为了获得纯度高的大肠杆菌需要对大肠杆菌进行培养和分离。培养大肠杆菌一般用牛肉膏蛋白胨琼脂培...

为了获得纯度高的大肠杆菌需要对大肠杆菌进行培养和分离。培养大肠杆菌一般用牛肉膏蛋白胨琼脂培养基。

（1）大肠杆菌的遗传物质中的化学元素有____________，这些元素可以从培养基中获取。

（2）配制牛肉青蛋白胨时，称量时动作要迅速，称后要及时盖上瓶盖，其原因是____________。

（3）将配制好的培养基转移到锥形瓶中，之后的操作是_________________________，最后把锥形瓶放入高压灭菌锅中。

（4）微生物纯化培养可以采用平板划线法，操作时每次划线之前都要灼烧接种环，其原因是________________________。某同学挑取了平板上的菌落，在3块同批次的平板上划线，结果其中一块平板的各划线区域均未见菌生长，最可能的原因是____________________________________。

（5）在培养基上大肠杆菌可以分裂繁殖，其分裂时需要____________催化DNA复制的反应。大肠杆菌的细菌分裂_______（填“是”或“不是”）有丝分裂。

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为了调查某河流的水质状况，某生物兴趣小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题：

（1）实验室常用牛肉膏蛋白胨琼脂培养基培养细菌，牛肉膏能提供的主要营养有 ___。一般用____琼脂培养基培养酵母菌。

（2）如图，该小组采用的是　 _____________分离水样中的细菌。操作时，接种环通过____灭菌，在第二次及以后的操作时，总是从上一次的末端开始，这样做的目的是 ____。

（3）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。根据培养皿上菌落的平均数可以计算河水中该细菌的密度，但计算的数据要比实际活菌的数目少，原因是____。除了上述的活菌计数法外， ________________也是测定微生物数量的常用方法。

（4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是： ___________________________________________________________________ 。

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我国的卫生标准是每1000mL饮用水中大肠杆菌不得超过3个，在实验室里通常利用牛肉膏蛋白胨培养基（成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、H2O）对大肠杆菌进行纯化培养。回答下列问题：

（1）实验室中微生物纯化培养的最常见的方法是平板划线法和__________。平板划线法不适合用于微生物计数方法的原因是__________。

（2）大肠杆菌所需的碳源是来自培养基中的__________，NaCl的功能是__________。

（3）在牛肉膏蛋白胨固体培养基加入一定量的伊红美蓝，大肠杆菌在该培养基上的菌落特征是__________，这种培养基按其功能划分属于___________（填“选择”或“鉴别”）培养基。为了确定自来水中大肠杆菌是否超标，可以利用该培养基培养水样中的微生物，获取水样中大肠杆菌菌落的操作方法是__________。

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炭疽杆菌能引起人畜患炭疽病。对炭疽病疑似患者，可通过图1所示鉴定炭疽杆菌的实验进行确诊。表1是培养炭疽杆菌的血琼脂培养基成分，其中实验组中的噬菌体能特异性地侵染炭疽杆菌。

（1）表分析“血琼脂培养基”属于_______________（多选）

①通用培养基     ②选择培养基     ③固体培养基    ④液体培养基

（2）由表可知，微生物生长所需的营养物质有__________________________________。

为从炭疽病疑似患者体内分离出炭疽杆菌，将采集到的患者皮肤脓胞渗出物稀释后取0.1ml滴于培养基表面，用无菌涂布器（玻璃刮铲）涂匀，这种接种方法称为 ____________。图2所示的四种菌落分布图中，不可能由该方法得到的是_________________________。

（3）制备图1中的液体培养基时需采取 _________方法灭菌，目的是_____________。

装桶时不要装的太挤，以免______________________________。

（4）据图1分析，接种可疑菌后，经35℃培养24小时，液体培养基变浑浊，原因是________________。对照组试管中应加入________________，与实验组同时培养6小时后，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组_____（填“高”或“低”），则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除。此实验依据的原理是_____________________________。

（5）对排除的疑似患者及易感人群，可采取的最有效的预防措施是___________________。

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我国饮用水卫生标准规定每毫升水样中细菌总数不得大于100个，大肠杆菌不得检出。某兴趣小组为测定本地自来水中的细菌总数和是否有大肠杆菌，进行了如下实验：

①分别配制营养琼脂培养基（成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCI、琼脂、H20）和伊红美蓝培养基（成分：蛋白胨、NaCl、琼脂、乳糖、伊红、美蓝、H2O），灭菌。

②取水样。　　

③先测定甲项指标：用灭菌吸管吸取ImL水样，涂布到营养琼脂培养基中；置于37 ℃培养24h后进行菌落计数。另设一个不加水样的空白对照组。

④用滤膜法测定乙项指标，装置和操作如下图。

回答下列问题：

(1)步骤②取水样前应先将自来水龙头用火焰灼烧3min，目的是_____。

(2)步骤③测定的指标甲是__。水样涂布前无需稀释，理由是____。

(3)步骤④测定乙项指标，主要观察滤膜上是否会出现 ___色菌落。配制伊红美蓝培养基时，先用蛋白胨、NaCl、琼脂配制基础培养基，在l00kPa、121℃条件下灭菌后，冷却至60。C左右，再加入经70kPa、115℃条件下灭菌的乳糖、伊红、美蓝水溶液，后者灭菌条件不同的原因是____。

(4)兴趣小组认为合格的自来水中细菌数量很少，担心检测不到，因而将取得的水样先加入到无琼脂的营养培养液中培养一段时间后，再稀释涂布平板计数。这样操作获得的数据___ （填“可信”或“不可信”）．理由是____。

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为了研发高效抑菌洗手液，科研入员检测了A、B、C、D四种抑菌物质对常见细菌的抑制效果。

（1）前期准备：配置 ___（填“牛肉膏蛋白胨”或“麦芽汁琼脂”）固体培养基，同时将若干相同大小的圆形滤纸片放入培养皿，采用____方法灭菌。

（2）实验步骤：从下列选项中选择合适的操作，并排序。____。

a将用抑菌物质或无菌水浸泡过的滤纸片放入平板中央

b用平板划线法接种细菌

c用稀释涂布平板法接种细菌

d将培养皿倒置放入恒温培养箱，37℃培养24小时

e测量抑菌圈的直径

（3）实验结果与

注：阴性对照为无菌水

①本实验设置阴性对照的目的是____。

②根据实验结果判断，____物质的抑菌效果最好，理由是____。为进一步确定该物质在洗手液中的最佳添加浓度，请设计实验进行探究（写出实验思路即可）。____。

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在分解纤维素的微生物的分离实验中，为了判断选择培养基是否起到了对分解纤维素细菌的选择作用，需要设置的对照是(　　)。

A．未接种的只有纤维素为唯一碳源的培养基

B．未接种的牛肉膏蛋白胨培养基

C．接种了的牛肉膏蛋白胨培养基

D．接种了的只有纤维素为唯一碳源的培养基

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某工业废水中含有大量的大肠杆菌，某研究小组对该废水中的大肠杆菌数量进行了调查，并进行了相关系列实验。请回答下列问题：

（1）在调查废水中大肠杆菌数量之前需要制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，在该培养基中所含有的营养成分包括___________。该培养基中含有琼脂，琼脂是一种多糖，添加琼脂的目的是_____________。

（2）取该废水1mL，并经过系列梯度稀释为lO1、lO2、lO3。然后分别取上述3种浓度的稀释液各0.1mL，采用_______法接种到平板上，每个稀释度均重复3次。

（3）接种以后需要将平板倒置培养，其目的是_________________。

（4）若在稀释度为102的三个平板上观察到菌落数分别为45个、47个、49个，则每升废水中的大肠杆菌活菌数为__________个，该计数结果一般比实际值_________。

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根据“利用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌的纯化培养”实验。请回答。

（1）利用牛肉膏蛋白胨固体培养基培养大肠杆菌时，牛肉膏可以提供_______、______、磷酸盐和维生素等营养物质。配制培养基时，各种成分在熔化后分装前必须进行______。

（2）获得纯净的培养物的关键是______。倒平板的时候将锥形瓶的瓶口通过火焰目的是______。

（3）如图采用的接种方法是______，在2、3、4、5区域内划线接种，总是从上一次划线的末端开始划线是因为线条末端细菌的数目比线条起始处要______，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终得到________，划线结束后灼烧接种环的目的是______。接种后培养基平板应______于37°C恒温箱中培养。

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某研究小组研究了果胶酶添加对蓝莓出汁率的影响实验。回答下列问题。

（1）为了筛选出能分泌较多果胶酶的微生物，一般需用__________的培养基进行选择培养。首先通过单菌落分离，获得需要的菌株；然后将其__________，并进行特性鉴定，筛选得到高产菌株。该过程所用培养基对于酸碱度的要求是_________。

（2）市售蓝莓汁（含葡萄糖）在制作过程中要进行灭菌，为防止__________，要用500g/cm2压力（90℃以上），灭菌30分钟。该小组在获得蓝莓汁后，欲进一步制作蓝莓酒。若发酵瓶内三天后还看不到气泡冒出，则必须__________，使发酵作用尽快发生。

（3）在适宜的温度和pH下，研究小组利用一定量的蓝莓汁和适宜浓度的果胶酶溶液探究果胶酶的最适用量，实验结果如右图所示。写出该实验失误可能的原因及改进方法___________。

（4）工业生产中，有时会采用不溶于水的介质对果胶酶进行__________处理，使酶在一定空间范围内发挥作用。与传统使用果胶酶相比，该处理的优点是__________（答出两点即可）。

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