用噬菌体抗体库技术获得人的单克隆抗体的方法是:将人抗体基因插入噬菌体载体,然后让该噬菌体感染大肠杆菌,抗体可能和噬菌体蛋白以融合蛋白的形式附着在噬菌体表面,也可能通过大肠杆菌分泌出去。回答下列问题:
(1)获取人抗体基因时,可从人的_________细胞中获取总RNA,反(逆)转录成cDNA,再通过PCR技术扩增抗体基因。在PCR反应体系中,需加入________作为合成DNA的原料。
(2)在抗体基因与噬菌体基因之间设计了一个终止密码子(UAA或UAG或UGA)的对应序列,在终止密码子突变型的菌株表达时,抗体基因的表达产物是_______(填“融合蛋白”或“分泌型抗体”)。
(3)下图表示噬菌体抗体库中编码某抗体的mRNA的部分碱基序列:
图中虚线框内mRNA片段包含__________个密码子,如虚线框后的序列未知,预测虚线框后的第一个密码子最多有________种。
(4)在噬菌体抗体库的构建过程中,理论上可以不利用Ca2+处理大肠杆菌,依据是___________。与利用杂交瘤技术生产的单克隆抗体相比,用该技术省去的步骤是__________,使制备更简单易行。从噬菌体抗体库中筛选特异性抗体的方法是__________。
高三生物非选择题中等难度题
用噬菌体抗体库技术获得人的单克隆抗体,方法是将人抗体基因插入噬菌体载体,然后让该噬菌体感染大肠杆菌,抗体可能和病毒蛋白以融合蛋白的形式,附着在噬菌体表面,也可能通过大肠杆菌分泌出去。回答下列问题:
(1)获取人抗体基因时,可从人的___________(填“B”或“T”或“体”)细胞中获取总RNA,逆转录成cDNA,再通过PCR技术扩增出抗体基因。在PCR反应体系中,加入dNTP(dCTP、dATP、dGTP和dTTP)的作用是______________________。
(2)在噬菌体抗体库的构建过程中,理论上可以不利用Ca2+处理大肠杆菌,依据是_________________。
(3)从噬菌体抗体库中筛选特异性抗体的方法是___________,原理是______________________。
(4)在抗体基因与噬菌体基因之间设计了一个终止密码子(UAG)的对应序列在终止密码子突变型的菌株表达时,抗体基因的表达产物是___________(填“融合蛋白”或“分泌型抗体”)。
(5)与利用杂交瘤技术生产的单克降抗体相比,用该技术省去了___________(步骤),使制备更简单易行。
高三生物非选择题中等难度题查看答案及解析
用噬菌体抗体库技术获得人的单克隆抗体,方法是将人抗体基因插入噬菌体载体,然后让该噬菌体感染大肠杆菌,抗体可能和病毒蛋白以融合蛋白的形式,附着在噬菌体表面,也可能通过大肠杆菌分泌出去。回答下列问题:
(1)获取人抗体基因时,可从人的___________(填“B”或“T”或“体”)细胞中获取总RNA,逆转录成cDNA,再通过PCR技术扩增出抗体基因。在PCR反应体系中,加入dNTP(dCTP、dATP、dGTP和dTTP)的作用是______________________。
(2)在噬菌体抗体库的构建过程中,理论上可以不利用Ca2+处理大肠杆菌,依据是_________________。
(3)从噬菌体抗体库中筛选特异性抗体的方法是___________,原理是______________________。
(4)在抗体基因与噬菌体基因之间设计了一个终止密码子(UAG)的对应序列在终止密码子突变型的菌株表达时,抗体基因的表达产物是___________(填“融合蛋白”或“分泌型抗体”)。
(5)与利用杂交瘤技术生产的单克降抗体相比,用该技术省去了___________(步骤),使制备更简单易行。
高三生物非选择题中等难度题查看答案及解析
用噬菌体抗体库技术获得人的单克隆抗体的方法是:将人抗体基因插入噬菌体载体,然后让该噬菌体感染大肠杆菌,抗体可能和噬菌体蛋白以融合蛋白的形式附着在噬菌体表面,也可能通过大肠杆菌分泌出去。回答下列问题:
(1)获取人抗体基因时,可从人的_________细胞中获取总RNA,反(逆)转录成cDNA,再通过PCR技术扩增抗体基因。在PCR反应体系中,需加入________作为合成DNA的原料。
(2)在抗体基因与噬菌体基因之间设计了一个终止密码子(UAA或UAG或UGA)的对应序列,在终止密码子突变型的菌株表达时,抗体基因的表达产物是_______(填“融合蛋白”或“分泌型抗体”)。
(3)下图表示噬菌体抗体库中编码某抗体的mRNA的部分碱基序列:
图中虚线框内mRNA片段包含__________个密码子,如虚线框后的序列未知,预测虚线框后的第一个密码子最多有________种。
(4)在噬菌体抗体库的构建过程中,理论上可以不利用Ca2+处理大肠杆菌,依据是___________。与利用杂交瘤技术生产的单克隆抗体相比,用该技术省去的步骤是__________,使制备更简单易行。从噬菌体抗体库中筛选特异性抗体的方法是__________。
高三生物非选择题中等难度题查看答案及解析
回答下列(一)、(二)小题:
(一)分离以尿素为氮源的微生物时,同学们各自将取来的菌液稀释至10-5倍后在培养皿中进行培养,A同学培养皿中得到约150个菌落,其他同学的培养皿中得到大约50个菌落,各位同学实验后均剩余少量空白平板。请回答:
(1)微生物实验中各种实验器皿高压蒸汽灭菌后,通常需要将其放入________℃的烘箱中烘干,以除去灭菌时的水分。实验操作前,应将需要使用的器皿从烘箱中取出,放到超净台上,打开紫外灯和________,灭菌30min。
(2)同学们在此实验中使用的微生物分离方法称为______________,该分离方法通常以每个培养皿中有__________个以内的菌落最为合适。在培养基中加入酚红可以对此实验中分离的微生物进行鉴定,原因是______________。
(3)同学们对实验结果进行分析后认为,导致A同学实验结果的可能原因是培养基配制时没有用___________替换琼脂,或者是培养基配制时被杂菌污染了。证明A同学的培养基是否被杂菌污染的方法是___________。
(二)回答下列与现代生物技术有关的问题:
(1)某农户建立了小型的“蔬菜-鸡、猪-沼气”人工生态系统。此系统可称为___________生态工程,属于小型农业生态工程,在分析该生态系统的经济效益时,除了考虑系统内部的投入与产出、系统的实际消费外,还需考虑系统的有效贡献,也就是系统____________。
(2)利用一定的技术可以将两个或多个细胞融合成一个细胞,上世纪80年代发明的____________技术,是效率很高的新型细胞融合技术。基因型不同的细胞间的融合就是细胞杂交,利用杂交细胞检测特定染色体丢失与特定蛋白质减少的对应关系可以进行____________。
(3)用噬菌体抗体库技术可获得人单克隆抗体,该技术的原理是将人抗体基因插入噬菌体载体,让重组噬菌体侵染大肠杆菌并合成抗体。获取人抗体基因时,可从人的____________细胞中获取RNA,再通过逆转录获得抗体基因。由于噬菌体能自主吸附并将DNA分子注入大肠杆菌,理论上可以不使用____________处理大肠杆菌。为保证合成的抗体以分泌蛋白的形式分泌出大肠杆菌,抗体基因与噬菌体基因间需设计一个____________密码子的对应序列,否则,抗体可能和病毒蛋白以融合蛋白的形式附着在噬菌体表面。
高三生物综合题中等难度题查看答案及解析
【生物——选修3:现代生物科技专题】
噬菌体抗体库技术是指将人的全部抗体基因插入噬菌体的基因组中,然后让该噬菌体感染大肠杆菌,最终使抗体以融合蛋白的形式表达于噬菌体的表面,形成含有全套抗体谱的噬菌体抗体库。请问答下列问题:
(1)人体内的抗体是在________(细胞名称)中合成后,以胞吐的方式分泌到内环境中的。
(2)若要获取人的抗体基因,可以从细胞中提取相应的RNA,通过逆转录过程获 取______片段,再合成目的基因。采用PCR技术扩增目的基因的过程中,需要的物质除模板链、四种脱氧核苷酸外,还需要____________。
(3)构建重组DNA分子的目的是______________。在噬菌体抗体库的构建过程中,是否需要利用CaCl2处理大肠杆菌以制备感受态细胞?请写出原因:_______。
(4)检测大肠杆菌转录出的相应RNA时应采用_______技术,即从原核细胞中提取RNA,以________为探针,与RNA杂交。该技术的原理是___________。
高三生物综合题中等难度题查看答案及解析
噬菌体抗体库技术是指将人的全部抗体基因插入到噬菌体的基因组中,然后让该噬菌体感染大肠杆菌,最终使抗体以融合蛋白的形式表达于噬菌体的表面,形成含有全套抗体谱的噬菌体抗体库,回答下列问题:
(1)获取人的全部抗体基因时,可以提取人淋巴细胞的全部RNA,然后通过_______过程获得含有抗体基因的DNA片段,对目的基因进行扩增的常用方法是PCR,该技术所依据的原理是____________________,PCR扩增某目的基因时需要引物___________种,若要将某目的基因扩增4代,则需要消耗每种引物 _____________ 个。
(2)在噬菌体抗体库的构建过程中,是否需要利用CaCl2处理大肠杆菌,制备感受态细胞________________ ,原因是___________________________________________ 。
(3)要检测噬菌体的表面是否含有某种抗体,可采用的技术是_____________,噬菌体表面的抗体尚不具备完整的功能,其原因是____________________________________。
高三生物综合题中等难度题查看答案及解析
噬菌体抗体库技术是指将人的全部抗体基因插入到噬菌体的基因组中,然后让该噬菌体感染大肠杆菌,最终使抗体以融合蛋白的形式表达于噬菌体的表面,形成含有全套抗体谱的噬菌体抗体库。请回答下列问题:
(1)获取人的全套抗体基因时,可以提取人淋巴细胞的全部RNA,然后通过_______过程获得含有抗体基因的DNA片段。对目的基因进行扩增的常用方法是PCR技术,该技术所依据的原理是____。若要将某目的基因拷贝15次,则需要消耗引物______个。
(2)在噬菌体抗体库的构建过程中,是否需要利用CaCl2处理大肠杆菌,制备感受态细胞?______________,原因是______________。
(3)要检验噬菌体的表面是否含有某种抗体,可采用的技术是______________。菌体表面的抗体尚不具备完整的功能,其原因是______________。
高三生物非选择题中等难度题查看答案及解析
噬菌体抗体库技术是指将人的全部抗体基因插入噬菌体的基因组中,然后让该噬菌体感染大肠杆菌,最终使抗体以复合蛋白质的形式表达于噬菌体的表面,形成含有全套抗体谱的噬菌体抗体库,请回答下列问题:
(1)人体内的抗体在合成后,以____________的方式分泌到内环境中。
(2)若要获取人的抗体基因,可以从细胞中提取相应的RNA,通过逆转录过程获取_______片段,再合成目的基因,采用PCR技术扩增目的基因的过程中,需要的物质除模板链、四种脱氧核苷酸外,还需要______。
(3)构建重组DNA分子的目的是_________。在噬菌体抗体库的构建过程中,_________(需要/不需要)利用CaCl2处理大肠杆菌以制备感受态细胞,理由是_________________。
(4)检测大肠杆菌是否转录出相应RNA时应先从原核细胞中提取其RNA,再以__________为探针,与RNA杂交,该技术的原理是______________。
高三生物非选择题中等难度题查看答案及解析
科学家Burton等将人的抗体编码基因体外克隆后,插入噬菌体中并转染大肠杆菌得到工程菌。目的基因在工程菌中进行表达,获得了具有高度免疫活性的人抗体,该项技术被称为噬菌体抗体库技术。回答下列相关问题:
(1)提取人的抗体编码基因时,若限制酶切出的DNA片段是平末端,则需要用____酶进行连接。若要在短时间内获得较多的抗体编码基因,可以利用PCR技术扩增DNA,扩增目的基因时需要加入两种引物,其原因是____。
(2)运用逆转录法获得的抗体编码基因,只是该基因的____序列,需要插入载体的____之间才能进行转录。
(3)大肠杆菌常常被用作基因工程的受体菌,其主要优点是____(答出两点即可)。
(4)将重组DNA分子导入受体细胞时,一般不需要用CaCl2处理大肠杆菌以制备感受态细胞,其原因是____。
高三生物综合题中等难度题查看答案及解析
为临床检测肿瘤坏死因子(TNF-α ),利用“噬菌体展示技术”获得TNF-α抗体,需要获得TNF-α抗体的基因片段,插入到噬菌体基因组中,经过筛选得到能正确表达TNF-α抗体的噬菌体,进行大量扩增。下列相关叙述不正确的是 ( )
A. 将TNF-α抗体的基因片段与噬菌体DNA重组需用限制酶和DNA连接酶
B. 在细菌体内,噬菌体以自身氨基酸为原料合成TNF-α抗体
C. TNF-α抗体随子代噬菌体的重新组装而展示在噬菌体表面
D. 噬菌体通过侵染细菌繁殖,增殖速度快,更容易快速获得抗体
高三生物单选题中等难度题查看答案及解析