PCR扩增时需考虑高质量的基因组DNA模板以及反应体系中各种成分的优化组合，相关叙述错误的...

PCR扩增时需考虑高质量的基因组DNA模板以及反应体系中各种成分的优化组合，相关叙述错误的是（　　 ）

A.反应体系中模板DNA的量和纯度影响PCR的成功与否

B.设计引物时需考虑引物的长度、碱基序列和GC含量

C.Taq酶的浓度过低会引起非特异性扩增产物量的增多

D.目标DNA的获得取决于引物在模板DNA上的结合位置

高三生物单选题简单题查看答案及解析

研究人员利用小鼠的单倍体ES细胞（只有一个染色体组），成功培育出转基因小鼠。其主要技术流程如图所示，请分析回答下列问题：

（1）利用PCR技术可以扩增目的基因，PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP（包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP）、引物外，还应含有____；引物应选用下图中____（填图中字母）。

（2）在基因工程操作步骤中，过程①②称为 ___。已知氨苄青霉素不能有效杀死小鼠细胞，而一定浓度的G418能有效杀死不具有Neo′的小鼠细胞。结合上图推测， 过程①选用的两种限制酶是 ___（填图中的编号），③处的培养液应添加____（填“氨苄青霉素”或“G418”）。

（3）图中桑椹胚需通过____技术移入代孕小鼠子宫内继续发育，进行该操作前需对受体小鼠进行____处理。

高三生物综合题中等难度题查看答案及解析

利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。以下叙述错误的是

A. 由原来的母链为模板合成的两个新DNA分子中，只含有引物A或引物B

B. 推测第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为1/8

C. 变性过程中被切断的是DNA分子内碱基对之间的氢键

D. PCR与细胞内DNA复制相比所需酶的最适温度较高

高三生物选择题中等难度题查看答案及解析

科学家成功制备出“嫁接”了人胰岛素基因的工程菌，它能大量合成人胰岛素，用来治疗糖尿病，使胰岛素的生产成本大大降低。回答相关问题：

（1）利用PCR技术扩增DNA时，需要在反应体系中添加的有机物质有_________、热稳定性DNA聚合酶、引物和4种脱氧核糖核苷三磷酸。已知DNA的合成方向总是从子链的5′端向3′端延伸，利用PCR技术以上图的DNA片段为模板扩增目的基因，需使用引物________（从A、B、C、D四种单链片段中选择）。

（2）利用某人的胰岛B细胞为材料，同时构建cDNA文库和基因组文库，cDNA文库中含有的基因数目比基因组文库中的少，其原因是_______________________________________。

（3）人的基因中有内含子，转录后内含子对应的RNA序列会被切除，而大肠杆菌没有相应机制。故想让大肠杆菌表达出人胰岛素，应从________（填“cDNA文库”或“基因组文库”）中获得人胰岛素基因。

（4）分别从DNA重组和基因的表达角度分析基因工程能够成功的两个原因_______________________________、_________________________。

高三生物非选择题中等难度题查看答案及解析

下列关于PCR技术的叙述，正确的是

A. 该技术应用体内DNA双链复制原理，也需要模板、原料、能量、酶等条件

B. PCR技术建立在对扩增的目的基因序列完全已知的基础上

C. 该技术需要一对特异性的引物，要求一对引物的序列是互补的

D. 该技术需要解旋酶和热稳定的DNA聚合酶

高三生物单选题中等难度题查看答案及解析

用基因工程技术从分离、提纯的圆褐固氮菌中获取固氮基因，然后进行PCR扩增。表1和表2分别表示用PCR扩增固氮基因的反应体系及反应条件。

表1

表2

(1)从表1和表2中可得出，PCR技术与DNA复制相比较，主要区别之一是__________。此外，从反应条件看，所使用的DNA聚合酶应具有____________________________________的特点。每次循环都需要2种引物的主要原因是______________________________________________。

(2)在对固氮基因产物的生产研究中，需要从复杂的细胞混合物中提取、分离高纯度的蛋白质。下图表示蛋白质提取和分离实验涉及的相关原理。　　 　

①图甲表示相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶色谱法分离的过程。试管中收集到的液体最先出现的是相对分子质量较大的蛋白质，原因是_________________________________________。

②图乙所示实验模拟电泳现象，U型管左侧的颜色逐渐变深，原因是_____________________。

高三生物实验题中等难度题查看答案及解析

下列对PCR扩增实验的描述错误的是（    ）

A．实验中通过加热使目的基因DNA解旋，没有加入解旋酶和ATP

B．在设计2种引物时，需要让引物和引物之间的碱基序列互补

C．缓冲溶液中要提供DNA模板、引物、原料、耐热的DNA聚合酶

D．为避免外源DNA污染，实验中的枪头、缓冲液等在使用前必须高压灭菌

高三生物选择题中等难度题查看答案及解析

将母女两人肝班的第三号染色体取出，用蛋白酶处理后，各用PCR仪扩增，加热解旋，制备成DNA单链样本。把母女双方的DNA单链随机一一配对组合，不考虑基因突变，能显示完整杂交带的概率是

A.1      B.0.5        C.0.25           D.0.125

高三生物选择题中等难度题查看答案及解析

下列有关PCR技术的叙述正确的是                                                                         （    ）

A．作为模板的DNA序列必须不断的加进每一次的扩增当中

B．作为引物的脱氧核苷酸序列必须不断的加进每一次的扩增当中

C．反应需要的DNA聚合酶必须不断的加进反应当中

D．反应需要的DNA连接酶必须不断的加进反应当中

高三生物选择题简单题查看答案及解析

家蚕细胞具有高效表达外源基因能力，将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药。请回答：

（1）采用PCR技术可扩增干扰素基因。该PCR反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液（含Mg2+）、水、4种脱氧核苷酸、模板DNA、ATP、________和酶。PCR技术采用_______方法打开DNA双链。

（2）在逆转录酶的作用下，能以干扰素基因产生的mRNA作为模板按照________原则获得cDNA片段。

（3）进行转基因操作前，需用________酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞。

（4）基因工程常用质粒作为运载体，理由是_________________（写出3点）。

（5）将目的基因导入动物细胞最常用的方法是_________。此方法的受体细胞多是_________。

高三生物综合题简单题查看答案及解析