（10分）研究表明，HER2/neu是一种原癌基因，它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺...

研究表明，HER2/neu是一种原癌基因，它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，目前已成为有效的生物治疗手段。

（1）原癌基因的作用是____________________。

（2）H蛋白是一个跨膜蛋白，结构如图所示。制备免疫小鼠用的H蛋白（抗原）时，应构建胞外区基因，转入原核细胞表达并提纯。选择胞外区的原因是_________________。为了扩增出大量胞外区需要用到PCR技术。常规PCR技术一般包括变性、退火、延伸等步骤，退火的目的是________________________。设计引物是PCR技术的关键步骤之一，某同学设计的两组引物如下表所示。_________（填“引物对A”或“引物对B”）设计不合理，并说出不合理的理由：______________________________________。

（3）制备抗H蛋白单克隆抗体时，需将H蛋白注射到小鼠体内。这样做的目的是_____________________________。制备抗H蛋白单克隆抗体时，需要用到细胞融合技术，该技术的主要优点是_____________________________________。

（4）治疗乳腺癌时，方法之一是单独使用抗H蛋白单克隆抗体，试写出治疗乳腺癌的另一种疗效高、毒副作用小的、不损伤正常细胞的方法：________________。

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（10分）研究表明，HER2/neu是一种原癌基因，它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，目前已成为有效的生物治疗手段。

（1）选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点，是因为H蛋白在成年个体的正常组织中___________（填“低表达”或“高表达”）。H蛋白是一个跨膜蛋白，结构如图12所示。制备免疫小鼠用的H蛋白（抗原）时，应构建___________区基因，转入原核细胞表达并提纯。

（2）将H蛋白注射到小鼠体内，取该小鼠的脾脏细胞与___________细胞进行融合，使用的化学诱导剂是______________，细胞融合的原理是_________________。

（3）将融合细胞在__________培养基中培养，一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞生长。将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养，应用____________技术进行抗体阳性检测。经多次筛选，就能得到产生单克隆抗体的杂交瘤细胞。

（4）将筛选得到的杂交瘤细胞，经过_______________或小鼠腹腔内培养，获取大量的单克隆抗体。

（5）治疗乳腺癌时，可单独使用抗H蛋白单克隆抗体，也可将该单克隆抗体与抗癌药物结合构建“生物导弹”，杀死癌细胞。这充分体现了单克隆抗体______________的特点。

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研究表明，HER2/neu是一种原癌基因，它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，目前已成为有效的生物治疗手段。

(1)H蛋白在成年个体的正常组织中表达量____(填“低”或“高”)。H蛋白是一个跨膜蛋白，结构如图所示。制备免疫小鼠用的H蛋白(抗原)时，应构建_______区基因，转入受体细胞表达并提纯。

(2)为扩增出大量目的基因需用到PCR技术。常规PCR技术一般包括变性、退火、延伸等步骤，退火(55~60℃)时_________________碱基互补配对。设计引物是PCR技术的关键之一，某同学设计的两组引物如下表所示，其中引物对______(填“A”或“B”)设计不合理。

(3)制备抗H蛋白单克隆抗体时，需将H蛋白注射到小鼠体内，这样做的目的是使小鼠体内产生_________。

(4)治疗乳腺癌时，可单独使用抗H蛋白单克隆抗体，也可以将______结合制成“生物导弹”，杀死癌细胞。

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研究表明，HER2/neu是一种原癌基因，它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，目前已成为有效的生物治疗手段。

（1）选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点，是因为H蛋白在成年个体的正常组织中_________（填“低表达”或“高表达”）。H蛋白是一个跨膜蛋白，结构如图所示。制备免疫小鼠用的H蛋白（抗原）时，应构建_________区基因，转入原核细胞表达并提纯。

（2）将H蛋白注射到小鼠体内，取该小鼠的脾脏细胞与_________细胞进行融合，使用的化学诱导剂是_________，细胞融合的原理是_________。

（3）将融合细胞在_________培养基中培养，一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞生长。将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养，应用_________技术进行抗体阳性检测。经多次筛选，就能得到产生单克隆抗体的杂交瘤细胞。

（4）将筛选得到的杂交瘤细胞，经过_________或小鼠腹腔内培养，获取大量的单克隆抗体。

（5）治疗乳腺癌时，可单独使用抗H蛋白单克隆抗体，也可将该单克隆抗体与抗癌药物 结合构建“生物导弹”，杀死癌细胞。这充分体现了单克隆抗体_________的特点。

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研究表明，HER2/neu是一种原癌基因，它表达的H蛋白在多种癌细胞特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，目前已成为治疗乳腺癌有效的生物制剂。

（1）H蛋白在成年个体的正常组织中表达量________(填低或高)。H蛋白是一种跨膜蛋白，结构如图所示。制备免疫小鼠所需H蛋白(抗原)时，应构建________区基因，转入受体细胞表达并提纯。

（2）为扩增出大量目的基因需用到PCR技术。常规PCR技术一般包括变性、复性、延伸等步骤，复性(55～60 ℃)时__________________________碱基互补配对。设计引物是PCR技术的关键之一，某同学设计的两对引物如下表所示，其中引物对________(填A或B)设计不合理。

（3）制备抗H蛋白单克隆抗体时，需将H蛋白注射到小鼠体内，这样做的目的是使小鼠体内产生_________________________________。

（4）治疗乳腺癌时，可单独使用抗H蛋白单克隆抗体，也可以将__________________________结合制成“生物导弹”，杀死癌细胞。

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研究表明，HER2/neu是一种原癌基因，它表达的H蛋白在多种癌细胞特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，目前已成为治疗乳腺癌有效的生物制剂。

（1）H蛋白在成年个体的正常组织中表达量________(填低或高)。H蛋白是一种跨膜蛋白，结构如图所示。制备免疫小鼠所需H蛋白(抗原)时，应构建________区基因，转入受体细胞表达并提纯。

（2）为扩增出大量目的基因需用到PCR技术。常规PCR技术一般包括变性、复性、延伸等步骤，复性(55～60 ℃)时__________________________碱基互补配对。设计引物是PCR技术的关键之一，某同学设计的两对引物如下表所示，其中引物对________(填A或B)设计不合理。

（3）制备抗H蛋白单克隆抗体时，需将H蛋白注射到小鼠体内，这样做的目的是使小鼠体内产生_________________________________。

（4）治疗乳腺癌时，可单独使用抗H蛋白单克隆抗体，也可以将__________________________结合制成“生物导弹”，杀死癌细胞。

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研究表明，HER2/neu基因会在正常分裂的细胞中表达产生H蛋白，但在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中的H蛋白的量非常高。据些推测正确的是（　　 ）

A．HER2/neu基因可能是抑癌基因

B．HER2/neu基因可能是癌基因

C．正常细胞的增殖不需要H蛋白

D．抗H蛋白单克隆抗体可能抑制乳腺癌细胞的生长

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研究表明，HER2/neu基因会在正常分裂的细胞中表达产生H蛋白，但在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中的H蛋白的量非常高。据些推测正确的是（　　 ）

A．HER2/neu基因可能是抑癌基因

B．HER2/neu基因可能是癌基因

C．正常细胞的增殖不需要H蛋白

D．抗H蛋白单克隆抗体可能抑制乳腺癌细胞的生长

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乳腺癌发生是一种生长因子能与乳腺细胞表面的受体 HER2　 蛋白结合，结果导致癌症发生。超过 20%乳腺癌被证实过度表达了这种与生长因子结合的受体 HER2 蛋白。研究人员将细菌进行基因工程改造生产的某单克隆抗体对乳腺癌细胞表面的受体 HER2 蛋白结合可使细胞死亡。根据以下提供的实验材料和用具验证某单克隆抗体上述效果，请你完善实验思路，预测实验结果并进行分析。

材料与用具：人乳腺癌细胞（过度表达了HER2 蛋白）、细胞培养液、某单克隆抗体、血清抗体（含有 HER2 蛋白的抗体）、培养瓶等。（要求与说明：实验仪器、试剂、用具操作、培养条件、检测活细胞方法等不作具体要求）

（1）实验思路：

①实验分组：________________。每组设置若干个重复样品。

②_____。

③_____。

④在培养过程中，每隔一段时间，重复②。

⑤对所得实验数据进行分析与处理。

（2）以细胞存活率（细胞存活率=实验组活细胞数/ 对照组活细胞数，对照组细胞存活率为 1）为指标，设计一个坐标，用曲线图预期实验结果：__________________。

（3）某些化学物质被认为能引发癌症被称为致癌物， Bruse Ames 发明的埃姆斯检测法是检验某种化学物质是否能诱发突变的简便易行方法如图所示。

（注：大鼠肝脏提取物提供致癌物诱发突变所需的酶）

①埃姆斯检测法采用的材料是一株组氨酸合成基因被破坏的沙门细菌，不能在缺少组氨酸的培养基上生长，只有_____的菌株才能在上述培养基上生长，这一诱发突变称回复突变。

②该实验的检测指标是_____，若该值越大，说明致癌物回复突变发生的频率越________。

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研究发现某肿瘤细胞中，原癌基因X过量表达会持续激活细胞内的信号传导，启动细胞DNA的复制，导致细胞异常增殖；检测成人多种正常组织后，发现原癌基因X只在乳腺、呼吸道等上皮细胞中有微弱表达。据上分析错误的是

A．基因表达往往具有组织特异性

B．可检测相应的mRNA或蛋白质来判断原癌基因X是否表达

C．原癌基因的主要功能是调节细胞周期，阻止细胞不正常的增殖

D．抑制原癌基因X表达或其表达产物的作用能降低该肿瘤细胞的增殖能力

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