研究表明，HER2/neu是一种原癌基因，它表达的H蛋白在多种癌细胞特别是乳腺癌细胞中过量...

研究表明，HER2/neu是一种原癌基因，它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，目前已成为有效的生物治疗手段。

（1）原癌基因的作用是____________________。

（2）H蛋白是一个跨膜蛋白，结构如图所示。制备免疫小鼠用的H蛋白（抗原）时，应构建胞外区基因，转入原核细胞表达并提纯。选择胞外区的原因是_________________。为了扩增出大量胞外区需要用到PCR技术。常规PCR技术一般包括变性、退火、延伸等步骤，退火的目的是________________________。设计引物是PCR技术的关键步骤之一，某同学设计的两组引物如下表所示。_________（填“引物对A”或“引物对B”）设计不合理，并说出不合理的理由：______________________________________。

（3）制备抗H蛋白单克隆抗体时，需将H蛋白注射到小鼠体内。这样做的目的是_____________________________。制备抗H蛋白单克隆抗体时，需要用到细胞融合技术，该技术的主要优点是_____________________________________。

（4）治疗乳腺癌时，方法之一是单独使用抗H蛋白单克隆抗体，试写出治疗乳腺癌的另一种疗效高、毒副作用小的、不损伤正常细胞的方法：________________。

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（10分）研究表明，HER2/neu是一种原癌基因，它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，目前已成为有效的生物治疗手段。

（1）选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点，是因为H蛋白在成年个体的正常组织中___________（填“低表达”或“高表达”）。H蛋白是一个跨膜蛋白，结构如图12所示。制备免疫小鼠用的H蛋白（抗原）时，应构建___________区基因，转入原核细胞表达并提纯。

（2）将H蛋白注射到小鼠体内，取该小鼠的脾脏细胞与___________细胞进行融合，使用的化学诱导剂是______________，细胞融合的原理是_________________。

（3）将融合细胞在__________培养基中培养，一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞生长。将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养，应用____________技术进行抗体阳性检测。经多次筛选，就能得到产生单克隆抗体的杂交瘤细胞。

（4）将筛选得到的杂交瘤细胞，经过_______________或小鼠腹腔内培养，获取大量的单克隆抗体。

（5）治疗乳腺癌时，可单独使用抗H蛋白单克隆抗体，也可将该单克隆抗体与抗癌药物结合构建“生物导弹”，杀死癌细胞。这充分体现了单克隆抗体______________的特点。

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研究表明，HER2/neu是一种原癌基因，它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，目前已成为有效的生物治疗手段。

(1)H蛋白在成年个体的正常组织中表达量____(填“低”或“高”)。H蛋白是一个跨膜蛋白，结构如图所示。制备免疫小鼠用的H蛋白(抗原)时，应构建_______区基因，转入受体细胞表达并提纯。

(2)为扩增出大量目的基因需用到PCR技术。常规PCR技术一般包括变性、退火、延伸等步骤，退火(55~60℃)时_________________碱基互补配对。设计引物是PCR技术的关键之一，某同学设计的两组引物如下表所示，其中引物对______(填“A”或“B”)设计不合理。

(3)制备抗H蛋白单克隆抗体时，需将H蛋白注射到小鼠体内，这样做的目的是使小鼠体内产生_________。

(4)治疗乳腺癌时，可单独使用抗H蛋白单克隆抗体，也可以将______结合制成“生物导弹”，杀死癌细胞。

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研究表明，HER2/neu是一种原癌基因，它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，目前已成为有效的生物治疗手段。

（1）选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点，是因为H蛋白在成年个体的正常组织中_________（填“低表达”或“高表达”）。H蛋白是一个跨膜蛋白，结构如图所示。制备免疫小鼠用的H蛋白（抗原）时，应构建_________区基因，转入原核细胞表达并提纯。

（2）将H蛋白注射到小鼠体内，取该小鼠的脾脏细胞与_________细胞进行融合，使用的化学诱导剂是_________，细胞融合的原理是_________。

（3）将融合细胞在_________培养基中培养，一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞生长。将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养，应用_________技术进行抗体阳性检测。经多次筛选，就能得到产生单克隆抗体的杂交瘤细胞。

（4）将筛选得到的杂交瘤细胞，经过_________或小鼠腹腔内培养，获取大量的单克隆抗体。

（5）治疗乳腺癌时，可单独使用抗H蛋白单克隆抗体，也可将该单克隆抗体与抗癌药物 结合构建“生物导弹”，杀死癌细胞。这充分体现了单克隆抗体_________的特点。

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研究表明，HER2/neu是一种原癌基因，它表达的H蛋白在多种癌细胞特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，目前已成为治疗乳腺癌有效的生物制剂。

（1）H蛋白在成年个体的正常组织中表达量________(填低或高)。H蛋白是一种跨膜蛋白，结构如图所示。制备免疫小鼠所需H蛋白(抗原)时，应构建________区基因，转入受体细胞表达并提纯。

（2）为扩增出大量目的基因需用到PCR技术。常规PCR技术一般包括变性、复性、延伸等步骤，复性(55～60 ℃)时__________________________碱基互补配对。设计引物是PCR技术的关键之一，某同学设计的两对引物如下表所示，其中引物对________(填A或B)设计不合理。

（3）制备抗H蛋白单克隆抗体时，需将H蛋白注射到小鼠体内，这样做的目的是使小鼠体内产生_________________________________。

（4）治疗乳腺癌时，可单独使用抗H蛋白单克隆抗体，也可以将__________________________结合制成“生物导弹”，杀死癌细胞。

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研究表明，HER2/neu是一种原癌基因，它表达的H蛋白在多种癌细胞特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，目前已成为治疗乳腺癌有效的生物制剂。

（1）H蛋白在成年个体的正常组织中表达量________(填低或高)。H蛋白是一种跨膜蛋白，结构如图所示。制备免疫小鼠所需H蛋白(抗原)时，应构建________区基因，转入受体细胞表达并提纯。

（2）为扩增出大量目的基因需用到PCR技术。常规PCR技术一般包括变性、复性、延伸等步骤，复性(55～60 ℃)时__________________________碱基互补配对。设计引物是PCR技术的关键之一，某同学设计的两对引物如下表所示，其中引物对________(填A或B)设计不合理。

（3）制备抗H蛋白单克隆抗体时，需将H蛋白注射到小鼠体内，这样做的目的是使小鼠体内产生_________________________________。

（4）治疗乳腺癌时，可单独使用抗H蛋白单克隆抗体，也可以将__________________________结合制成“生物导弹”，杀死癌细胞。

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研究表明，HER2/neu基因会在正常分裂的细胞中表达产生H蛋白，但在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中的H蛋白的量非常高。据些推测正确的是（　　 ）

A．HER2/neu基因可能是抑癌基因

B．HER2/neu基因可能是癌基因

C．正常细胞的增殖不需要H蛋白

D．抗H蛋白单克隆抗体可能抑制乳腺癌细胞的生长

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研究表明，HER2/neu基因会在正常分裂的细胞中表达产生H蛋白，但在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中的H蛋白的量非常高。据些推测正确的是（　　 ）

A．HER2/neu基因可能是抑癌基因

B．HER2/neu基因可能是癌基因

C．正常细胞的增殖不需要H蛋白

D．抗H蛋白单克隆抗体可能抑制乳腺癌细胞的生长

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资料甲：某种细菌体内有抗虫基因，该基因能指导抗虫毒蛋白的合成。我国科学家成功地将该抗虫基因导入棉花细胞中，培育出了抗虫效果好的棉花新品种。

资料乙：研究表明，抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，科学家利用小鼠制备出了抗H蛋白的单克隆抗体。

请回答下列问题：

（1）资料甲中，获取抗虫基因时可使用EcoRI，其原因是含抗虫基因的DNA片段中含有　　　　 　　　　 　 　 。向棉花细胞导入抗虫基因时，我国科学家采用了　　　　　 　　　　 法。抗虫基因导入棉花细胞后，为确定棉花植株是否具有抗虫特性以及抗性的程度如何，需要做　　　　　　　 实验进行个体水平的鉴定。

（2）资料乙中，选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点，是因为H蛋白在成年个体的正常组织细胞中

（填“低表达”或“高表达”）。将H蛋白注射到小鼠体内，从该小鼠的脾脏中获得相应的B淋巴细胞，将其与骨髓瘤细胞进行融合，细胞融合利用的原理是　　　 　　　　　　　　　 。与植物原生质体融合过程相比，该融合过程特有的诱导方法是　　　　　　 　　 。在杂交瘤细胞的体外培养过程中，培养液中是否需要添加血清　　　 （填“需要”或“不需要”）；培养箱中充入5% CO2的主要作是　　　　　 。为避免培养过程中代谢产物对杂交瘤细胞的毒害，常采取的措施是　　　 　　　　　　　　　　 　　 。

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经研究表明，在多种肿瘤细胞中的TOP2A蛋白大量表达，因此成为抗肿瘤的研究靶点，某科研单位制作了TOP2A蛋白的单克隆抗体。请回答：

(1)利用基因工程制备TOP2A蛋白：将TOP2A蛋白基因和质粒用___________处理并连接成重组质粒，然后导入经_________处理的大肠杆菌，并将大肠杆菌接种到含氨苄青霉素的LB液体培养基中培养，经离心得到菌体，破碎提纯得到TOP2A蛋白。

(2)TOP2A蛋白单克隆抗体的制备:将TOP2A蛋白反复多次注射到小鼠体内，使其发生_________，取经过免疫的小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞在物质_________介导下发生细胞融合，形成杂交瘤细胞。并将各杂交瘤细胞单独分装培养，经筛选、___________后，获得能产生单一抗体的__________

A.连续细胞系B.有限细胞系C.连续细胞株D.有限细胞株

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