[生物——选修3:现代生物科技专题]
编码蛋白甲的DNA序列(序列甲)由A、B、C、D、E五个片段组成,编码蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段组成,如图1所示。
回答下列问题:
(1)现要通过基因工程的方法获得蛋白乙,若在启动子的下游直接接上编码蛋白乙的DNA序列
(TTCGCTTCT……CAGGAAGGA),则所构建的表达载体转入宿主细胞后不能翻译出蛋白乙,原因是_____________________________________。
(2)某同学在用PCR技术获取DNA片段B或D的过程中,在PCR反应体系中加入了DNA聚合酶、引物等,还加入了序列甲作为_____________________,加入了________________作为合成DNA的原料。
(3)现通过基因工程方法获得了甲、乙、丙三种蛋白,要鉴定这三种蛋白是否具有刺激T淋巴细胞增殖的作用,某同学做了如下实验:将一定量的含T淋巴细胞的培养液平均分成四组,其中三组分别加入等量的蛋白甲、乙、丙,另一组作为对照,培养并定期检测T淋巴细胞浓度,结果如图2。
①由图2 可知,当细胞浓度达到a时,添加蛋白乙的培养液中T淋巴细胞浓度不再增加,此时若要使T淋巴细胞继续增殖,可采用的方法是__________________。细胞培养过程中,培养箱中通常要维持一定的CO2浓度,CO2的作用是__________________。
②仅根据图、图2可知,上述甲、乙、丙三种蛋白中,若缺少______________(填“A”“B”“C”“D”或“E”)片段所编码的肽段,则会降低其刺激T淋巴细胞增殖的效果。
高三生物综合题中等难度题
[生物——选修3:现代生物科技专题]
编码蛋白甲的DNA序列(序列甲)由A、B、C、D、E五个片段组成,编码蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段组成,如图1所示。
回答下列问题:
(1)现要通过基因工程的方法获得蛋白乙,若在启动子的下游直接接上编码蛋白乙的DNA序列
(TTCGCTTCT……CAGGAAGGA),则所构建的表达载体转入宿主细胞后不能翻译出蛋白乙,原因是_____________________________________。
(2)某同学在用PCR技术获取DNA片段B或D的过程中,在PCR反应体系中加入了DNA聚合酶、引物等,还加入了序列甲作为_____________________,加入了________________作为合成DNA的原料。
(3)现通过基因工程方法获得了甲、乙、丙三种蛋白,要鉴定这三种蛋白是否具有刺激T淋巴细胞增殖的作用,某同学做了如下实验:将一定量的含T淋巴细胞的培养液平均分成四组,其中三组分别加入等量的蛋白甲、乙、丙,另一组作为对照,培养并定期检测T淋巴细胞浓度,结果如图2。
①由图2 可知,当细胞浓度达到a时,添加蛋白乙的培养液中T淋巴细胞浓度不再增加,此时若要使T淋巴细胞继续增殖,可采用的方法是__________________。细胞培养过程中,培养箱中通常要维持一定的CO2浓度,CO2的作用是__________________。
②仅根据图、图2可知,上述甲、乙、丙三种蛋白中,若缺少______________(填“A”“B”“C”“D”或“E”)片段所编码的肽段,则会降低其刺激T淋巴细胞增殖的效果。
高三生物综合题中等难度题查看答案及解析
【生物——选修3:现代生物科技专题】
上图表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图右表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspI、BamHI、MboI、SmaI 4种限制性核酸内切酶,它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、 CCC↓GGG。
(1)图左DNA分子中的一条脱氧核苷酸链中相邻两个脱氧核苷酸之间由_______(化学键)连接。
(2)若用限制酶SmaI完全切割图中含有目的基因D的DNA片段,其产物长度分为__________________。
(3)为了提高试验成功率,需要通过________技术扩增目的基因,以获得目的基因的大量拷贝。在目的基因进行扩增时,加入的引物有A、B两种,引物的作用是_______________。若该目的基因扩增n代,则其中含有A、B引物的DNA分子有_______个。
(4)若将图右中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是_________。经检测,部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达,其最可能的原因是______________。
(5)导入目的基因的植物细胞,经过植物组织培养技术得到幼苗,该技术利用的原理是_______________。
高三生物综合题困难题查看答案及解析
[生物一选修3:现代生物科技专题]下图是绿色荧光蛋白转基因克隆猪的具体培育过程,请据图回答下列问题。
(1)A过程需要用限制酶切割水母细胞的DNA,不同的限制酶切割后产生的DNA片段末端通常有两种形式:
____________和____________。
(2)C过程需要利用动物细胞培养技术以获得大量的成纤维细胞,其培养过程可经过原代培养和传代培养,但是目前冷冻保存的正常细胞通常在10代以内,这是为了______________________。
(3)过程F的技术名称是____________________________________。
(4)E过程可从屠宰场已屠宰母畜的卵巢采集____________,并在体外培养到____________期。
(5)H过程需要进行胚胎移植,方法有____________和____________两种。
高三生物综合题中等难度题查看答案及解析
【生物—选修3:现代生物科技专题】下图1为某种常用质粒的序列图,Lac Z基因编码的酶能使无色的X—gal变为蓝色,Amp为氨苄青霉素,抗性基因。图2为目的基因的序列及其相关限制酶的识别序列。请回答下列问题:
(1)若要筛选成功导入目的基因的重组质粒,培养基中应加入的物质有_________________和_________________,构建重组质粒时需要的工具酶有_________________,对获取的目的基因可用_________________技术对其扩增。
(2)实验小组用BamH I和Blg II两种限制酶切割目的基因和质粒,构建重组质粒后导入大肠杆菌中,在筛选重组质粒的培养基上,若大肠杆菌菌落显蓝色,说明导入了____________________。没有导入任何外源DNA的大肠杆菌________________(填“能”或“不能”)在该培养基上生存。
(3)将若干个质粒和目的基因用BamH I和Blg II两种限制酶切割后,用DNA连接酶相连,然后再用BamH I和EcoR I切割成功连接后的产物,获得了长度为0.7kb、2.8kb、1kb和2.5kb四种长度的DNA片段,则目的基因的长度为____________kb(已知目的基因的长度大于1kb,1kb=1000个碱基对)。
高三生物非选择题困难题查看答案及解析
【生物—选修3:现代生物科技专题】下图1为某种常用质粒的序列图,Lac Z基因编码的酶能使无色的X—gal变为蓝色,Amp为氨苄青霉素,抗性基因。图2为目的基因的序列及其相关限制酶的识别序列。请回答下列问题:
(1)若要筛选成功导入目的基因的重组质粒,培养基中应加入的物质有_________________和_________________,构建重组质粒时需要的工具酶有_________________,对获取的目的基因可用_________________技术对其扩增。
(2)实验小组用BamH I和Blg II两种限制酶切割目的基因和质粒,构建重组质粒后导入大肠杆菌中,在筛选重组质粒的培养基上,若大肠杆菌菌落显蓝色,说明导入了____________________。没有导入任何外源DNA的大肠杆菌________________(填“能”或“不能”)在该培养基上生存。
(3)将若干个质粒和目的基因用BamH I和Blg II两种限制酶切割后,用DNA连接酶相连,然后再用BamH I和EcoR I切割成功连接后的产物,获得了长度为0.7kb、2.8kb、1kb和2.5kb四种长度的DNA片段,则目的基因的长度为____________kb(已知目的基因的长度大于1kb,1kb=1000个碱基对)。
高三生物综合题困难题查看答案及解析
【生物-选修3:现代生物科技专题】人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白,可在转htPA基因母羊的羊乳中获得,流程如图1。图2位含有目的基因的DNA片段及其具有的限制酶切点,表格中是4种限制酶的识别序列和酶切位点,请据图表回答下列问题:
限制酶 | MspI | BamHI | MboI | SmaI |
识别序列及切点 | CICGG | GIGATCC | IGATC | CCCICGG |
(1)若需利用酶切法获得目的基因,最好应选择的限制酶是_____。
(2)图I中序号1代表的是________________,它是_____________的部位。
(3)为获取更多的卵(母)细胞,要对供体母羊注射促性腺激素,使其__________。精子和卵子在体外受精后,应将受精卵移入_____________中继续培养。
(4)若要获得多个转基因个体应选择_____________的桑葚胚或囊胚进行胚胎分割。为了获得母羊,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行________________。
(5)人们对转基因生物的安全性的争论主要有:食物安全、_____________安全和环境安全三个方面的激烈争论。
高三生物综合题中等难度题查看答案及解析
【生物——选修3:现代生物科技专题】
回答下列有关转基因植物培育技术的相关问题:
(1)在转基因植物培育过程中,Ti质粒和含目的基因的DNA片段要用______进行切割,一个基因表达载体的组成,除了目的基因、标记基因外,还必须有_____和______。
(2)将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是_____法,但该方法不适用于大多数_______ (单子叶/双子叶/裸子)植物。
(3)目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程,称为_______。检测转基因植株的DNA是否插入了目的基因,常用______技术。除分子检测外,有时还需要进行______水平的检测。
高三生物选择题中等难度题查看答案及解析
【生物-选修3:现代生物科技专题】已知pUC质粒上携带有IacZ+基因的一段序列,编码β-半乳糖苷酶的α肽。而宿主细胞含有IacZ+的突变基因,其产物无β-半乳糖苷酶活性,但遇α肽,可发生α-互补作用,产生有活性的酶,使培养基中的无色物质X-Gal分解,菌落呈蓝色;若将外源基因插入到质粒上IacZ+序列中,失去α-互补作用(注:宿主细胞菌落为白色)。图甲为pUC质粒表达载体简图,小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点,tctR为四环素抗性基因,P为启动子、T为终止子,ori为复制原点。图乙表示目的基因的两端分别有EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。为获得目的菌株,请分析回答下列问题:
(1)为快速筛选目的基因,应将含有目的基因的DNA与pUC质粒表达载体分别用 酶切,酶切产物用 进行连接后将得到的混合物直接导入受体菌中,培养受体菌有的未被转化(用A表示),有的被转化,被转化的菌株有三种(B含环化目的基因的菌株 C含质粒载体的菌株 D含插入了目的基因的重组质粒的菌株)。
(2)为筛选出插入了目的基因的菌株,需要将宿主细胞接种在含有 的培养基中。
(3)在培养基中,不能生长的菌株为 ;产生蓝色菌落的菌株为 ;产生白色菌落的菌株为 (请用(1)中的A、B、C、D字母作答)。
(4)基因工程中除质粒作为基因载体外,还可用动植物病毒和 。
高三生物综合题困难题查看答案及解析
真核生物基因中通常有内含子(位于编码蛋白质序列内的非编码DNA片段),而原核生物基因中没有,原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。有人利用RT-PCR技术(mRNA逆转录为cDNA再进行PCR扩增),获得了牛的G基因,导入到大肠杆菌中,成功表达出G蛋白(一种免疫蛋白)。请回答下列问题:
(1)RT-PCR过程需要的酶有_____________;在进行PCR扩增时需要设计_________种引物。
(2)RT-PCR的产物经过BamHⅠ、EcoRⅠ双酶切后,与经过同样双酶切得到的PBV载体连接,该操作程序属于_________,也是基因工程的核心步骤。与单一酶切相比,双酶切具有的优点是________________(答出两点)。
(3)若要检测G基因是否翻译出G蛋白,可采用的分子水平的检测方法是_________________。
(4)有人从牛的基因组文库中获得了G基因,同样以大肠杆菌作为受体细胞却未得到G蛋白,其原因是________________。
高三生物综合题中等难度题查看答案及解析
真核生物基因中通常有内含子(位于编码蛋白质序列内的非编码DNA片段),而原核生物基因中没有,原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。有人利用RT-PCR技术(mRNA逆转录为cDNA再进行PCR扩增),获得了牛的G基因,导入到大肠杆菌中,成功表达出G蛋白(一种免疫蛋白)。请回答下列问题:
(1)RT-PCR过程需要的酶有_____________;在进行PCR扩增时需要设计_________种引物。
(2)RT-PCR的产物经过BamHⅠ、EcoRⅠ双酶切后,与经过同样双酶切得到的PBV载体连接,该操作程序属于_________,也是基因工程的核心步骤。与单一酶切相比,双酶切具有的优点是________________(答出两点)。
(3)若要检测G基因是否翻译出G蛋白,可采用的分子水平的检测方法是_________________。
(4)有人从牛的基因组文库中获得了G基因,同样以大肠杆菌作为受体细胞却未得到G蛋白,其原因是________________。
高三生物非选择题困难题查看答案及解析