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利用PCR技术扩增DNA片段（基因），需要的条件有（ ）
①目的基因 ②mRNA ③四种核糖核苷酸 ④四种脱氧核苷酸 ⑤氨基酸 ⑥ATP ⑦耐高温的DNA聚合酶 ⑧核糖体 ⑨引物
A.②③⑥⑦⑨ B.①④⑥⑦⑨
C.①④⑦⑨ D.②⑤⑥⑧
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利用PCR技术扩增目的基因需要的条件是 ( )
①含目的基因的DNA；②DNA引物；③四种脱氧核苷酸；④DNA聚合酶；⑤mRNA；⑥核糖体
A.①②③④ B.②③④⑤ C.①③④⑤ D.①②③⑥
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PCR技术扩增DNA，需要的条件是( )
①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸 ④DNA聚合酶等⑤mRNA⑥核糖体
A．①②③④ B．②③④⑤ C．①③④⑤ D．①②③⑥。
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PCR技术扩增DNA，需要的条件是( )。
①目的基因 ②引物 ③四种脱氧核苷酸 ④DNA聚合酶等 ⑤mRNA ⑥核糖体
A．②③④⑤ B．①②③⑥
C．①②③④ D．①③④⑤
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PCR技术扩增DNA,需要的条件是 ( )
①目的基因 ②引物 ③四种脱氧核苷酸 ④耐高温的DNA聚合酶等
⑤mRNA ⑥核糖体
A.①②③④ B.②③④⑤ C.①③④⑤ D.①②③⑥
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（8分）PCR技术是把- DNA片段在体外酶的作用下，合成许许多多相同片段的一种方法，利用它能快速而特异地扩增任何要求的目的基因或DNA分子片段，它的基本过程如下图所示：
图中一表示每次扩增过程中需要的引物（加入足够多）。每个引物含20个脱氧核苷酸，并分别与DNA片段两端碱基互补，其作用是引导合成DNA子链，还作为子链的一部分，不会从模板链上脱落下来。
（1）PCR技术的原理是模拟生物体内的________过程。
（2）PCR扩增过程中需要对DNA片段进行高温处理，其目的是________，此过程在生物体内需酶的参与，作用部位是DNA的________键。
（3）若引物都用3H标记，从理论上计算，所得DNA分子中含有。H标记的占________。
（4）假定DNA片段含200对碱基，进行3次扩增，从理论上计算需要提供________个游离脱氧核苷酸。
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（10分）PCR技术是把一DNA片段在体外酶的作用下，合成许许多多相同片段的一种方法，利用它能快速而特异地扩增任何要求的目的基因或DNA分子片段，它的基本过程如下图所示
图中
表示每次扩增过程中需要的引物（加入足够多）。每个引物含20个核苷酸，并分别与DNA片段两端碱基互补，其作用是引导合成DNA子链，还作为子链的一部分，不会从模板链上脱落下来，（1）PCR技术的原理是模拟生物体内的________过程。
（2）PCR扩增过程中需要对DNA片段进行高温处理，其目的是________，此过程在生物体内需________酶的参与，作用部位是DNA的________键。
（3）据图分析，扩增过程中需要的引物有________种，其实质是，假如引物都用3H标记，从理论上计算，所得DNA分子中含有3H标记的占________。
（4）假定DNA片段含200对脱氧核苷酸，经3次扩增，从理论上计算还需要提供________个游离脱氧核苷酸。
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（7分）重叠延伸PCR技术是一种通过寡聚核苷酸链之间重叠的部分互相搭桥、互为模板，通过多次PCR扩增，从而获得目的基因的方法。该技术在扩增较长片段的DNA、不同来源的DNA片段拼接、基因的定点诱变等方面具有广泛的应用前景。右图是利用重叠延伸PCR技术扩增某目的基因的过程。其主要没计思路是用具有互补配对片段的引物（图中引物2、引物3），分别PCR，获得有重叠链的两种 DNA片段，再在随后的扩增反应中通过重叠链的延伸获得目的基因。结合所学知识，分析下列问题。
(1)引物中G+C的含量影响着引物与模板DNA结合的稳定性，引物中G+C的含量越高，结合稳定性 。
(2)在第一阶段获得两种具有重叠片段DNA 的过程中，必须将引物l、2和引物3、4 置于不同反应系统中，这是因为________。
(3)引物l、引物2组成的反应系统和引物3、引物4组成的反应系统中均进行一次复制，共产生________种双链DNA分子。
(4)在引物1、引物2组成的反应系统中，经第一阶段形成图示双链DNA至少要经过 次复制。
(5)若利用微生物扩增该目的基因，其基本步骤包括：________、、微生物的筛选和培养、从菌群中获取目的基因。
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基因工程的第一步是筛选获取目的基因，利用PCR技术获取目的基因是一种常用的手段。图示某DNA分子经切后，DNA片段自身环化并利用PCR技术扩增的部分过程。
（1）PCR与生物体内DNA复制过程不同，解旋时不需要_______________酶催化而是通过_______________实现的，因此PCR技术使用的DNA聚合酶必须是_______________的。
（2）如果在某基因组中定位了一个目的基因X，其碱基序列未知，但已知X临近区域的一段DNA序列，此时可利用图示方法进行目的基因的筛选和扩增。作用于图示多个酶切点的限制酶种类应_______________（相同/不同）。操作时根据图中的_______________设计引物，将含有目的基因的DNA片段克隆出来，为便于目的基因与载体结合，可在_______________添加特定的限制酶识别序列。
（3）实践中也常用RT-PCR技术扩增目的基因，这种技术是以RNA为模板。若利用RT-PCR技术扩增胰岛素基因，应选择_______________细胞提取RNA。
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利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似(如图所示)。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。下列叙述正确的有( )
A. 用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列
B. 设计引物时需要避免引物之间形成碱基互补配对而造成引物自连
C. 退火温度过高可能导致PCR反应得不到任何扩增产物
D. 第四轮循环产物中同时含有引物A和引物B的DNA片段所占的比例为15/16
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表示每次扩增过程中需要的引物（加入足够多）。每个引物含20个核苷酸，并分别与DNA片段两端碱基互补，其作用是引导合成DNA子链，还作为子链的一部分，不会从模板链上脱落下来，