某研究所以马尾藻岩藻聚糖(SF)为研究对象,体外培养小鼠肉瘤细胞S180,做抗肿瘤活性实验的研究。下列为部分实验步骤与结果。
实验步骤:
①将S-180肿瘤细胞以RPMI-1640为培养液(含小牛血清、青霉素和链霉素),在5%CO2培养箱中培养。
②将上述培养过的S-180肿瘤细胞经酶消化,按1×103~1×105个·mL-1接种到96孔培养板,适宜条件下培养24h、48h、72h、96h后,以MTT法(又称比色法,一种检测细胞存活和生长的方法)于波长490 nm处测定OD值,结果如下(图1)。
③在适宜的培养条件和恰当的S-180肿瘤细胞接种浓度下,研究不同浓度(0mg·mL-1、0.1mg·mL-1、0.5mg·mL-1、1mg·mL-1、2mg·mL-1、4mg·mL-1、8mg·mL-1、10mg·mL-1、15mg·mL-1、20mg·mL-1、25mg·mL-1、30 mg·mL-1)的SF对S-180肿瘤细胞增殖的抑制情况,96 h后以MTT法于波长490 nm 处测定OD值,结果如下(图2)。实验结果:
请回答下列问题:
(1)步骤①中以RPMI-1640为培养液培养S-180肿瘤细胞的原理是________。添加一定量小牛血清的目的是____________________________。
(2)步骤②中“消化”所使用的酶是________,为减少OD值测定的误差,应注意________________。
(3)已知在一定细胞数目范围内,MTT法测得的OD值与活细胞数量呈正相关,由图1可知步骤③中恰当的S-180肿瘤细胞接种浓度为____________。
(4)图2实验结果表明,在一定范围内SF浓度与细胞增殖的抑制作用呈________(选填正相关 或 负相关),当SF浓度达到________时细胞增殖的抑制作用达到极限,继续增加SF浓度对细胞增殖的抑制作用变化不明显。
(5)除SF浓度外,还有其他因素会影响SF抑制S-180肿瘤细胞的增殖,请你就此提出相关研究课题(只要求写出课题名称):____________________________。
高三生物综合题中等难度题
某研究所以马尾藻岩藻聚糖(SF)为研究对象,体外培养小鼠肉瘤细胞S180,做抗肿瘤活性实验的研究。下列为部分实验步骤与结果。
实验步骤:
①将S180肿瘤细胞以RPMI1640为培养液,在5%CO2培养箱中培养。
②将上述培养过的S180肿瘤细胞经酶消化,按1×103~1×105个·mL-1接种到96孔培养板,适宜条件下培养24h、48h、72h、96h后,以MTT法(又称比色法,一种检测细胞存活和生长的方法)于波长490nm处测定OD值,结果如图1。
③在适宜的培养条件和恰当的S180肿瘤细胞接种浓度下,研究不同浓度(0mg·mL-1、0.1mg·mL-1、0.5mg·mL-1、1mg·mL-1、2mg·mL-1、4mg·mL-1、8mg·mL-1、10mg·mL-1、15mg·mL-1、20mg·mL-1、25mg·mL-1、30mg·mL-1)的SF对S180肿瘤细胞增殖的抑制情况,96h后以MTT法于波长490nm处测定OD值,结果如图2。
请回答下列问题:
(1)步骤①中以RPMI1640为培养液培养S180肿瘤细胞的原理是__________。培养液中除细胞所需的营养物质之外,通常还添加一定量的__________,以防培养过程中的污染。
(2)步骤②中“消化”所使用的酶是__________,为减少OD值测定的误差,应注意__________。
(3)已知在一定细胞数目范围内,MTT法测得的OD值与活细胞数量呈正相关,由图1可知步骤③中恰当的S180肿瘤细胞接种浓度为__________个·mL-1。
(4)图2实验结果表明,在一定范围内SF浓度与细胞增殖的抑制作用呈__________(选填“正相关”或“负相关),当SF浓度达到__________mg·mL-1时细胞增殖的抑制作用达到极限,继续增加SF浓度对细胞增殖的抑制作用变化不明显。
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某研究所以马尾藻岩藻聚糖(SF)为研究对象,体外培养小鼠肉瘤细胞S180,做抗肿瘤活性实验的研究。下列为部分实验步骤与结果。
实验步骤:
①将S-180肿瘤细胞以RPMI-1640为培养液(含小牛血清、青霉素和链霉素),在5%CO2培养箱中培养。
②将上述培养过的S-180肿瘤细胞经酶消化,按1×103~1×105个·mL-1接种到96孔培养板,适宜条件下培养24h、48h、72h、96h后,以MTT法(又称比色法,一种检测细胞存活和生长的方法)于波长490 nm处测定OD值,结果如下(图1)。
③在适宜的培养条件和恰当的S-180肿瘤细胞接种浓度下,研究不同浓度(0mg·mL-1、0.1mg·mL-1、0.5mg·mL-1、1mg·mL-1、2mg·mL-1、4mg·mL-1、8mg·mL-1、10mg·mL-1、15mg·mL-1、20mg·mL-1、25mg·mL-1、30 mg·mL-1)的SF对S-180肿瘤细胞增殖的抑制情况,96 h后以MTT法于波长490 nm 处测定OD值,结果如下(图2)。实验结果:
请回答下列问题:
(1)步骤①中以RPMI-1640为培养液培养S-180肿瘤细胞的原理是________。添加一定量小牛血清的目的是____________________________。
(2)步骤②中“消化”所使用的酶是________,为减少OD值测定的误差,应注意________________。
(3)已知在一定细胞数目范围内,MTT法测得的OD值与活细胞数量呈正相关,由图1可知步骤③中恰当的S-180肿瘤细胞接种浓度为____________。
(4)图2实验结果表明,在一定范围内SF浓度与细胞增殖的抑制作用呈________(选填正相关 或 负相关),当SF浓度达到________时细胞增殖的抑制作用达到极限,继续增加SF浓度对细胞增殖的抑制作用变化不明显。
(5)除SF浓度外,还有其他因素会影响SF抑制S-180肿瘤细胞的增殖,请你就此提出相关研究课题(只要求写出课题名称):____________________________。
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骨肉瘤是最常见的恶性成骨性肿瘤之一。科研人员研究曲古抑菌A(TSA)对人骨肉瘤细胞凋亡的影响及作用机制,为临床治疗寻找新方向。实验过程如下:
步骤1 用含青霉素和链霉素的高糖培养基,在37℃、5% CO2培养箱中培养人骨肉瘤细胞一段时间。
步骤2 取适宜浓度的处于生长旺盛期的人类骨肉瘤细胞,用加入不同浓度的TSA(0~200
ng·mL-1)的培养基继续培养24h。
步骤3 对各组细胞进行抽样检测,检测方法是先用台盼蓝试剂(一种细胞活性染料)染色再用血细胞计数板计数,统计细胞存活率(未染色细胞数/细胞总数×100%),结果如图1。
步骤4 分别提取TSA浓度为0 ng·mL-1、25 ng·mL-1、50 ng·mL-1处理的3组细胞,测量细胞中与凋亡相关的基因(Bax、Bcl-2)和β-肌动蛋白基因(不同的组织细胞中表达相对恒定)表达的蛋白质量并计算比值,结果如图2。
分析回答:
(1)与正常成骨细胞相比,骨肉瘤细胞容易在体内分散和转移,其主要原因是 。高糖培养基中加入青霉素和链霉素的目的是 ,细胞培养箱中保持5% CO2的作用是 。
(2)步骤2中,设置0 ng·mL-1 TSA实验的主要目的是 。
(3)用台盼蓝试剂检测细胞活性的主要原理是 。
(4)图1所示结果表明 。
(5)根据图2判断,骨肉瘤细胞中 基因过度表达会加速细胞凋亡。
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骨肉瘤是最常见的恶性成骨性肿瘤之一。科研人员研究曲古抑菌A(TSA)对人骨肉瘤细胞凋亡的影响及作用机制,为临床治疗寻找新方向。实验过程如下:
步骤1 用含青霉素和链霉素的高糖培养基,在37℃、5% CO2培养箱中培养人骨肉瘤细胞一段时间。
步骤2 取适宜浓度的处于生长旺盛期的人类骨肉瘤细胞,用加入不同浓度的TSA(0~ 200
ng·mL-1)的培养基继续培养24h。
步骤3 对各组细胞进行抽样检测,检测方法是先用台盼蓝试剂(一种细胞活性染料)染色再用血细胞计数板计数,统计细胞存活率(未染色细胞数/细胞总数×100%),结果如图1。
步骤4 分别提取TSA浓度为0 ng·mL-1、25 ng·mL-1、50 ng·mL-1处理的3组细胞,测量细胞中与凋亡相关的基因(Bax、Bcl-2)和β-肌动蛋白基因(不同的组织细胞中表达相对恒定)表达的蛋白质量并计算比值,结果如图2。
分析回答:
(1)与正常成骨细胞相比,骨肉瘤细胞容易在体内分散和转移,其主要原因是 。高糖培养基中加入青霉素和链霉素的目的是 ,细胞培养箱中保持5% CO2的作用是 。
(2)步骤2中,设置0 ng·mL-1 TSA实验的主要目的是 。
(3)用台盼蓝试剂检测细胞活性的主要原理是 。
(4)图1所示结果表明 。
(5)根据图2判断,骨肉瘤细胞中 基因过度表达会加速细胞凋亡。
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研究人员利用与癌细胞在某些方面具有相似性的诱导多能干细胞(iPSC)进行了抗肿瘤的免疫学研究。进行的系列实验如下:免疫组小鼠:每周注射1次含失去增殖活性的iPSC悬液,连续4周;空白组小鼠:每周注射1次不含失去增殖活性的iPSC的缓冲液,连续4周。请回答下列小题。
1.取免疫组和空白组小鼠的血清分别与iPSC、DB7(一种癌细胞)和MEF(一种正常体细胞)混合,检测三种细胞与血清中抗体的结合率结果见下表。下列相关叙述错误的是( )
细胞与抗体的结合率(%) | 细胞 | iPSC | DB7 | MEF |
血清 | ||||
免疫组 | 77 | 82 | 8 | |
空白组 | 10 | 8 | 9 |
A.iPSC可刺激小鼠产生特异性抗体
B.DB7的抗原可以与抗iPSC的抗体特异性结合
C.MEF的抗原不可以与抗iPSC的抗体特异性结合
D.一种抗体可以与不同结构类型的抗原特异性结合
2.给免疫组和空白组小鼠皮下注射DB7,一周后皮下形成肿瘤。随后空白组小鼠肿瘤体积逐渐增大,免疫组小鼠肿瘤体积逐渐缩小。下图为实验组的实验操作过程及结果示意图。下列对该反应过程及结果的叙述,不正确的是( )
A.②步骤注射的是失去增殖活性的iPSC
B.③步骤注射的是B细胞
C.④步骤观察到的实验结果是B
D.iPSC能刺激机体产生特异性抗肿瘤的细胞免疫
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研究人员利用与癌细胞在某些方面具有相似性的诱导多能干细胞(iPSC)进行了抗肿瘤的免疫学研究。进行的系列实验如下:免疫组小鼠:每周注射1次含失去增殖活性的iPSC悬液,连续4周;空白组小鼠:每周注射1次不含失去增殖活性的iPSC的缓冲液,连续4周。请回答下列小题。
1.取免疫组和空白组小鼠的血清分别与iPSC、DB7(一种癌细胞)和MEF(一种正常体细胞)混合,检测三种细胞与血清中抗体的结合率结果见下表。下列相关叙述错误的是( )
细胞与抗体的结合率(%) | 细胞 | iPSC | DB7 | MEF |
血清 | ||||
免疫组 | 77 | 82 | 8 | |
空白组 | 10 | 8 | 9 |
A.iPSC可刺激小鼠产生特异性抗体
B.DB7的抗原可以与抗iPSC的抗体特异性结合
C.MEF的抗原不可以与抗iPSC的抗体特异性结合
D.一种抗体可以与不同结构类型的抗原特异性结合
2.给免疫组和空白组小鼠皮下注射DB7,一周后皮下形成肿瘤。随后空白组小鼠肿瘤体积逐渐增大,免疫组小鼠肿瘤体积逐渐缩小。下图为实验组的实验操作过程及结果示意图。下列对该反应过程及结果的叙述,不正确的是( )
A.②步骤注射的是失去增殖活性的iPSC
B.③步骤注射的是B细胞
C.④步骤观察到的实验结果是B
D.iPSC能刺激机体产生特异性抗肿瘤的细胞免疫
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某同学从资料获知,二氯二乙胺能抑制癌细胞的增殖,并设计了如下实验加以验证,请根据实验方案回答问题。
实验材料:二氯二乙胺溶液,蒸馏水,生理盐水,细胞培养液(内有小鼠肝部肿瘤细胞),试管等。实验的主要步骤如下表所示:
试管编号 步骤 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
I | 加入等量的细胞培养液(含有全部营养物质与小鼠肝部肿瘤细胞) | ||||
II | 计算试管内的细胞数目,记录数据 | ||||
III | 加入a 溶液 | 加入b | |||
IV | 振荡后,在冰箱中培养 | ||||
V | 一段时间后,计算试管内的细胞数目,记录数据 |
(1)完成步骤Ⅲ,a:________;b:________。
(2)纠正步骤Ⅳ中的错误:________。
(3)根据纠正后的正确方法进行实验,结果如下:
试管编号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
二氯二乙胺浓度(mg/mL) | 0.1 | 0.2 | 0.3 | 0.4 | 0 |
步骤II记录的细胞数目(个/mL) | 350 | 363 | 342 | 335 | 336 |
步骤V记录的细胞数目(个/mL) | 320 | 275 | 186 | 96 | 560 |
结论:第一,________;
第二,。
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某生物兴趣小组的同学测定药物对体外培养细胞的毒性,准备对小鼠的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行培养。下列说法正确的是
A.利用胃蛋白酶处理两种肝组织块后可得到肝细胞悬液
B.细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行,CO2的作用是刺激细胞的呼吸
C.甲、乙细胞在持续的原代培养过程中,乙会出现停止增殖的现象
D.该试验中用到的培养液也能用来培养乙肝病毒
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科研人员为研究 JS-K(一种新合成的抗肿瘤药物)对胃癌细胞的抑制效应及机制进行了相关实验。
(1)体外癌细胞培养:胃癌细胞培养于含动物血清(目的是更好地模拟体内的 ________成分) 的完全培养液中,并补充_________以防污染。经_________消化制成细胞悬液。将装有细胞悬液的培养瓶置于 CO2 恒温培养箱中培养。
(2)配制不同浓度的 JS-K 溶液,添加于各组完全培养液中。每隔一段时间检测胃癌细胞存活率。
(3)研究结果表明:JS-K 抑制胃癌细胞存活,且抑制效果随着剂量的增加和处理时间的延长而 ________,如图 1。在图中画出 24h 时各浓度下胃癌细胞的存活率曲线_________。本实验的可变因素是____。
(4)实验过程中还用到一种 Z 试剂,相关结果如图 2。根据结果推测,Z 试剂可能是细胞凋亡的____________ (填“促进”或“抑制”)剂。
(5)研究者进一步研究了 JS-K 诱导胃癌细胞凋亡的机制,发现 JS-K 是通过促进活性氧的产生诱导胃癌细胞凋亡的。研究者用 JS-K 和 NAC 同时处理胃癌细胞,发现其与____________ 的胃癌细胞存活率相似,但比用__________________处理的胃癌细胞存活率显著高。猜测 NAC 是一种 _________________的清除剂。
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探究二氯二乙胺能否抑制癌细胞增殖的实验:
材料用具:肝部长有肿瘤的小鼠,不同浓度的二氯二乙胺溶液,蒸馏水,生理盐水,含有全部营养物质的细胞培养液,显微镜,血球计数板,试管,吸管等。
实验步骤:
a.取洁净的培养皿一个,加入适量培养液,从小鼠肝部切取肿瘤组织,剪碎,并用胰蛋白酶处理,使其分散开来,置于培养皿中培养;
b.取洁净的试管5支,加入等量培养液,编号1、2、3、4、5,并在1~4号试管中加入等量的不同浓度的二氯二乙胺溶液,5号试管中加入________;
c.从培养皿中吸取等量的培养液置于1~5号试管中,振荡后,在适宜条件下培养—段时间;
d.从静置的5支试管中吸取适量的培养液置于血球计数板上,在显微镜下计数,记录数据。
实验分析:
①实验的实验组是________号试管。上述实验步骤d中测量到的数据是否准确,请判断并作出解释:____________________________________________ 。
②另有同学按照正确的方法进行实验,得到如下结果:
根据以上实验结果,你能得出的结论有:二氯二乙胺能抑制癌细胞增殖,且在一定范围内,随二氯二乙胺浓度的增大,抑制作用_________________。
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