：从___中采集样品；然后将样品适当稀释后接种于液体培养基中富集，从培养基的成分来看，应以 ___为碳源，从培养基的理化性质来看，应使用___水来配制该培养基。进行选择培养的目的是____。

（2）鉴别培养与筛选：将选择培养后的样品涂布培养于起选择或鉴别作用的培养基上，培养得到单菌落，有些单菌落周围出现较大的分解圈，有些单菌落虽然长势良好，但周围不出现分解圈。后者菌落出现的原因是___________

（3）微生物长势的测定：微生物数目的测定可以使用显微镜直接计数法和稀释涂布平板法，两种测定方法各有特点。与显微镜直接计数法相比，下列选项中属于稀释涂布平板法的特点是 ___（填序号）。

①操作简便快捷　　 ②操作复杂耗时长　 ③测量活菌数准确度高　 ④测量总菌数准确度较高

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有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。科研人员通过人工筛选获得高效的苯磺隆降解菌，将其扩大培养后投入污染土壤中，可将土壤中的苯磺隆降解。请回答下列问题：

（1）欲选择性获得能降解苯磺隆的降解菌，可在被有机农药苯磺隆污染的土壤中取样，并在含有_______、________ 及水和无机盐等的基本培养基上添加_______进行选择培养。

（2）若要测定培养液中选定菌种的菌体数，可在显微镜下用血细胞计数板直接计数，也可选用________方法统计活菌数目。

（3）将筛选的苯磺隆降解菌固定在一定的空间内定殖于土壤中能提高降解效率，固定苯横隆降解菌的一般方法为包埋法，不使用化学结合法和物理吸附法的原因是__________。

（4）研究人员从苯磺隆降解菌中分离出苯磺隆降解酶，分离该降解酶的常用方法有凝胶色谱法和__________。凝胶色谱法分离蛋白质的原理是根据____________进行分离。

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有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。科研人员通过人工筛选获得高效的苯磺隆降解菌，将其扩大培养后投入污染土壤中，可将土壤中的苯磺隆降解。请回答下列问题：

（1）欲选择性获得能降解苯磺隆的降解菌，可在被有机农药苯磺隆污染的土壤中取样，并在含有碳源、氮源及水和无机盐等营养物质的培养基上添加______________进行选择培养。在降解菌数量足够多时，适当提高样品中苯磺隆的浓度能使苯磺隆降解效率增加，其原因是_____________（从酶与底物的相互关系角度分析）。扩大培养时，苯磺隆降解菌所用的培养基从物理性质划分属于_____________培养基。

（2）将筛选的苯磺隆降解菌固定在一定的空间内能提高降解效率，固定苯磺隆降解菌一般用____________，原因是_________________________。

（3）研究人员从苯磺隆降解菌中分离出苯磺隆降解酶，分离该降解酶的常用方法有凝胶色谱法和______________。凝胶色谱法分离蛋白质的原理是根据____________进行分离。

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（一)有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题：

(1)无菌操作是微生物实验中重要的一项技术，下列常用的无菌操作中错误的是（_____）

A.用酒精擦拭双手

B.用氯气消毒水源

C.实验操作应在酒精灯火焰附近进行

D.玻璃器皿（吸管、培养皿）可用酒精擦拭

(2)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以_______为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于__________培养基。

(3)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即__________和_______。

(4)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力____________。

(二)为了更好地分解石油，通过基因工程产生超级细菌。下图a表示基因工程中经常选用的载体——pBR322质粒,Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因。目的基因如果插入某抗性基因中，将使该基因失活，而不再具有相应的抗性。为了检査载体是否导入原本没有Ampr和Tetr的大肠杆菌(受体细胞），将大肠杆菌涂布在含氨苄青霉素的培养基上培养,得到如图b的结果(黑点表示菌落）。再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到含四环素的培养基上培养，得到如图c的结果（空圈表示与b对照无菌落的位置）。据此分析并回答：

(1)将重组的DNA分子导人受体细胞时，用________处理大肠杆菌，增大____________。

(2)pBR322质粒的化学本质是_______，其控制着__________等性状。与图c空圏相对应的图b中的菌落表现型是___________，由此说明目的基因插入了_____________中。

(3)基因工程成功的标志是_______________________。

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