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稻瘟病是水稻最重要的病害之一，为达到防治目的，科研人员通过转基因技术培育出了抗稻瘟病水稻品种。回答下列问题：
（1）通过 RT-PCR 技术以抗稻瘟病基因的 RNA 为模板扩增出 cDNA。在 PCR 过程中，两个引物是_____酶的结合位点；用 cDNA 单链与该抗性水稻植株的单链 DNA 进行分子杂交，可能出现游离的单链区，其原因是_____。
（2）利用 RT-PCR 技术扩增基因时，设计两种引物的碱基序列的主要依据是_____，为了便于扩增后的X 基因与质粒连接，常在两条引物上设计加入不同的限制酶酶切位点，主要目的是_____。
（3）基因工程中，将重组质粒导入植物细胞采用最多的方法是_____，导入动物受精卵采用的方法是_____。
（4）若要检测抗稻瘟病基因是否翻译出相应蛋白质，可采用的分子水平的检测方法是_____。
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稻瘟病是水稻最重要的病害之一，为达到防治目的，科研人员通过转基因技术培育出了抗稻瘟病水稻新品种。请回答下列问题：
（1）DNA粗提取实验中，可使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出的方法有__________、__________。
（2）构建基因表达载体时，通常用不同种限制酶切割目的基因形成两个不同的黏性末端，其目的是_______。
（3）通过RT-PCR技术以抗稻瘟病基因的RNA为模板扩增出cDNA。在PCR过程中，两个引物是__________酶的结合位点；用cDNA单链与该抗性水稻植株的单链DNA进行分子杂交，可能出现游离的单链区，其原因是____________________。
（4）如果一个抗性基因整合到非抗性水稻的一条染色体上，得到的二倍体转基因抗性植株自交，子代中抗性与非抗性植株的数量比为_________________。
（5）关于转基因生物安全性问题的争论，主要表现在三个方面：______________________________。
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【生物——选修3：现代生物科技专题】菊天牛是菊花的主要害虫之一，为达到防治目的，科研人员通过转基因技术培育出了抗虫菊花。请回答下列问题：
（1）可用 处理土壤农杆菌，使其处于 以便吸收重组质粒。
（2）将重组质粒导入土壤农杆菌的目的是利用农杆菌能够 的特点，使目的基因进入受体细胞中，并插入到菊花细胞的 上，最终形成转基因植株。
（3）用PCR方法检测转基因菊花是否含有目的的基因时，需根据 的脱氧核苷酸序列设计特异引物，以 为模板进行第一轮扩增。
（4）将转基因菊花嫩茎及叶片与人工饲料以适当比例混合后饲喂菊天牛2龄幼虫，实验结果如下表所示：
组别
死亡率（%）
实验组
转基因植株1
60．00
转基因植株2
53．33
对照组
13．33
①对照组应饲喂等量的 菊花嫩茎及叶片与人工饲料混合物。
②据表分析，实验组与对照组 差异显著，说明转基因菊花对菊天牛2龄幼虫有较强的毒杀作用。
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菊天牛是菊花的主要害虫之一，为达到防治目的，科研人员通过转基因技术培育出了抗虫菊花。请回答下列问题：
（1）可用_____处理土壤农杆菌，使其处于_____以便吸收重组质粒。
（2）将重组质粒导入土壤农杆菌的目的是利用农杆菌能够_____的特点，使目的基因进入受体细胞中，并插入到菊花细胞的_____上，最终形成转基因植株。
（3）用PCR方法检测转基因菊花是否含有目的的基因时，需根据_____的脱氧核苷酸序列设计特异引物，以_____为模板进行第一轮扩增。
（4）将转基因菊花嫩茎及叶片与人工饲料以适当比例混合后饲喂菊天牛2龄幼虫，实验结果如下表所示：
组别
死亡率（%）
实验组
转基因植株1
60.00
转基因植株2
53.33
对照组
13.33
①对照组应饲喂等量的_____菊花嫩茎及叶片与人工饲料混合物。
②据表分析，实验组与对照组_____差异显著，说明转基因菊花对菊天牛2龄幼虫有较强的毒杀作用。
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菊天牛是菊花的主要害虫之一，为达到防治目的，科研人员通过转基因技术培育出了抗虫菊花。请回答下列问题：
(1)在基因工程操作过程中的“运载体”的化学本质是_________(填“蛋白质”、“DNA”或“RNA”)。培育“抗虫菊花”的基因工程操作步骤中，其核心是________________，其中标记基因的功能为_______________________________________________________。
(2)在基因工程操作中，首先将目的基因A(编码“蛋白A”)插入至_________________，然后将此重组质粒导入农杆菌中。当植物体受损伤时，伤口处的细胞会分泌大量的____________，吸引农杆菌移向这些细胞，此时修饰的T-DNA可以转入植物细胞，并整合到__________中。
(3)实践发现，在构建重组质粒的过程中，若直接在启动子的下游接上编码蛋白A的DNA序列(TTCGCTTCT……CAGGAAGGA)，则所构建的表达载体转入宿主细胞后不能翻译出蛋白A。请根据基因表达原理分析，其原因是___________________________________。
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科研人员从耐盐植物中获得了耐盐基因，利用转基因技术将耐盐基因转入水稻细胞中，进而培育出了耐盐水稻新品系。下图表示构建耐盐基因表达载体的过程。请回答下列问题：
(1)据图分析可知，在构建的耐盐基因表达载体中，图中未标注出的必需元件有耐盐基因启动子，其功能是_________________________________。
(2)据图分析可知，在构建耐盐基因表达载体时，需要用______________对质粒进行切割，从而保证______________________________。
(3)常用农杆菌转化法将耐盐基因导入水稻受体细胞，根据农杆菌的感染特点，将耐盐基因插入Ti质粒的T-DNA上，经过转化作用进入水稻细胞，并将其插入水稻细胞______________上，从而使其遗传特性得以稳定维持和表达。
(4)受体细胞经诱导后形成愈伤组织的过程称为______________，进一步培育成幼苗，这体现了___________________________。检测转基因水稻是否培育成功可使用的最简便的方法是________________________________。
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水稻是我国最重要的粮食作物。稻瘟病是由稻瘟病菌(Mp)侵染水稻引起的病害，严重危害我国的粮食生产安全。与使用农药相比，抗稻瘟病基因的利用是控制水稻稻瘟病更加有效、安全和经济的措施。请回答下列问题：
(1)与水稻细胞相比，Mp细胞最突出的特点是__________。
(2)若采用高能射线处理正在萌发的水稻种子或幼苗，培育出抗稻瘟病水稻所依据的育种原理是__________；运用杂交实验或基因工程的方法，将抗稻瘟病基因“嫁接”到水稻细胞的染色体上，培育出抗稻瘟病水稻所依据的育种原理是__________。
(3)Mp是由不同基因型组成的群体，侵染和危害水稻的基因有多种。在水稻种植区，如大面积连续种植某个含单一抗稻瘟病基因的水稻品种，将会引起MP种群中相应群体的基因频率__________(填“上升”“不变”或“下降”)，而对Mp其他群体不起作用，使该单抗稻瘟病水稻的抗性逐渐减弱。
(4)采用高能射线处理，可培育出水稻染色体同一位点有多种不同等位基因的抗稻瘟病新品种(以针对Mp他群体)。该实例可以说明__________。
(5)为判断某抗稻瘟病水稻是否为纯合子，最优化的实验设计思路是__________。
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（11分）我们日常吃的大米中铁含量极低，科研人员通过基因工程等技术，培育出了铁含量比普通大米高60%的转基因水稻，改良了稻米的营养品质。下图为培育转基因水稻过程示意图，请分析回答。
（1）铁结合蛋白基因来自菜豆，可通过 扩增获取，如果该基因脱氧核苷酸序列已知且比较小，还可用 方法直接人工合成。
（2）构建重组Ti质粒时，通常先要用 分别切割 。将重组Ti质粒导入农杆菌时，可以用 处理农杆菌，使重组Ti质粒易于导入。
（3）将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时，通过培养基2的筛选培养，可以获得 ；培养基3与培养基2的区别是 。检测培育转基因水稻的目的是否达到，需要检测转基因稻米 。
（4）为研究外源基因的遗传方式，将T0代植株上收获的种子种植成T1代株系，检测各单株的潮霉素抗性。在检测的多数T1代株系内，抗潮霉素植株与潮霉素敏感植株的比例为3∶1，此结果说明外源基因的遗传符合 。有少数T1代株系的所有植株都表现为对潮霉素敏感，但其体内能检测到铁结合蛋白基因，造成这一结果最可能的原因是 。
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我们日常吃的大米中铁含量极低，科研人员通过基因工程等技术，培育出了铁含量比普通大米高60%的转基因水稻，改良了稻米的营养品质。下面为培育转基因水稻过程示意图，请回答：
（1）在上述工程中，铁结合蛋白基因称为___________，利用PCR技术扩增铁结合蛋白基因时，需要在反应体系中添加的有机物质是___________、___________、4种脱氧核糖核苷酸和耐热性的DNA聚合酶，扩增过程在PCR扩增仪中完成。
（2）将铁结合蛋白基因导入小鼠体内之前，需要操作的核心步骤是______________________，此步骤最常用的工具是___________。
（3）将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时，通过培养基2的筛选培养，可以获得______________________；培养基3与培养基2的主要区别是_________________________________。
（4）检测培育转基因水稻的目的是否达到，需要检测转基因水稻______________________。
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我们日常吃的大米中铁含量极低，科研人员通过基因工程等技术，培育出了铁含量比普通大米高60％的转基因水稻，改良了稻米的营养品质。下图为培育转基因水稻过程示意图，请回答：
(1)在上述工程中，铁结合蛋白基因称为____________（1分），获取该基因后常用___________技术进行扩增。
(2)构建重组Ti质粒时，通常要用同种限制酶分别切割___________和__________。将重组Ti质粒转入农杆菌时，可以用___________处理农杆菌，使重组Ti质粒易于导入。
(3)将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时，通过培养基2的筛选培养，可以获得__________；培养基3与培养基2的区别是_________。
(4)检测培育转基因水稻的目的是否达到，需要检测转基因水稻____________。
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