科研人员将绿色荧光蛋白基因转入小鼠受精卵中，可直接观察小鼠的胚胎发育进程。根据有关过程回答下列问题：
（1）从基因工程的角度判断，绿色荧光蛋白基因属于__________基因，在基因工程中，能被RNA聚合酶识别和结合，并能驱动转录的DNA片段称为____________。
（2）给供体雌鼠注射一定量的促性腺激素促使其____________。雌鼠受精后可以得到大量含雌雄原核的卵细胞。
（3）通常采用显微注射技术将绿色荧光蛋白基因导入受精后的卵细胞中，下图为注射前的卵细胞，注射时应将含目的基因的DNA注入卵细胞的____________部分。
（4）培养受精卵的培养液中需添加的天然成分是_________________，培养环境需保持一定浓度C02的目的是___________________________。
（5）将培养好的胚胎移植到经____________处理的受体雌鼠体内，观察发育中的胚胎，发现部分胚胎没有绿色荧光，原因可能是_________________。
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科研人员将绿色荧光蛋白基因转入小鼠受精卵中，可直接观察小鼠的胚胎发育进程。根据有关过程回答下列问题：
（1）从基因工程的角度判断，绿色荧光蛋白基因属于__________基因，在基因工程中，能被RNA聚合酶识别和结合，并能驱动转录的DNA片段称为____________。
（2）给供体雌鼠注射一定量的促性腺激素促使其____________。雌鼠受精后可以得到大量含雌雄原核的卵细胞。
（3）通常采用显微注射技术将绿色荧光蛋白基因导入受精后的卵细胞中，下图为注射前的卵细胞，注射时应将含目的基因的DNA注入卵细胞的____________部分。
（4）培养受精卵的培养液中需添加的天然成分是_________________，培养环境需保持一定浓度C02的目的是___________________________。
（5）将培养好的胚胎移植到经____________处理的受体雌鼠体内，观察发育中的胚胎，发现部分胚胎没有绿色荧光，原因可能是_________________。
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（15 分） 科研人员将绿色荧光蛋白（GTP）基因导入金鱼的受精卵中进行有关研究，请回答：
（1）上述过程中的 GTP 基因称为 , 该基因可由 mRNA 形成。
（2）已知 GTP 基因的 DNA 两端分别有 EcoR I、Sma I切割位点，切割下来的 GTP 基因含有 末端和 末端。
（3）质粒用 EcoR I、Sma I 切割之后，需用 将 GTP 基因与其连接形成重组质粒。
（4）GTP 基因重组质粒导入受精卵通常用 法，受精卵经过卵裂、桑椹胚、 、原肠胚等阶段发育为胚 胎。紫外光下观 察，可以看到转基因鱼发光部位存在差 异，其原因是 。
（5）构建重组质粒时，可用 GTP 代替抗氨苄青霉素基因作为 。
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科学家将绿色荧光蛋白(GFP)基因转入小鼠胚胎干细胞(ES)内，GFP基因表达就会使细胞带有绿色荧光的，继而利用带有绿色荧光的ES细胞培育出嵌合型的小鼠用于科学研究，流程如下图。请回答：
（1）在步骤①中，若绿色荧光蛋白(GFP)基因是cDNA片段，则在GFP基因的上游必须加入_____________，该核苷酸序列是_____________酶识别和结合的部位。
（2）步骤②的受体细胞是小鼠ES细胞，ES细胞一般从囊胚的_______________分离得到。在培养ES细胞时，细胞充满培养皿底部后停止分裂，这种现象称为_______________。
（3）为获取更多卵母细胞，首先要对供体母鼠注射促性腺激素，使其____________，然后可用人工方法从小鼠输卵管内获得，该过程称为__________________。
（4）图中重组囊胚在步骤⑤之前要先检测是否有_______________，再通过_________________技术移入代孕母鼠子宫内继续发育。
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科学家将绿色荧光蛋白(GFP)基因转入小鼠胚胎干细胞(ES)内，GFP基因若表达就会使细胞带有绿色荧光，继而利用带有绿色荧光的ES细胞培育出嵌合型的小鼠用于科学研究，流程如图所示。请回答：
（1）在步骤①中构建基因表达载体时，需要在GFP基因的首端加入_________，有了它才能驱动GFP基因转录出mRNA，最终获得GFP。
（2）步骤②的受体细胞是小鼠ES细胞，ES细胞一般从囊胚的_________中分离得到。对其进行的初次培养称为__________，在培养ES细胞时，细胞充满培养皿底部后停止分裂，这种现象称为___________。
（3）图中重组囊胚在步骤⑤之前要先检测是否有____________，再通过___________技术移入代孕母鼠子宫内继续发育。
（4）该小鼠诞生过程中涉及到的现代生物技术主要有:______________________。(至少答出3项）
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科研人员将某种荧光蛋白(GFP)基因导入金鱼的受精卵中来进行有关研究，请回答：
（1）以上过程的GFP基因称为______基因，该基因可由mRNA________形成。
（2）已知含GFP基因的DNA两端分别有EcoRI 与 SmaI切割位点，切割下来的GFP基因含有____末端和______末端。
（3）质粒用EcoRI、SmaI切割之后，需用___________酶将GFP基因与其连接形成重组质粒。
（4）构建重组质粒时，可用GFP基因代替抗氨苄青霉素基因作为_____________。
（5）GFP基因重组质粒导入受精卵通常用__________法，受精卵经过卵裂、桑堪胚、______、原肠胚等阶段发育为胚胎。紫外光下观察，可以看到转基因鱼发出荧光的部位存在差异，其原因是_________________________。
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下图是转基因小鼠的培育过程示意图，
是绿色荧光蛋白基因，请分析回答:
（1）过程①需要用到 酶。过程②将目的基因导人胚胎干细胞常用的方法是 。培养胚胎干细胞的培养液中除加人各种营养物质外，通常还需加入 。
（2）表达载体包含绿色荧光蛋白基因、 、 、终止子和复制原点等。
（3）自然状况下胚胎干细胞是由动物的早期胚胎或 中分离出来的一类细胞胚胎干细胞在形态上表现为体积小，细胞核大，细胞核仁明显;在功能上具有 性。
（4）图中载体上的
基因是B抗生素抗性基因，图中步骤③所用的G418是B抗生素（对细胞有毒害作用），培养液添加G418的目的是 。
（5）图中步骤⑤要将细胞注射入囊胚的 位置;步骤⑥胚胎移植前要对代孕母鼠用激素处理，目的是 。
（6）检测目的基因是否翻译成蛋白质，可从小鼠c体内提取蛋白质，用 杂交的方法加以检测。
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Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗，其技术流程如图（图中数字序号表示的是相关过程）。请回答下列有关问题：
（1）过程②利用的技术是______________，过程③中涉及到了基因工程技术，其中作为受体细胞的是____________。
（2）过程③中获取的目的基因是_______________，可以根据该基因的___________________设计引物，利用PCR技术扩增目的基因片段。按此方法和图示技术流程，完成基Rag2基因缺失小鼠的基因治疗涉及的酶有____________和耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)等。
（3）图中造血干细胞中的遗传物质至少有___________个来源。为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质，用____________进行杂交实验。图中所述克隆技术属于___________克隆。
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Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗，其技术流程如图（图中数字序号表示的是相关过程）。请回答下列有关问题：
(1)过程①利用的技术是_______________,过程②利用的技术是_______________,过程③中涉及到了基因工程技术，其中作为受体细胞的是_______________。
(2)过程③中获取的目的基因是_______________，可以根据该基因的____________设计引物，利用PCR技术扩增目的基因片段。按此方法和图示技术流程，完成 Rag2基因缺失小鼠的基因治疗涉及的酶有___________________________和耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)等。
(3)图中造血干细胞中的遗传物质至少有 __________个来源。为检测 Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质,用_________________进行杂交实验。
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科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。其主要技术流程如图，请回答下列问题：
（1）在获取上皮细胞悬浮液的时候，通常要用胰蛋白酶而不用胃蛋白酶处理组织，原因是___________________________________________________________________。
（2）步骤①应先对卵母细胞进行______处理。由图可知，步骤②要分离出ES细胞，需将重组胚胎培养到_____________期。
（3）步骤③选择ES细胞作为受体细胞而不是上皮细胞，是因为ES细胞___________。该过程需要先利用_______技术扩增干扰素基因，其前提是要有一段已知干扰素基因的核苷酸序列以便合成_____________。
（4）步骤④将ES细胞诱导分化成造血干细胞而不是其他细胞，其原因是_______________。
（5）为检测干扰素基因是否在小鼠体内成功表达，可以采用抗原——抗体杂交技术，其原理是____________________________________________。
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（10分）科学家从129品系小鼠中成功分离出胚胎干细胞，并注入小鼠的囊胚，形成嵌合体囊胚，育出嵌合体小鼠。利用该技术，可获得表达绿色荧光蛋白（ GFP）转基因昆明（KM）小鼠，操作流程图如下，请回答：
（1）在基因工程的操作中，携带GFP基因 的病毒作为 。
（2）步骤②中，利用荧光显微镜观察到细胞 ，将其取出，进行扩增培养。
（3）步骤③中，胚胎的收集方法称为 。
（4）步骤⑤中，胚胎干细胞可以 形成包括生殖腺在内的各种组织。
（5）图中X小鼠为 小鼠。
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