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将母女两人肝班的第三号染色体取出，用蛋白酶处理后，各用PCR仪扩增，加热解旋，制备成DNA单链样本。把母女双方的DNA单链随机一一配对组合，不考虑基因突变，能显示完整杂交带的概率是
A.1 B.0.5 C.0.25 D.0.125
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利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似(如图所示)。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。下列叙述正确的有( )
A. 用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列
B. 设计引物时需要避免引物之间形成碱基互补配对而造成引物自连
C. 退火温度过高可能导致PCR反应得不到任何扩增产物
D. 第四轮循环产物中同时含有引物A和引物B的DNA片段所占的比例为15/16
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利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。下列叙述错误的是
A. 用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列
B. 设计引物时需要避免引物之间形成碱基互补配对而造成引物自连
C. 退火温度过高可能导致PCR反应得不到任何扩增产物
D. 第四轮循环产物中同时含有引物A和引物B的DNA片段所占的比率为15/16
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利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。下列叙述错误的是
A. 用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列
B. 设计引物时需要避免引物之间形成碱基互补配对而造成引物自连
C. 退火温度过高可能导致PCR反应得不到任何扩增产物
D. 第四轮循环产物中同时含有引物A和引物B的DNA片段所占的比率为15/16
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研究人员利用PCR技术扩增了目的基因，并培育了能合成凝乳酶的转基因酵母菌。请结合下图回答：
（1）利用PCR技术扩增目的基因原理_____________________。左图中引物为单链DNA片段，它是根据___________________的脱氧核苷酸序列合成的。从理论上推测，第2轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为________。
（2）右图所示的基因表达载体中的URA3基因能编码乳清苷5-磷酸脱羧酶，该酶能催化酵母菌尿嘧啶的合成，若酵母菌缺乏乳清苷5-磷酸脱羧酶，就无法生长，除非在培养基中加入尿嘧啶。利用URA3基因作为__________基因来筛选转化成功的酵母菌，要选择_______________的酵母菌作为受体细胞，所使用培养基___________（填“需要”或“不需要”）添加尿嘧啶。
（3）奶酪生产中的凝乳酶是一种分泌蛋白。工业生产过程中，________（能/否）选用大肠杆菌作为受体细胞表达出凝乳酶？原因是______________________。
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请根据现代生物工程技术回答下列问题：
（1）基因工程技术中对已获得的目的基因，常采用PCR技术大量扩增。该技术的基本过程是：目的基因DNA受热变性后解链为单链，_________与单链相应互补序列结合，然后在DNA聚合酶的作用下进行___________，如此重复循环多次。
（2）限制酶Smal能识别如下图，并在图中箭头位置切断DNA。
用限制酶Smal切割获取的目的基因需用___________酶构建基因表达载体。
（3）培育转基因小鼠除利用基因工程技术之外还需用到___________、___________等技术。
（4）制备单克隆抗体通常选用细胞融合技术，使______________细胞与___________细胞融合，融合成功的细胞经过筛选就是所需要的___________细胞。
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（10分）请回答基因工程方面的有关问题：
(1)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。 图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。
①从理论上推测，第四轮循环产物中只含有引物A，不含有引物B的DNA片段所占的比例为______。
②至少完成_____轮循环，才能获得两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。
(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的一组引物（只标注了部分碱基序列）是不符合要求的（如下图），请说明理由____________________________________________。
(3) PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的 功能，这是因为________________________________________。
(4)用限制酶EcoRV、Mbol单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如下图(1 kb
即1000个碱基对)，请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、Mbol的切割位点。
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请回答基因工程方面的有关问题：
(1)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。 图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。
①从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为________。
②在第________轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。
(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物（只标注了部分碱基序列）都不合理（如下图），请分别说明理由。
①第1组：引物I和引物Ⅱ局部发生碱基互补配对而失效； ②第2组：________。
(3) PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能，这是因为________。
(4)用限制酶EcoRV、Mbol单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如下图(1 kb
即1000个碱基对)，请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、Mbol的切割位点。
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（8分）请回答基因工程方面的有关问题：
(1)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。
①从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为________。
②在第________轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。
(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的一组引物（只标注了部分碱基序列）不合理（如下图），请说明理由。
________；
(3) PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的 功能，这是因为________。
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利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。以下叙述错误的是
A. 由原来的母链为模板合成的两个新DNA分子中，只含有引物A或引物B
B. 推测第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为1/8
C. 变性过程中被切断的是DNA分子内碱基对之间的氢键
D. PCR与细胞内DNA复制相比所需酶的最适温度较高
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