下表为几种限制性核酸内切酶识别的序列和切割的位点。如图,已知某DNA在目的基因的两端1、2、3、4四处有BamHⅠ或EcoRⅠ或PstⅠ的酶切位点。现用PstⅠ和EcoRⅠ两种酶同时切割该DNA片段(假设所用的酶均可将识别位点完全切开),下列各种酶切位点情况中,可以防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状的是( )
A.1 为EcoRⅠ,2为BamHⅠ,3为EcoRⅠ,4为PstⅠ
B.1 为BamHⅠ,2为EcoRⅠ,3为EcoRⅠ,4为PstⅠ
C.1 为EcoRⅠ,2为PstⅠ, 3为PstⅠ,4为BamHⅠ
D.1 为BamHⅠ,2为EcoRⅠ,3为PstⅠ,4为EcoRⅠ
高三生物选择题简单题
下表为几种限制性核酸内切酶识别的序列和切割的位点。如图,已知某DNA在目的基因的两端1、2、3、4四处有BamHⅠ或EcoRⅠ或PstⅠ的酶切位点。现用PstⅠ和EcoRⅠ两种酶同时切割该DNA片段(假设所用的酶均可将识别位点完全切开),下列各种酶切位点情况中,可以防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状的是( )
A.1 为EcoRⅠ,2为BamHⅠ,3为EcoRⅠ,4为PstⅠ
B.1 为BamHⅠ,2为EcoRⅠ,3为EcoRⅠ,4为PstⅠ
C.1 为EcoRⅠ,2为PstⅠ, 3为PstⅠ,4为BamHⅠ
D.1 为BamHⅠ,2为EcoRⅠ,3为PstⅠ,4为EcoRⅠ
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下表为几种限制性核酸内切酶识别的序列和切割的位点。如图,已知某DNA在目的基因的两端1、2、3、4四处有BamHⅠ或EcoRⅠ或PstⅠ的酶切位点。现用PstⅠ和EcoRⅠ两种酶同时切割该DNA片段(假设所用的酶均可将识别位点完全切开),下列各种酶切位点情况中,可以防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状的是( )
A.1 为EcoRⅠ,2为BamHⅠ,3为EcoRⅠ,4为PstⅠ
B.1 为BamHⅠ,2为EcoRⅠ,3为EcoRⅠ,4为PstⅠ
C.1 为EcoRⅠ,2为PstⅠ, 3为PstⅠ,4为BamHⅠ
D.1 为BamHⅠ,2为EcoRⅠ,3为PstⅠ,4为EcoRⅠ
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下表为几种限制性核酸内切酶识别的序列和切割的位点。如图,已知某DNA在目的基因的两端1、2、3、4四处有BamHⅠ或EcoRⅠ或PstⅠ的酶切位点。现用PstⅠ和EcoRⅠ两种酶同时切割该DNA片段(假设所用的酶均可将识别位点完全切开),下列各种酶切位点情况中,可以防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状的是( )
A.1 为EcoRⅠ,2为BamHⅠ,3为EcoRⅠ,4为PstⅠ
B.1 为BamHⅠ,2为EcoRⅠ,3为EcoRⅠ,4为PstⅠ
C.1 为EcoRⅠ,2为PstⅠ, 3为PstⅠ,4为BamHⅠ
D.1 为BamHⅠ,2为EcoRⅠ,3为PstⅠ,4为EcoRⅠ
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下表为几种限制性核酸内切酶识别的序列和切割的位点。如下图,已知某DNA在目的基因的两端1、2、3、4四处有BamHⅠ或EcoRⅠ或PstⅠ的酶切位点。现用BamHⅠ和EcoRⅠ两种酶同时切割该DNA片段(假设所用的酶均可将识别位点完全切开),下列各种酶切位点情况中,可以防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状的是( )
A.1 为BamHⅠ,2为EcoRⅠ,3为BamHⅠ,4为PstⅠ
B.1 为EcoRⅠ,2为BamHⅠ,3为BamHⅠ,4为PstⅠ
C.1 为PstⅠ,2为EcoRⅠ,3为EcoRⅠ,4为BamHⅠ
D.1 为BamHⅠ,2为EcoRⅠ,3为PstⅠ,4为EcoRⅠ
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图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。请回答下列问题:
(1)图1的一条脱氧核苷酸链中,相邻两个脱氧核苷酸之间由 键连接。
(2)若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段,产生的末端是____末端,其产物长度分别为___。
(3)若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换,那么基因D就突变为基因d。从杂合子体细胞内分离出图1所示的DNA片段及其同源片段,用限制酶SmaⅠ完全切割,产物中共有_____种不同DNA片段。
(4)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是_____。在导入重组质粒后,为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌,一般需要用添加_____的培养基进行培养。经检测,部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达,其最可能的原因_________。
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图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。请回答下列问题:
(1)若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段,其产物长度为____________________。
(2)若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换,那么基因D就突变为基因d。从隐性纯合子分离出图1及其对应的DNA片段,用限制酶SmaⅠ完全切割,产物中共有__________种不同DNA片段。为了提高实验成功率,需要通过__________技术扩增目的基因,以获得大量的目的基因。
(3)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是__________。在导入重组质粒后,为了筛选出含质粒的大肠杆菌,一般先用添加__________的培养基进行培养,然后将生长的菌接种到只含__________的培养基中培养,可进一步筛选出含重组质粒的受体细胞。
(4)假设用BamHⅠ切割DNA获取目的基因,用MboⅠ切割质粒,然后形成重组质粒,若将插入在抗生素B抗性基因处的目的基因重新切割下来,能否用BamHⅠ?__________。为什么?____________________。
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下图甲表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图乙表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。
1.DNA分子中磷酸和脱氧核糖之间的化学键叫做磷酸二酯键,下列酶中能作用于磷酸二酯键的是( )
A. DNA解旋酶 B. DNA聚合酶 C. DNA连接酶 D. 限制性内切酶
2.写出BamHⅠ酶切后形成的粘性末端(写出一个)_____________;如果用限制酶SmaⅠ完全切割图甲所示的DNA片段,则产物中DNA片段长度分别为_____________________。
3.在基因工程中通常选择质粒作为目的基因的运载体,原因是__________________;为了将图甲所示的目的基因D导入图乙所示的质粒,应选择的限制酶是__________。
4.成功导入重组质粒的大肠杆菌具有的特点是( )(多选)
A. 能在含有抗生素A的培养基上生长
B. 能在含有抗生素B的培养基上生长
C. 在含有抗生素A的培养基上不能生长
D. 在含有抗生素B的培养基上不能生长
5.为了获得含重组质粒的单个大肠杆菌的菌落,常用的接种方法是________________。
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图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。请回答下列问题:
1.用图1中的外源DNA(含有目的基因D)和图2中的质粒构建重组质粒需要使用限制酶和 。前者(酶)的专一性很强,其作用特点是 。
2.应该使用限制酶BamHⅠ同时处理质粒、外源DNA,而不选择其他3种,原因在于( )。(多选)
A.若使用SmaⅠ或者MspⅠ会破坏目的基因
B.若使用SmaⅠ切割质粒,能成功切开质粒得到粘性末端的可能很低
C.若使用MboⅠ切割质粒,质粒上会有2处被切开,会将质粒切成两段不利于筛选
D.使用限制酶BamHⅠ能保证目的基因和质粒获得相同的粘性末端,以便目的基因和运载体定向连接,不至于反向连接
E.使用BamHⅠ切割质粒,质粒上会有1处被切开,破坏抗生素A抗性基因,保留抗生素B抗性基因,以便于将来筛选含目的基因的受体细胞
F.只有使用BamHⅠ切割,才能保证质粒和目的基因上产生相同的粘性末端。
3.若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换,那么基因D就突变为基因d。从杂合子分离出图1及其对应的DNA片段,用限制酶Sma Ⅰ完全切割,产物中共有 种不同DNA片段。若同时用限制酶MspⅠ、MboⅠ切割图2中的质粒,则可得到 个DNA片段。
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下图一为含有目的基因的DNA(外源DNA),图二为某质粒,表中是几种限制酶识别序列及其切割位点。用图中的外源DNA与质粒构建重组质粒。
限制酶 | BamHⅠ | SmaⅠ | EcoRⅠ | Hind Ⅲ |
识别序列及切割位点 |
请根据上述信息分析回答:
55、外源DNA、质粒分别有_______、_______个游离的磷酸基团。
56、DNA分子的一条多核苷酸链中,两个脱氧核苷酸之间以_________和_________相连。用SmaⅠ限制酶切割外源DNA,切开的是___________和__________之间相连的键。
57、如果用SmaⅠ酶切割外源DNA和质粒来重组质粒,其结果是_____________。
58、如果使用EcoRⅠ酶切割外源DNA和质粒,将目的基因片段与切割后的质粒混合,加入_________酶,获得的环状DNA可能有哪几种情况?______________。
59、如果使用BamHⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理外源DNA和质粒,比用EcoRⅠ酶切割的优点是_____________________。
60、将重组质粒导入大肠杆菌中,培养基中需加入___________进行鉴别和筛选含有___________的细胞。
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下图为限制酶BamHⅠ和BglⅡ的识别序列及切割位点,实验中用BamHⅠ切割DNA获得目的基因,用BglⅡ切割质粒,并将它们拼接得到重组质粒。下列相关叙述正确的是
A. 在酶切过程中,要控制好酶的浓度、温度和反应速率等因素
B. 经两种酶处理得到的重组质粒不能再被这两种酶所识别
C. 目的基因经BglⅡ切割后形成的黏性末端是-CTACG
D. 分别用两种限制酶切割,保证了目的基因定向的插入质粒
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