土壤中存在多种自生固氮菌，它们对于增加土壤中氮素有重要意义。如果要分离土壤中的自生固氮菌，...

土壤中存在多种自生固氮菌，它们对于增加土壤中氮素有重要意义。如果要分离土壤中的自生固氮菌，下列培养基设计正确的是（　　 ）

A.无需加碳源 B.无需加氮源

C.无需加琼脂 D.无需加无机盐

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（13分）在土壤中存在着多种自生固氮菌，它们对于增加土壤中的氮素有重要意义。某生物兴趣小组的同学想从土壤中分离出自生固氮菌，配制的培养基成份为：葡萄

糖10g、磷酸二氢钾0.2g、硫酸镁0.2g、氯化钠0.2g、硫酸钙5g、蒸馏水1000mL，并

在培养基中加入1%的琼脂，制成固体培养基。分离实验的过程如下图，其中器皿中①是

土壤样品，②是土壤悬浮液，③、④和⑤都是培养基。请回答：

1．从培养基的功能来分，本实验所配的培养基属于________培养基，碳源为________。

2．实验原理是________。

3．④中培养出来的菌落是________微生物，其氮源来自于________。

4．②→③接种的方法是________法；④→⑤接种的方法是________法。

5．④→⑤接种操作的目的是________。接种到⑤的过程中为防止污染应

注意的操作事项是________。

6．如实验使用的是通用培养基用于分离真菌，则培养基中应加入___________；若用于鉴别大肠杆菌，可在通用培养基中加入______________。

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在土壤中存在多种自生固氮菌，它们对增加土壤中的氮素有重要意义。某实验小组试图从土壤中分离自生固氮菌，并制成菌肥施入土壤中增加土壤肥力。实验流程大致如下图所示。（11分）

56．图4中的培养基成分如下表：

此培养基的特点是______________，原因是____________________________

________________________________________________________________。

57．从功能上看，此培养基属于__________培养基。从形态上看，此培养基属于固体培养基，有利于__________________________________。

58．因为琼脂中常含有氮，因此使用前需要用自来水流水冲洗几天，再用________________浸泡，洗涤几次，以除去其中的氮。

59．实验步骤3在超净台上，将接种环在____________上灭菌冷却后，才能蘸取少许稀释液用点接法接种在培养基表面，也可采用_______法接种。接种后必须将培养皿_______________培养，以免冷凝水滴落。

60． 实验的培养时间不宜过长，否则____________________________________

____________________________。

61.小组成员用放射线处理分离得到的固氮菌获得两个突变株A和B，然后对A和B进行实验，结果如下表。

(1)突变株A不能在一般培养基上生长的直接原因是_____________________。

(2)将突变株A和B混合在一起接种于一般培养基中却能正常生长，那么最可

能原因是

________。

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（二）回答下列有关微生物的问题。

自生固氮菌是在土壤中能够独立进行固氮的细菌，对于增加土壤中的氮素有重要意义。某研究小组按照下列实验方案（如图）从土壤中分离自生固氮菌株。

1. 下列属于自生固氮菌生物学特征的是__________。

A. 具有质膜和核糖体　　 B. 厌氧型细菌

C. 所需能量由自身的线粒体提供　　 D. 单细胞真核生物

2. 按功能分，Ⅰ号培养基称为__________培养基；该培养基中应有的营养成分（仅列出了碳氮源）为___________。

A. 葡萄糖、硫酸铵　　 B. 葡萄糖　　 C. 牛肉膏、蛋白胨　　 D. 牛肉膏

3. 从配制培养基到制备平板的过程中，不需要的是__________。

A. 酒精灯　　 B. 接种环　　 C. 灭菌锅　　 D. 玻璃棒

4. 接种后的平板放在28℃恒温箱培养3-4天，通过观察__________的特征可统计自生固氮菌的种类，但培养时间不宜过长的原因是__________________。

草甘膦是目前农业上广泛使用的一种除草剂，其田间推荐使用的中间浓度为C，但未考虑它对固氮微生物的影响，研究小组采用“抑菌圈法”对此开展研究（见如表），以期为农田合理使用草甘膦提供理论依据。

5. 补全表中的实验方案：

如表草甘膦的抑菌圈直径比较

_____________

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以下关于“分离土壤中的自生固氮菌”的实验操作正确的是（    ）

① 对取样的土壤样品要在超净台上进行稀释

② 分离自生固氮菌的培养基中要加入氮源

③ 对培养基要加热到62℃，保持30min

④ 本实验的接种方法可以采用点接法

⑤接种以后对菌种的培养时间不能太长的原因是菌落会分泌含氮化合物,引起杂菌生长。

A．①②③     B．①③⑤     C．①④⑤     D．②③④

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以下关于“分离土壤中的自生固氮菌”的实验操作正确的是（　　 ）

① 对取样的土壤样品要在超净台上进行稀释

② 分离自生固氮菌的培养基中要加入氮源

③ 对培养基要加热到62℃，保持30min

④ 本实验的接种方法可以采用点接法

⑤接种以后对菌种的培养时间不能太长的原因是菌落会分泌含氮化合物,引起杂菌生长。

A．①②③ B．①③⑤　 C．①④⑤　　 D．②③④

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某同学利用选择培养基成功分离出了土壤中的自生固氮菌，得到了如图所示的实验结果，以下说法正确的是

A. 该实验使用了划线法接种

B. 该实验使用了液体培养基

C. 该实验使用了无氮培养基

D. 该实验使用了无碳培养基

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在分离土壤自生固氮菌的实验过程中，不需要无菌操作的是（　　）

A. 划线接种 B. 制备培养基平板 C. 稀释土壤溶液 D. 配制培养基

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在分离和纯化土壤中自生固氮菌的实验中，不合理的操作是

A. 取土表3-5cm以下土层的土壤

B. 用无菌水稀释土壤样品

C. 使用牛肉膏蛋白胨培养基

D. 用接种环进行划线接种

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圆褐固氮菌是一种自生固氮菌，能利用土壤中的有机腐殖质生长。下表中的培养基适合用来分离圆褐固氮菌的是

A. A　　 B. B　　 C. C　　 D. D

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