天山雪莲具有抗炎镇痛、清除自由基等作用，其中具有药理活性的主要物质是黄酮类物质。多年来盲目...

天山雪莲具有抗炎镇痛、清除自由基等作用，其中具有药理活性的主要物质是黄酮类物质。多年来盲目采挖导致天山雪莲频临灭绝，研究人员运用植物组织培养技术进行雪莲有效成分的提取，下图为相关过程。请回答下列有关问题：

（1）进行组织培养时，将雪莲幼苗的叶或茎切成0．5cm长的小段作为_______，用酒精溶液和次氯酸钠溶液进行________，然后立即用无菌水清洗并用_______吸取材料表面的水分。

（2）图中①过程表示植物组织培养的_________过程。在植物组织培养的过程中，通常需要用植物生长调节剂对植物组织的__________进行诱导，使用时应严格控制用量，才能准确地发挥“激素杠杆”的作用。

（3）利用转基因技术也可以实现雪莲有效成分的工厂化生产。若选择大肠杆菌作为工程菌，需用_______处理以使大肠杆菌细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的状态，这种细胞称为_______细胞。通常选择大肠杆菌作为基因工程受体细胞的原因是_______。

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黄酮类物质具有抗心血管疾病、抗肿瘤等作用，是近年来研究活跃的天然活性成分之一。某研究小组以水杉的根尖进行组织培养，探究不同光照、蔗糖浓度对其生长过程中黄酮类物质积累的影响，如下：

⑴水杉根尖通过组织培养获得水杉植株，说明该种细胞具有_________；根尖细胞产生ATP的场所是____________。

⑵为探究不同蔗糖浓度对水杉组织培养的影响，在白光下光照16h/d，光照强度1500lx，25℃条件下，10d后检测黄酮含量，结果如下表:

但60 g/L蔗糖浓度下，水杉组培苗长势不如50 g/L的培养基好，原因可能是____________；

⑶研究小组在蔗糖浓度为30g/L的培养基、光照16h/d、光照强度1500lx、25℃条件下依次用白光、红光、蓝光和暗培养（遮光）进行水杉组织培养，10d后检测黄酮含量，结果如下表:

结合上述结果，____________条件下进行培养最有利于提取黄酮；若光照培养过程中CO2浓度骤然降低，水杉组培苗叶肉细胞中NADPH的含量__________（增多/基本不变/减少）；

⑷研究小组欲进一步探究红光条件下光照时间对水杉黄酮合成的影响，可在上述实验的基础上，在蔗糖浓度为30g/L的培养基、光照强度1500lx、25℃条件下，分别设置光照时间为8h/d、10h/d、__________________________、20h/d组别进行实验。

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藏红花素是藏红花中的主要活性成分，具有抗肿瘤、抗氧化、抗高血压、抗动脉粥样硬化和抗抑郁等多种药理作用。2019 年 7 月，中科院天津生物所研究员利用大肠杆菌合成藏红花素方面取得进展。 下图为藏红花素合成过程图，请回答有关问题：

（1）在藏红花植株内获得靶 DNA 分子后用 PCR 技术 扩增目标片段， Taq 酶催化 DNA 子链的延伸方向为5'—3'，应选择与模板结合的引物是（填字母）______。若向反应体系加入 a 个靶 DNA 分子， 经 4 次循环获得目标 DNA 片段所占的比例______。

（2）为保证目的基因在大肠杆菌中能够表达，构建 好的重组质粒应含有以下______部分（填标号）。

①目的基因　　 ②引物　　 ③标记基因 ④启动子　　 ⑤终止子　　 ⑥终止密码子　　 ⑦起始密码子　　 ⑧复制原点

（3）上述过程中，大肠杆菌成为生产藏红花素的细胞工厂。基因工程中用原核生物作为受体细胞的优点是__________ 。

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在一定剂量范围内苜蓿中的黄酮对动物乳腺上皮细胞增殖具有一定促进作用。为研究不同浓度苜蓿黄酮对乳腺上皮细胞的增殖及其对乳酸脱氢酶（LDH）活性的影响，科研人员用MTT法以细胞悬液OD值为观测指标测定细胞增殖能力，进行了相关实验研究。请完善实验思路，并根据实验结果进行分析。

实验材料与仪器：

用二甲基亚砜（DMSO）配置的浓度为25、50、75和100µ/mL苜蓿黄酮溶液、用动物细胞培养液配制的一定密度的动物乳腺上皮细胞悬液、光电比色计、MTT法细胞增殖测定仪器等

（要求与说明：MTT法测定细胞增殖具体操作不作要求；乳酸脱氢酶（LDH）活性检测不作要求；在一定细胞数范围内，OD值与细胞数成正比；培养过程中培养液变化忽略不计；实验条件适宜）

（1）完善实验思路

①取若干培养瓶，各加入998mL的细胞悬液，分为5组，编号甲~戊，每组5个重复。

②甲组：加入2mL二甲基亚矾；_______。

③________。

④实验第5天，_______。

⑤________。

（2）结果分析与结论

苜蓿黄酮对某动物乳腺上皮细胞增殖及其乳酸脱氢酶（LDH）活性的影响

注：表中*表示与对照组比较有统计学上的显著差异，不带*数据表示与对照组无显著差异；（单位：略）

根据上表可得实验结论：

结论一：作用时间较短时（3天），苜蓿黄酮对细胞增殖无明显作用；

结论二：_______；

结论三：_______。

（3）实验分析

细胞呼吸中，乳酸脱氢酶（LDH）催化的反应_______（填“产生”或“不产生”）ATP，这一催化反应发生在_______（填“需氧”或“厌氧”）呼吸中。本实验中还可用细胞培养上清液中LDH的浓度代表细胞的受损程度的原因是_______。为减少微生物对实验结果带来的干扰，实验中的动物细胞培养基中添加的胎牛血清可采用_______（方法）去除杂菌。

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总黄酮是一类广泛存在于植物界中的黄酮类化合物。黄酮类化合物具有抗癌、镇痛、提高免疫力等药用保健功能。下面是从芝麻叶中提取总黄酮的主要过程。回答下列问题：

（1）酶解是提取总黄酮的第一步。从芝麻叶细胞壁的组成来看，酶解使用的酶是__________，酶解达到的作用是____________________。

（2）实验发现，当酶解温度低于45℃时酶解速率下降，这说明酶解所使用的酶活性最适温度__________。

（3）经酶解后的芝麻叶还没有释放总黄酮，下一步是将芝麻叶置于80℃蒸馏水中（这一步叫浸提），蒸馏水和80℃分别起到的作用是_________；除水温外，影响浸提效果的因素还有________（答出一点即可）。

（4）经浸提得到的液体不呈黄色，主要原因是__________________。总黄酮的提取不使用水蒸气蒸馏法，可能的原因是______________________________。

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桉叶油的化学性质与玫瑰精油相似，其中含有的黄酮、熊果醇、精油等多种成分具有抑菌作用。某生物兴趣小组提取了桉叶油，并对桉叶油的抑菌活性进行了研究，回答下列问题：

(1)提取桉叶油时应选择____（填“新鲜”或“烘干”）的桉树叶，原因是______。

(2)可采用水蒸气蒸馏法提取桉叶油，原因是桉叶油具有____的特点；此法不适用于胡萝卜素的提取，原因是____。从蒸馏出的油水混合物中分离的油层还会含有一定的水分，需要添加____除水。

(3)该小组采用抑菌圈法检测桉叶油的抑菌活性。抑菌圈法是利用待测药物在琼脂平板中扩散使其周围的细菌生长受到抑制而形成透明圈（即抑菌圈），再根据抑菌圈大小判定待测药物抑菌效价的一种方法。下表是该小组检测对照组和实验组对供试菌的抑菌作用（抑菌圈的大小/mm）得到的实验结果：

对照组应____（填“接种”或“不接种”）细菌。由表中数据可知，桉叶油对_____的抑菌效果最强。

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有关细胞癌变的叙述，正确的是                            （    ）

A．基因突变导致的各种细胞癌变均可遗传

B．石棉和黄曲霉素是不同类型的致癌因子

C．人体的免疫系统对癌变细胞具有清除作用

D．癌变细胞内酶活性降低导致细胞代谢减缓

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有关细胞癌变的叙述，正确的是　　　　　　　　　　　　 （　　 ）

A. 基因突变导致的各种细胞癌变均可遗传

B. 石棉和黄曲霉素是不同类型的致癌因子

C. 人体的免疫系统对癌变细胞具有清除作用

D. 癌变细胞内酶活性降低导致细胞代谢减缓

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（2011•山东）下列有关细胞癌变的叙述，正确的是（　 ）

A．基因突变导致的各种细胞癌变均可遗传

B．石棉和黄曲霉素是不同类型的致癌因子

C．人体的免疫系统对癌变细胞具有清除作用

D．癌变细胞内酶活性降低导致细胞代谢减缓

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有关细胞癌变的叙述，正确的是              （    ）

A．基因突变导致的各种细胞癌变均可遗传

B．石棉和黄曲霉素是不同类型的致癌因子

C．人体的免疫系统对癌变细胞具有清除作用

D．癌变细胞内酶活性降低导致细胞代谢减缓

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