乳腺癌发生是一种生长因子能与乳腺细胞表面的受体 HER2 蛋白结合，结果导致癌症发生。超过...

乳腺癌发生是一种生长因子能与乳腺细胞表面的受体 HER2　 蛋白结合，结果导致癌症发生。超过 20%乳腺癌被证实过度表达了这种与生长因子结合的受体 HER2 蛋白。研究人员将细菌进行基因工程改造生产的某单克隆抗体对乳腺癌细胞表面的受体 HER2 蛋白结合可使细胞死亡。根据以下提供的实验材料和用具验证某单克隆抗体上述效果，请你完善实验思路，预测实验结果并进行分析。

材料与用具：人乳腺癌细胞（过度表达了HER2 蛋白）、细胞培养液、某单克隆抗体、血清抗体（含有 HER2 蛋白的抗体）、培养瓶等。（要求与说明：实验仪器、试剂、用具操作、培养条件、检测活细胞方法等不作具体要求）

（1）实验思路：

①实验分组：________________。每组设置若干个重复样品。

②_____。

③_____。

④在培养过程中，每隔一段时间，重复②。

⑤对所得实验数据进行分析与处理。

（2）以细胞存活率（细胞存活率=实验组活细胞数/ 对照组活细胞数，对照组细胞存活率为 1）为指标，设计一个坐标，用曲线图预期实验结果：__________________。

（3）某些化学物质被认为能引发癌症被称为致癌物， Bruse Ames 发明的埃姆斯检测法是检验某种化学物质是否能诱发突变的简便易行方法如图所示。

（注：大鼠肝脏提取物提供致癌物诱发突变所需的酶）

①埃姆斯检测法采用的材料是一株组氨酸合成基因被破坏的沙门细菌，不能在缺少组氨酸的培养基上生长，只有_____的菌株才能在上述培养基上生长，这一诱发突变称回复突变。

②该实验的检测指标是_____，若该值越大，说明致癌物回复突变发生的频率越________。

高三生物实验题困难题查看答案及解析

细胞周期失控是癌症的一个标志性特征，细胞周期素依赖性激酶（CDK)4和6是细胞周期的关键调节因子，CDK4/6在许多细胞中均过度活跃，导致细胞增殖失控。在雌激素受体阳性乳腺癌中，CDK4/6的过度活跃也非常频繁。Ⅰbiance是一种口服CDK4/6抑制剂。为了验证Ⅰbrance对乳腺癌细胞体外生长的作用，请根据以下提供的实验材料,完善实验思路，并回答以下问题。

说明:细胞的数量通过测定相应培养瓶的吸光度值表示，具体操作过程不做要求；细胞抑制率=(1-实验组吸光度值/对照组吸光度值）；CDK4/6活性可用抗原抗体法进行检测，具体检测过程不做要求。

材料和用具:细胞培养瓶、乳腺癌细胞（MCF-7)悬液、乳腺癌细胞培养液、MTT仪器（测定细胞培养液的吸光度）、不同浓度的Ⅰbrance溶液(用生理盐水配制）、生理盐水、CDK4/6活性检测试剂

(1)实验思路：

___________

实验结果:①实验组细胞的抑制率高于对照组，在三组实验组中，Ⅰbrance浓度越高抑制率越大。②CDK4/6活性在对照组中最高,在三组实验组中,Ⅰbrance浓度越高CDK4/6活性越低。

(2)根据（1)中的思路和结果，设计一张表格用以记录实验结果。

___________

(3)研究发现实验组处于细胞周期S期细胞的比例均显著减小，且随着药物剂量增加，S期细胞的比例减少，

由此推测CDK4/6在细胞周期中的作用机理是_____________。虽然药物Ⅰbrance抑制乳腺癌细胞的生长十分有效，但在后期的临床研究中，发现其也可引起患者中性粒细胞数目显著下降,根据这一结果，推测其可能影响免疫系统的第_________(填“一”、“二”或“三”）道防线。

高三生物综合题困难题查看答案及解析

原癌基因是各种癌症中的关键基因之一，其突变后表达的产物G蛋白作用机理如图甲(图中字母表示物质，数字表示生理过程)。当生长因子与细胞膜表面的酪氨酸激酶受体结合后，G蛋白可形成转录激活剂，引起相关基因过度表达，导致细胞周期启动并过度分裂。图乙是图甲中发生的某种活动。请回答下列问题。

(1)从图甲中信息可知，细胞癌变后，表现出的特征是_______________________________。

(2)图甲中均需要解旋酶的过程是______(填数字)，C由细胞核进入细胞质共穿过___层膜。

(3)乙图相当于甲图中的________(填数字)过程，其中Y与Z在组成上的不同之处是________________________________________________________________________。

(4)③过程有________种RNA参与。

高三生物综合题困难题查看答案及解析

研究表明，HER2/neu是一种原癌基因，它表达的H蛋白在多种癌细胞特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，目前已成为治疗乳腺癌有效的生物制剂。

（1）H蛋白在成年个体的正常组织中表达量________(填低或高)。H蛋白是一种跨膜蛋白，结构如图所示。制备免疫小鼠所需H蛋白(抗原)时，应构建________区基因，转入受体细胞表达并提纯。

（2）为扩增出大量目的基因需用到PCR技术。常规PCR技术一般包括变性、复性、延伸等步骤，复性(55～60 ℃)时__________________________碱基互补配对。设计引物是PCR技术的关键之一，某同学设计的两对引物如下表所示，其中引物对________(填A或B)设计不合理。

（3）制备抗H蛋白单克隆抗体时，需将H蛋白注射到小鼠体内，这样做的目的是使小鼠体内产生_________________________________。

（4）治疗乳腺癌时，可单独使用抗H蛋白单克隆抗体，也可以将__________________________结合制成“生物导弹”，杀死癌细胞。

高三生物综合题中等难度题查看答案及解析

研究表明，HER2/neu是一种原癌基因，它表达的H蛋白在多种癌细胞特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，目前已成为治疗乳腺癌有效的生物制剂。

（1）H蛋白在成年个体的正常组织中表达量________(填低或高)。H蛋白是一种跨膜蛋白，结构如图所示。制备免疫小鼠所需H蛋白(抗原)时，应构建________区基因，转入受体细胞表达并提纯。

（2）为扩增出大量目的基因需用到PCR技术。常规PCR技术一般包括变性、复性、延伸等步骤，复性(55～60 ℃)时__________________________碱基互补配对。设计引物是PCR技术的关键之一，某同学设计的两对引物如下表所示，其中引物对________(填A或B)设计不合理。

（3）制备抗H蛋白单克隆抗体时，需将H蛋白注射到小鼠体内，这样做的目的是使小鼠体内产生_________________________________。

（4）治疗乳腺癌时，可单独使用抗H蛋白单克隆抗体，也可以将__________________________结合制成“生物导弹”，杀死癌细胞。

高三生物综合题中等难度题查看答案及解析

（10分）研究表明，HER2/neu是一种原癌基因，它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，目前已成为有效的生物治疗手段。

（1）选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点，是因为H蛋白在成年个体的正常组织中___________（填“低表达”或“高表达”）。H蛋白是一个跨膜蛋白，结构如图12所示。制备免疫小鼠用的H蛋白（抗原）时，应构建___________区基因，转入原核细胞表达并提纯。

（2）将H蛋白注射到小鼠体内，取该小鼠的脾脏细胞与___________细胞进行融合，使用的化学诱导剂是______________，细胞融合的原理是_________________。

（3）将融合细胞在__________培养基中培养，一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞生长。将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养，应用____________技术进行抗体阳性检测。经多次筛选，就能得到产生单克隆抗体的杂交瘤细胞。

（4）将筛选得到的杂交瘤细胞，经过_______________或小鼠腹腔内培养，获取大量的单克隆抗体。

（5）治疗乳腺癌时，可单独使用抗H蛋白单克隆抗体，也可将该单克隆抗体与抗癌药物结合构建“生物导弹”，杀死癌细胞。这充分体现了单克隆抗体______________的特点。

高三生物综合题中等难度题查看答案及解析

研究表明，HER2/neu是一种原癌基因，它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，目前已成为有效的生物治疗手段。

(1)H蛋白在成年个体的正常组织中表达量____(填“低”或“高”)。H蛋白是一个跨膜蛋白，结构如图所示。制备免疫小鼠用的H蛋白(抗原)时，应构建_______区基因，转入受体细胞表达并提纯。

(2)为扩增出大量目的基因需用到PCR技术。常规PCR技术一般包括变性、退火、延伸等步骤，退火(55~60℃)时_________________碱基互补配对。设计引物是PCR技术的关键之一，某同学设计的两组引物如下表所示，其中引物对______(填“A”或“B”)设计不合理。

(3)制备抗H蛋白单克隆抗体时，需将H蛋白注射到小鼠体内，这样做的目的是使小鼠体内产生_________。

(4)治疗乳腺癌时，可单独使用抗H蛋白单克隆抗体，也可以将______结合制成“生物导弹”，杀死癌细胞。

高三生物非选择题困难题查看答案及解析

研究表明，HER2/neu是一种原癌基因，它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，目前已成为有效的生物治疗手段。

（1）原癌基因的作用是____________________。

（2）H蛋白是一个跨膜蛋白，结构如图所示。制备免疫小鼠用的H蛋白（抗原）时，应构建胞外区基因，转入原核细胞表达并提纯。选择胞外区的原因是_________________。为了扩增出大量胞外区需要用到PCR技术。常规PCR技术一般包括变性、退火、延伸等步骤，退火的目的是________________________。设计引物是PCR技术的关键步骤之一，某同学设计的两组引物如下表所示。_________（填“引物对A”或“引物对B”）设计不合理，并说出不合理的理由：______________________________________。

（3）制备抗H蛋白单克隆抗体时，需将H蛋白注射到小鼠体内。这样做的目的是_____________________________。制备抗H蛋白单克隆抗体时，需要用到细胞融合技术，该技术的主要优点是_____________________________________。

（4）治疗乳腺癌时，方法之一是单独使用抗H蛋白单克隆抗体，试写出治疗乳腺癌的另一种疗效高、毒副作用小的、不损伤正常细胞的方法：________________。

高三生物综合题中等难度题查看答案及解析

研究表明，HER2/neu是一种原癌基因，它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，目前已成为有效的生物治疗手段。

（1）选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点，是因为H蛋白在成年个体的正常组织中_________（填“低表达”或“高表达”）。H蛋白是一个跨膜蛋白，结构如图所示。制备免疫小鼠用的H蛋白（抗原）时，应构建_________区基因，转入原核细胞表达并提纯。

（2）将H蛋白注射到小鼠体内，取该小鼠的脾脏细胞与_________细胞进行融合，使用的化学诱导剂是_________，细胞融合的原理是_________。

（3）将融合细胞在_________培养基中培养，一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞生长。将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养，应用_________技术进行抗体阳性检测。经多次筛选，就能得到产生单克隆抗体的杂交瘤细胞。

（4）将筛选得到的杂交瘤细胞，经过_________或小鼠腹腔内培养，获取大量的单克隆抗体。

（5）治疗乳腺癌时，可单独使用抗H蛋白单克隆抗体，也可将该单克隆抗体与抗癌药物 结合构建“生物导弹”，杀死癌细胞。这充分体现了单克隆抗体_________的特点。

高三生物非选择题中等难度题查看答案及解析

神经纤毛蛋白-1（NRP-1）是血管内皮生长因子的新型受体，经实验证明，与正常组织细胞相比，NRP-1在乳腺癌（MCF7）细胞中高表达，通过参与多种信号转导来促进肿瘤血管的生成，进而促进肿瘤体积的增长。本研究将为 NRP-1 单克隆抗体靶向治疗乳腺癌提供数据基础。

（1）取乳腺癌（MCF7）组织块，运用____________________技术获得 MCF7 细胞用于后续实验。用人的_____________________蛋白对小鼠进行注射，使小鼠产生免疫反应，制备杂交瘤细胞，将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养，吸取培养孔中的________________（填上清液或沉淀细胞），应用_________________技术进行抗体阳性检测。经多次筛选和细胞培养，获得 NRP-1 单克隆抗体（NRP-1 MAb）。

（2）将 MCF7 细胞制成单细胞悬液，等量注入 4 组裸鼠（即无胸腺裸鼠）右前腋下，接种后 3 天开始给药NRP-1 单克隆抗体（NRP-1 MAb），共给药 7 次，对照组注射等量的生理盐水。每隔 5 天测算一次肿瘤的体积，如下图所示：

从上图中可以看出_________________________

（3）结合题干信息，综合以上研究请你推测 NRP-1 MAb 抑制肿瘤的作用机理是_____________________。

（4）注射不同剂量 NRP-1 MAb 33 天后，剥离肿瘤组织称重，实验结果如下图：

从该结果中可以看出___________________________。综合比较（3）和（5）的实验结果，可见中高剂量和低剂量的 NRP-1 MAb 在降低肿瘤体积和降低肿瘤重量上出现了不一致性。通过实验研究，有助于指导实践中科学用药。

高三生物综合题困难题查看答案及解析