以下关于“分离土壤中的自生固氮菌”的实验操作正确的是（ ）① 对取样的土壤样品要在超净台上...

以下关于“分离土壤中的自生固氮菌”的实验操作正确的是（    ）

① 对取样的土壤样品要在超净台上进行稀释

② 分离自生固氮菌的培养基中要加入氮源

③ 对培养基要加热到62℃，保持30min

④ 本实验的接种方法可以采用点接法

⑤接种以后对菌种的培养时间不能太长的原因是菌落会分泌含氮化合物,引起杂菌生长。

A．①②③     B．①③⑤     C．①④⑤     D．②③④

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以下关于“分离土壤中的自生固氮菌”的实验操作正确的是（　　 ）

① 对取样的土壤样品要在超净台上进行稀释

② 分离自生固氮菌的培养基中要加入氮源

③ 对培养基要加热到62℃，保持30min

④ 本实验的接种方法可以采用点接法

⑤接种以后对菌种的培养时间不能太长的原因是菌落会分泌含氮化合物,引起杂菌生长。

A．①②③ B．①③⑤　 C．①④⑤　　 D．②③④

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在分离和纯化土壤中自生固氮菌的实验中，不合理的操作是

A. 取土表3-5cm以下土层的土壤

B. 用无菌水稀释土壤样品

C. 使用牛肉膏蛋白胨培养基

D. 用接种环进行划线接种

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在分离土壤自生固氮菌的实验过程中，不需要无菌操作的是（　　）

A. 划线接种 B. 制备培养基平板 C. 稀释土壤溶液 D. 配制培养基

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某同学利用选择培养基成功分离出了土壤中的自生固氮菌，得到了如图所示的实验结果，以下说法正确的是

A. 该实验使用了划线法接种

B. 该实验使用了液体培养基

C. 该实验使用了无氮培养基

D. 该实验使用了无碳培养基

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某兴趣小组用从不同环境中采集的土壤等进行了“分解纤维素的微生物的分离”实验，实验过程为：土壤取样→选择培养→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落，实验结果见下表1：

表1　不同土壤微生物对纤维素的分解

（1）上述实验过程中“选择培养”的目的是________________。

（2）与30℃相比，37℃培养时霉菌类纤维素分解菌生长迅速，菌丝会________其他菌落，对后续菌种的分离造成困扰，因此采用30 ℃培养为佳。

（3）兴趣小组在鉴别菌种时尝试了两种方案：A． 先培养微生物，再加入刚果红染色；B． 直接在加入刚果红的鉴别培养基上培养微生物。结果发现：A方案在漂洗多余刚果红的过程中，易出现菌落浮起被带走的现象，从而造成________，故选方案B。由于刚果红在高温下容易被分解，应在培养基灭菌________（填“前”或“后”）加入。

（4）有小组成员根据表1结果中的________，认为菌料中的目的菌分解纤维素的能力最强，其他成员对此观点提出异议。兴趣小组继续对三组样品进行透明圈直径、菌落直径和酶活力的测定，实验结果如下表2：

表2　不同H/C值纤维素分解菌酶活性的比较

你认为将________作为判断纤维素分解菌分解能力大小的依据更合理，其大小与酶活力呈________相关。

（5）兴趣小组欲对培养液中的纤维素分解菌进行计数，具体做法是：先在培养基上加入若干质量较轻的小球，然后在平板上滴加一定体积的培养液，盖上培养皿盖后左右摇晃。试分析这样做的目的是________。

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圆褐固氮菌是自生固氮细菌（能自主将大气中的氮气转化为氨），代谢类型是异养需氧型。某同学采用稀释涂布平板法从土壤中分离获得圆褐固氮菌。回答下列问题。

（1）分离不同的微生物要采取不同的稀释度，原因是_______________。初次实验时，可以将稀释的范围放宽一点，以保证能从中选择出菌落数在__________间的平板进行计数。

（2）培养圆褐固氮菌时不能隔绝空气的理由是____________________（答出两点）。

（3）用该方法统计的菌落数量往往比活菌的实际数量少，原因是____________________。

（4）保藏菌种时，可采用__________方法进行长期保存。

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自生固氮细菌能独立完成固氮作用，在农业生产中具有广泛的用途。研究人员从土壤中筛选高效的自生固氮细菌菌株，并对其固氮能力进行了研究。请回答下列问题：

（1）要从土壤样品中分离出自生固氮细菌，在获得土壤浸出液后，将浸出液加入到_________(选择、鉴定）培养基中培养，目的是___________，然后再吸取适量的培养液，采用稀释涂布平板法涂布于_________(选择、鉴定）培养基上继续培养。

（2）为了进一步筛选高效固氮细菌，研究人员将上述获得的等量的四种固氮细菌分别接种到等量的液体培养基中进行振荡培养相同时间后，对固氮菌进行计数并定量测定培养液中的含氮量，结果如表：

由上述结果可知，_________菌的固氮效率最高，原因是___________________。

（3）固氮基因重组到水稻、小麦等经济作物细胞中，让植物本身直接固氮，这样可以免施或少施氮肥。这样就要先提取出固氮细菌的DNA，某研究小组甲同学设计了一个提取DNA的方案：破碎细菌细胞，将初步过滤的细菌细胞匀浆加入到2mol/LNaCl溶液中，过滤，则DNA留在___________(填“沉淀”或“滤液”）中。经过一系列操作后，析出的DNA可用_____________试剂进行鉴定。

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某种细菌可以分解石油残存物(含有C、H、O元素)，现要分离、培养该细菌，操作步骤为：土壤取样→选择培养→梯度稀释→涂布样品到培养基→选择菌落。请据此回答：

（1）细菌与真菌最主要的区别在于：细菌___________________________________。

（2）石油残存物可以为该种细菌提供的营养物质是________________，分离该细菌的培养基从功能上叫做_____________培养基。

（3）取样时用到的一切工具均需要__________________。梯度稀释、涂布样品到培养基则必须在_____________________(填场所)进行。

（4）若需要对细菌计数，常用的简便方法是_______________，该方法测得的数目往往比实际值________________(填“大”或“小”)。

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(11分)土壤有“微生物的天然培养基”之称，下图表示对土壤中某种微生物进行分离和计数而进行的对样品的稀释和稀释液的取样培养流程示意图。请据图回答有关问题。

(1)图示统计样品活菌数目的方法叫做________法，主要包括________操作和________操作。

(2)当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的________，一般选择菌落数在________的平板进行计数。

(3)图中各试管间的“箭头”表示的操作过程是________________________。

这一操作过程中每一步都要在火焰旁边进行。

(4)图中选择了104、105、106倍的稀释液进行平板培养，最可能是测定土壤中________的数量，这个平板需要在________温度下培养________d。

(5)如果要想分离分解尿素的细菌，平板中培养基成分的特点应该是_________________________________________________________________；

如果怀疑培养基被污染导致统计结果有误，则需要做对照实验，方法是__________________________________________________________________

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