马奶酒是马奶经乳酸菌、酵母菌共同发酵后的制品，为研究乳酸菌与酵母菌共同发酵时菌体生长的状况...

马奶酒是马奶经乳酸菌、酵母菌共同发酵后的制品，为研究乳酸菌与酵母菌共同发酵时菌体生长的状况，更广泛的挖掘益生菌的实际应用价值，研究人员从马奶酒中分离得到两种优良菌株，以脱脂马奶为培养液设计了4组实验

注：此处摇床培养目的是增加O2量

每4h测定活菌数目，并按活菌数目的对数绘制成生长曲线，下图是酵母菌在不同培养条件下的生长曲线，
请回答：

（1）A组中乳酸菌的呼吸方式为___________，B组酵母菌产生CO2的主要场所是__________。

（2）C组双菌培养中，0～8h酵母菌生长速率明显小于酵母菌单菌培养，原因是_________________都不是其生长的最适条件；培养至36h时达到最大值且大于单菌培养，原因是_____________(填“乳酸菌”或“酵母菌”)优先生长，将马奶中的乳糖分解成_________，这些易于吸收的单糖为_______________(填“乳酸菌”或“酵母菌”)提供了碳源，并提供了一个适宜的PH值。

（3）表中D组的培养条件应该设置为__________________________________。

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酸马奶酒是一种以鲜马奶为原料，经乳酸菌和酵母菌共同自然发酵而成的一种古老的乳酸，酒精发酵乳饮料，深受我国内蒙和新疆地区多个少数民族同胞的喜爱。为了优选菌种，提高品质，某科研机构开展了以下研究：

（1）分离菌种：选取多种马奶酒样本，使用____________法进行菌株分离，培养后在合格平板上会形成________菌落；使用__________挑取上述平板中不同菌种进行纯培养，在本步骤中区分不同菌种的依据是_____________。

（2）筛选菌种：将上述过程中获得的多个菌种分别进行发酵实验。利用_________与酒精产生显色反应的原理，选择发酵能力较强的酵母菌菌种J；检测发酵液的pH值，选择发酵能力较强的乳酸菌菌种W。

（3）要获得更好的发酵效果，还要检测菌种之间的关系，现将W的滤菌发酵液加入J的培养平板上的一侧（另一侧不添加），30℃下，48小时后得到结果如图一所示：将不同浓度的J的发酵液添加到含W的乳酸菌培养基上，在38℃下，每隔2小时检测pH值，得到曲线如图二所示。

从实验结果分析，W的滤菌发酵液对J的生长有__________作用；J的发酵液对W的生长有促进作用，且浓度越高其作用越________。实验说明，在酵母菌和乳酸菌的________作用下，鲜马奶转变成风味独特的酸马奶酒。

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酸马奶酒是一种以鲜马奶为原料，经乳酸菌和酵母菌共同自然发酵而成的一种古老的乳酸，酒精发酵乳饮料，深受我国内蒙和新疆地区多个少数民族同胞的喜爱。为了优选菌种，提高品质，某科研机构开展了以下研究：

（1）分离菌种：选取多种马奶酒样本，使用____________法进行菌株分离，培养后在合格平板上会形成________菌落；使用__________挑取上述平板中不同菌种进行纯培养，在本步骤中区分不同菌种的依据是_____________。

（2）筛选菌种：将上述过程中获得的多个菌种分别进行发酵实验。利用_________与酒精产生显色反应的原理，选择发酵能力较强的酵母菌菌种J；检测发酵液的pH值，选择发酵能力较强的乳酸菌菌种W。

（3）要获得更好的发酵效果，还要检测菌种之间的关系，现将W的滤菌发酵液加入J的培养平板上的一侧（另一侧不添加），30℃下，48小时后得到结果如图一所示：将不同浓度的J的发酵液添加到含W的乳酸菌培养基上，在38℃下，每隔2小时检测pH值，得到曲线如图二所示。

从实验结果分析，W的滤菌发酵液对J的生长有__________作用；J的发酵液对W的生长有促进作用，且浓度越高其作用越________。实验说明，在酵母菌和乳酸菌的________作用下，鲜马奶转变成风味独特的酸马奶酒。

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酸奶是牛奶、羊奶或马奶经过发酵制成的一种食品，其发酵原理与泡菜制作非常相似。为了研究影响酸奶发酵效果的因素，某小组在A、B两容器中加入一定量的鲜牛奶，将等量的甲、乙两菌种（都能产生乳酸）分别接入其中并混匀，密封后再将两者置于适宜条件下进行发酵，并在6 h内定期取样观测发酵效果。回答下列问题：

（1）制作酸奶和泡菜与制作果酒相比，相同点是________________。上述实验过程中可能会影响酸奶品质的操作是____________________________，为什么？___________________________________________________________________。

（2）在家庭制作葡萄酒时，容器瓶的盖子选下列哪种？_________（填“有螺旋可旋转的”“密封不可开启的”），为什么？_______________。

（3）在制作酸奶时，人们还会在鲜奶中加一定量的蔗糖，其原理是___________________________________________________。发现6h内的酸奶发酵效果越来越好，无法确定发酵的最佳时间。若要确定最佳发酵时间，可以_________________________________。有人提供的自制酸奶信息表明：酸奶制作时间可长可短，有的季节2～3小时即可，有的季节需要10～12小时。影响发酵效果的非生物因素可能是_______________________。

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乳酸菌常用于制作酸奶等发酵食品。研究发现，乳酸菌还可产生乳酸菌素，抑制肉制品中致病菌和腐败菌的生长,起到生物防腐的作用。请回答下列问题：

（1）制作酸奶是利用乳酸菌在　　　　　　 （选填“有氧”或“无氧”）条件下，将牛奶中葡萄糖、乳糖分解成乳酸，同时将奶酪蛋白水解为短肽和　　　　　　　 ，不仅易被人体吸收，也适用于乳糖不耐症人群。若牛奶中含有抗生素，会影响酸奶的制作效果，原因是　　　　　　　　　　 。

（2）纯化乳酸菌时可选用平板划线法或　　　　　　　　 接种，还需要设置未接种乳酸菌的培养基作为对照，若对照组培养基表面没有菌落生长，说明　　　　　　　　　　　 。

（3）为探究不同种乳酸菌的抑菌效果，将稀释倍数相同的等量乳酸菌培养液滴加在长满致病菌的平板上，一段时间后，会出现以滴点为中心的抑菌圈，实验结果如下表。

三种乳酸菌对各致病菌的抑菌圈直径（mm）

①实验的因变量是　　　　　　　　　　 。

②由实验结果可知，乳酸菌对　　　　　　　　　 （填致病菌的名称）的抑菌效果最为突出；在生产应用中，不宜采用　　　　　　　　　 号菌株进行防腐。

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乳酸菌常用于制作酸奶等发酵食品。研究发现，乳酸菌还可产生乳酸菌素，抑制肉制品中致病菌和腐败菌的生长,起到生物防腐的作用。请回答下列问题：

（1）制作酸奶是利用乳酸菌在　　　　　　 （选填“有氧”或“无氧”）条件下，将牛奶中葡萄糖、乳糖分解成乳酸，同时将奶酪蛋白水解为短肽和　　　　　　　 ，不仅易被人体吸收，也适用于乳糖不耐症人群。若牛奶中含有抗生素，会影响酸奶的制作效果，原因是　　　　　　　　　　 。

（2）纯化乳酸菌时可选用平板划线法或　　　　　　　　 接种，还需要设置未接种乳酸菌的培养基作为对照，若对照组培养基表面没有菌落生长，说明　　　　　　　　　　　 。

（3）为探究不同种乳酸菌的抑菌效果，将稀释倍数相同的等量乳酸菌培养液滴加在长满致病菌的平板上，一段时间后，会出现以滴点为中心的抑菌圈，实验结果如下表。

三种乳酸菌对各致病菌的抑菌圈直径（mm）

①实验的因变量是　　　　　　　　　　 。

②由实验结果可知，乳酸菌对　　　　　　　　　 （填致病菌的名称）的抑菌效果最为突出；在生产应用中，不宜采用　　　　　　　　　 号菌株进行防腐。

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乳酸菌常用于制作酸奶等发酵食品。研究发现，乳酸菌还可产生乳酸菌素，抑制肉制品中致病菌和腐败菌的生长，起到生物防腐的作用。请回答

（1）制作酸奶是利用乳酸菌在　　 （填“有氧”或“无氧”）条件下，将牛奶中葡萄糖、乳糖分解成乳酸，同时将奶酪蛋白水解为短肽和　　 ，不仅易被人体吸收，也适用于乳糖不耐症人群。若牛奶中含有抗生素，会影响酸奶的制作效果，原因是 　　　　　　　　　　　　　　 。

（2）纯化乳酸菌时可选用平板划线法或　　　　　　 接种，还需要设置未接种乳酸菌的培养基作为对照，若对照组培养基表面没有菌落生长，说明　　 　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（3）为探究不同种乳酸菌的抑菌效果，将稀释倍数相同的等量乳酸菌培养液滴加在长满致病菌的平板上，一段时间后，会出现以滴点为中心的抑菌圈，实验结果如下表。

① 实验的自变量是 　　　　　　　　　　　　 。

②由实验结果可知，乳酸菌对________（填致病菌）的抑菌效果比较突出；在生产应用中，不宜采用　 　　 号菌株进行防腐。

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（生物——选修1:生物技术实践）酵母菌是一种单细胞的兼性厌氧真菌，被广泛应用于生产、生活实际中。下面是有关酵母菌的一些问题，请分析回答：

（1）为了进行果酒的发酵生产，通常先分离纯化酵母菌，然后扩大培养、固定化酵母细胞，最后才接种、发酵。

①在分离纯化酵母菌时，需要进行无菌操作，其中对培养皿通常采用_______灭菌。

②在扩大培养时，使用_______(“固体或液体”）培养基培养过程中，并要不断进行振动或者搅拌，目的是______________________。

③固定化酵母细胞常采用_______法，若要使这些酵母反复利用，实验过程中一定要注意________。

④用果汁发酵后检测是否有酒精产生，可以在酸性条件下用________检验，如果出现灰绿色，说明产生了酒精。

（2）在家庭酿制米酒的过程中，需要在混匀酒药的米饭中间挖一个洞，目的是增加______含量，以利于酵母菌繁殖。

（3）经过筛选获得产胡萝卜素的酵母菌R生产胡萝卜素，其大致过程是：培养酵母菌R，进行菌体裂解、离心、沉淀，用________法提取、过滤、浓缩，最后用________法鉴定胡萝卜素。在鉴定过程中，需要用胡萝卜素标准品作为_____________。

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酵母菌是发酵工程常用的微生物，在日常生活中也有广泛应用。某兴趣小组为了研究酵母菌种群数量的变化规律，进行了相关研究实验，图1为实验流程，图2为根据实验测得数据绘制的曲线图。请据图回答：

(1)摇床又称为自动振荡器，培养时需将锥形瓶置于摇床上进行震荡的目的是______________

(2)若本实验使用的是如下规格的血球计数板，左下是一块血球计数板正面示意图，右下为计数板规格图，该血球计数板上有________个计数室，在计数时一般采用_____________法进行取样计数。若制备装片时，将清洁干燥的血球计数板先在计数室上滴一滴酵母菌液，静置5 min再盖上盖玻片，测量的结果会_____________。

(3)显微观察时在调焦清楚后，若发现只能看到血球计数板的横线而看不到竖线，此时应____

(4)显微计数时发现所选取的样方中方格内酵母菌总数为零，可能的原因有(多选)（______）

A. 样液中酵母菌数量过少

B. 样液稀释的倍数过大

C. 样液取自于未摇匀的上清液

D. 实验过程中部分酵母菌死亡

(5)分析图2实验数据得知，在0～7 d之间酵母菌的数量呈________增长：超过7d之后，由于_________________________________________________原因，酵母菌种群数量呈下降趋势。

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阅读下面的材料，完成（1）～（5）题。

芽殖酵母和裂殖酵母被广泛地应用于细胞周期研究中，这些单细胞生物能够表现出细胞周期的所有基本步骤。在实验室条件下，它们生长迅速，完成一个分裂周期只需1～4h。在分裂过程中酵母的核被膜并不解体，与细胞核分裂直接相关的纺锤体位于细胞核内（见图1）。

　　　　　　　　　　　 A　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 B

图1芽殖酵母（A）和裂殖酵母（B）的繁殖周期

顾名思义，芽殖酵母是通过“出芽”进行繁殖的。一个“芽”经过生长及有丝分裂后从已存在的“母”细胞上脱落下来，从而形成新的子细胞。因此，芽的大小就成为细胞处于细胞周期某一阶段的指标。裂殖酵母细胞是圆柱状的，靠顶端延长进行生长，并通过一个中间隔膜的形成来完成细胞分裂。野生型裂殖酵母种群中的细胞在分裂时长度相当稳定。因此，裂殖酵母的细胞长度是细胞所处细胞周期阶段的很好指标。

Hartwell和同事筛选到细胞周期相关基因（cdc）的温度敏感型突变体。野生型芽殖酵母在25℃和37℃下都可以正常分裂繁殖，细胞群体中每个细胞芽体的有无及大小与其所处细胞周期的阶段相关。温度敏感型突变体在25℃可以正常分裂繁殖，在37℃则失去正常分裂繁殖的能力，一段时间后，它们会以芽大小相同的形态死亡（图2）。

图2芽殖酵母的野生型和突变体在不同筛选温度下的表现型

其他研究人员在裂殖酵母中发现的cdc2温度敏感型突变体，在37℃时的表型如图3。

图3裂殖酵母野生型（A）和cdc2突变体（B）在37℃下的细胞长度

酵母在遗传上的突出特点为细胞周期进程中关键调控因子的鉴定奠定了基础，也为研究细胞周期的调控机理提供了丰富信息。细胞周期调控的分子机制在进化过程中非常保守，在酵母中鉴别出的调控因子，一般可以在其他高等真核生物中找到其同源蛋白（氨基酸序列相似性较高）。

请回答问题：

（1）细胞周期是指___________。

（2）由图2可知，在37℃下芽殖酵母突变体的变异性状是_____________。

（3）请解释图3所示2种裂殖酵母细胞长度不同的原因__________。

（4）要找出芽殖酵母芽体的大小与细胞所处细胞周期阶段的对应关系，应采取的具体做法是_________。

（5）根据本题信息，请推测Hartwell是如何通过实验操作获得该温度敏感型突变体的______?

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