硝化细菌能吸收利用养殖池中存在的亚硝酸盐。图1表示研究人员从养殖池沉积物中分离硝化细菌的流...

硝化细菌能吸收利用养殖池中存在的亚硝酸盐。图1表示研究人员从养殖池沉积物中分离硝化细菌的流程；图2是选择培养时使用的培养基配方。请回答下列问题：

（1）步骤二的目的是___________，在培养过程对培养瓶进行振荡的目的是___________，步骤三常采用的接种方法是___________。

（2）制备培养液时，常用的灭菌方法是___________。制备用于步骤三的培养基时，图2配方中提供氮源的物质是___________，配方中还应添加适量___________才能配制出固体培养基。

（3）临时保藏菌种时，可将菌种接种到___________上，在合适的温度下培养，待菌落长成后，将试管放入温度为___________的冰箱中保藏。

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土壤中含有能将难溶性磷酸盐转变成植物可以吸收利用的可溶性磷的优良解磷菌株Q。下图1表示制备固体培养基过程中的某操作，图2是科研人员从土壤中分离出菌株Q的部分过程示意图。

请回答下列问题：

（1）图1所示操作称为_________，待平板冷凝后_________，以防止________。

（2）图2所示接种方法是________。在3个平板上分别接入0.1mL稀释液，经适当培养后，3个平板上菌落数分别是38、42、40，则1g土壤中的活菌数约为________个。

（3）图3是某同学利用不同于图2方法分离菌株Q的示意图。下列对其操作及结果的叙述错误的有________。

a．操作前用无水乙醇对双手进行消毒处理　　 b．划线时将沾有菌种的接种环插入培养基

c．只有在⑤区域中才能得到所需菌落　　　　　 d．整个过程需要对接种环进行6次灼烧

（4）固体培养基中难溶性磷酸盐在菌株Q的作用下溶解，会在菌落周围形成透明圈（图4），透明圈直径（D）与菌落直径（d）的比值（D/d）代表微生物溶解难溶磷酸盐的能力大小。下表是初步筛选出的三种优良解磷菌株。

根据实验结果分析溶解难溶性磷酸盐能力最强的菌株是________。该菌种分离纯化后，常用________法进行长期保存。

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土壤中含有能将难溶性磷酸盐转变成植物可以吸收利用的可溶性磷的优良解磷菌株Q。下图1表示制备固体培养基过程中的某操作，图2是科研人员从土壤中分离出菌株Q的部分过程示意图。

请回答下列问题：

（1）图1所示操作称为__________________，待平板冷凝后__________，以防止__________________。

（2）图2所示接种方法是_______________________。在3个平板上分别接入0．1 mL稀释液，经适当培养后，3个平板上菌落数分别是38、42、40，则1 g土壤中的活菌数约为__________________个。

（3）图是某同学利用不同于图2方法分离菌株Q的示意图。下列对其操作及结果的叙述错误的有_______。

a．操作前用无水乙醇对双手进行消毒处理

b．划线时沾有菌种的接种环不能插入培养基中

c．只有在⑤区域中才能得到所需菌落　　

d．整个过程需要对接种环进行6次灼烧

（4）固体培养基中难溶性磷酸盐在菌株Q的作用下溶解，会在菌落周围形成透明圈（如下图所示），透明圈直径（D）与菌落直径（d）的比值（D/d）代表微生物溶解难溶磷酸盐的能力大小。下表是初步筛选出的三种优良解磷菌株。

根据实验结果分析，溶解难溶性磷酸盐能力最强的菌株是______________。该菌种分离纯化后，常用______________________法进行长期保存。

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土壤中含有能将难溶性磷酸盐转变成植物可以吸收利用的可溶性磷的优良解磷菌株Q。下图1表示制备固体培养基过程中的某操作，图2是科研人员从土壤中分离出菌株Q的部分过程示意图。

（1）图1所示操作后，待平板冷凝，然后___________，以防止___________。

（2）图2所示接种方法是___________。在3个平板上分别接入0．1mL稀释液，经适当培养后，3个平板上菌落数分别是38、42、40，则1g土壤中的活菌数约为___________个。

（3）固体培养基中难溶性磷酸盐在菌株Q的作用下溶解，会在菌落周围形成透明圈（如图），透明圈直径（D）与菌落直径（d）的比值（D/d）代表微生物溶解难溶性磷酸盐的能力大小。下表是初步筛选出的三种优良解磷菌株。

根据实验结果分析，溶解难溶性磷酸盐能力最强的菌株是___________。

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土壤中的纤维素分解菌能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究与应用，使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等。从土壤中分离纤维素分解菌的实验流程如下：

土壤取样→选择培养基→梯度稀释→鉴别培养基

（1）纤维素酶是复合酶，由C1酶、Cx酶和__________组成。

（2）实验室中微生物筛选常应用选择培养基的方法，原理是__________。为分离得到纤维素分解菌，使用的培养基应以__________作为主要碳源。

（3）梯度稀释前进行选择培养的目的是__________，这一步一般选用__________（填“固体”或“液体”）培养基。

（4）梯度稀释后用__________（仪器）将菌种接种在培养基表面。

（5）用__________染色法鉴定纤维素分解菌时，培养基上的菌落周围会形成透明圈，其大小反映____________________。

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[生物——选修1:生物技术实践]

牛的瘤胃中含有多种厌氧细菌，下列过程是从瘤胃中分离产脲酶细菌的流程图，回答有关问题。

（1）图中②选择培养的目的是_____________。为保证该细菌能正常生长繁殖,必须放在________环境条件下培养。

（2）④鉴别培养基还需添加___________作指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后,其菌落周围的指示剂将变成__________色,简述其原因_____________________________。

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某种物质S（一种含有C、H、N的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和S，乙的组分为无机盐、水、S和Y。

回答下列问题：

（1）实验时，盛有水或培养基的摇瓶通常采用_______________的方法进行灭菌。乙培养基中的Y物质是_______________。甲、乙培养基均属于______________培养基。

（2）实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×107 个/mL，若要在每个平板上涂布100μL稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将摇瓶M中的菌液稀释________________倍。

（3）在步骤⑤的筛选过程中，发现当培养基中的S超过某一浓度时，某菌株对S的降解量反而下降，其原因可能是________________（答出1点即可）。

（4）若要测定淤泥中能降解S的细菌细胞数，请写出主要实验步骤________________。

（5）上述实验中，甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同，但都能为细菌的生长提供4类营养物质，即________________。

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在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述选择培养基依次能从混杂的微生物群体中分离出（　　 ）

A. 固氮细菌、金黄色葡萄球菌、放线菌

B. 固氮细菌、大肠杆菌、放线菌

C. 乳酸菌、金黄色葡萄球菌、放线菌

D. 固氮细菌、霉菌、放线菌

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尿素［CO(NH2)2］是一种重要的农业氮肥。但尿素并不能直接被农作物吸收，只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后，才能被植物利用。某生物兵趣小组欲分离土壤中分解尿素的细菌，

设计了如下实验流程：

土壤取样→选择培养→梯度稀释→涂布培养→计数与鉴定

请回答相关问题：

（1）涂布培养前需要梯度稀释，其目的是____，如果得到了2个或2个以上菌落数目在____之间的平板，则说明稀释操作比较成功。

（2）选择培养过程能够“浓缩”尿素分解菌是因为其培养基____

（3）取1g土壤，按下图稀释后，在三个平板上分别接入0.1ml稀释液后，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别是52, 50和48。据此可计算出每克土样中的活菌数为___，该数值与活菌的实际数目相比____（偏高／偏低），原因是：____

（4）在培养基上滴加酚红指示剂可以鉴定其上细菌能否分解尿素，其原理是____

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某纺织厂为使牛仔布呈现“穿旧”效果，准备用纤维素分解菌处理代替传统的浮石擦洗。工作人员拟从土壤样品中分离该类微生物，并进行扩大培养，相关工艺流程如图。请回答下列问题：

（1）进行土样中细菌数量的测定，常用稀释涂布平板法（选用104～106倍的稀释液）统计样品中活菌的数量。但第一次用稀释涂布平板法测定土样中纤维素分解菌的数量时，所进行实验的一般基本思路是______。

（2）在系列稀释操作前，“选择培养”的一般目的是______。

（3）“涂布接种”时，转动培养皿的目的是______。

（4）在鉴别培养基上，菌落周围的透明圈大小可能与纤维素酶的______有关。在分离出所需的菌株之后，还应通过______的实验来进一步确定分离出的菌株是纤维素分解菌，而后开展扩大培养。

（5）纤维素酶的测定方法一般是______。

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