某研究小组对新疆天山雪莲根部冻土产酶微生物进行了分离，以了解其产酶的情况。回答下列问题：（...

某研究小组对新疆天山雪莲根部冻土产酶微生物进行了分离，以了解其产酶的情况。回答下列问题：

（1）配制菌液时，将适量的新疆天山雪莲根部冻土放入无菌水中振荡、摇匀、静置，取上清液用无菌水进行________。

（2）用平板划线法接种，为保证接种环上的菌种来源于上次划线的末端，需要进行的操作是______________；培养皿需要倒置培养，其原因是_____________________。若要对分离得到的菌种进行长期保存，一般采用________的方法。

（3）通过进一步筛选，得到了能够分泌淀粉酶和纤维素酶的菌落。

①筛选产淀粉酶菌的培养基中含淀粉和________（指示剂），出现________的为产淀粉酶菌。

②纤维素酶通常包括C1酶、CX酶和________。

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漆酶是真菌、细菌中的氧化酶，可用于有毒化合物的生物消除。某研究小组为提高产漆酶菌株(C1)的产酶量，对其培养条件进行优化研究。

Ⅰ.培养基成分的优化研究：为确定最佳的营养成分组合，科研人员配制了9组以A、B为主要营养成分的培养基，并添加0.04%的愈创木酚(被氧化后呈红褐色)。接种C1培养后，结果如表所示。

（1）实验组6中的成分A、B分别是_________________________________________。

（2）据培养结果分析，营养成分的最佳组合是实验组________，阐述理由： _________。

Ⅱ.培养基pH的优化研究：选取最佳营养成分组合，配制成pH为3.0、5.0、7.0的三种液体培养基，接种等量C1并培养一段时间，定期取样测定培养基中漆酶量(以酶活性表示)，结果如图所示。

（1）调节培养基的pH应在________(填编号)进行。

①灭菌前　②灭菌后倒平板前　③倒平板后接种前　　　　 ④接种后

（2）据图分析，为获得最多的漆酶，最佳方案是________________。

Ⅲ.经过一系列培养环境的优化，C1产酶量有所提高，在此基础上，要获得产酶量更高的菌株应用到生产上，可采取的育种方法是诱变育种，请简要写出实验思路： __________________________________；从突变的不定向性角度预测观察到的实验结果：_______________________。

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为研究“某品牌酸奶中乳酸菌数量及其对抗生素的耐药性情况”,某同学进行了如下实验。请分析回答下列问题。

(1)配制的细菌培养基除了含有水、碳源、氮源和无机盐等主要营养成分外,还应加入适量的______和琼脂。在培养基各成分溶化与灭菌之间,要进行的操作是______。

(2)接种微生物的方法有很多,图1中过程①②③所示的方法为_________。用该方法统计样本菌落数后,所得数据需要乘以10n后,才可表示乳酸菌的数量(单位:个/mL),这里的n=_____。用该方法统计样本菌落数时,同时需要做A、B、C三个培养皿,原因是__________。

(3)为了检测乳酸菌对抗生素的敏感性,取该单菌落适当稀释,接种于固体培养基表面,在37 ℃培养箱中培养24 h,使其均匀生长,布满平板。将分别含有A、B、C三种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置,培养一段时间后,含抗生素A的滤纸片周围出现透明圈,说明该菌对抗生素A___(填“敏感”或“不敏感”);含抗生素C的滤纸片周围的透明圈比含抗生素A的小,且透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是___________。

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为研究“某品牌酸奶中乳酸菌数量及其对抗生素耐药性情况”某同学进行了如下实验：

请分析回答下列问题：

（1）配制的细菌培养基除了含有水、碳源、氮源和无机盐等主要营养成分外，还应加入适量的_______和琼脂。在培养基各成分溶化与灭菌之间，要进行的操作是_______。

（2）接种微生物的方法有很多，图中过程①②③所示的方法为_______________。用该方法统计样本菌落数时，同时需要做A、B、C三个培养皿，原因是_________________。用该方法统计样本菌落数后，所得数据需要乘以10n后，才可表示乳酸菌的数量（单位：个/ml），这里的n=_____________（4或5或6）。经正确操作培养后，3个平板上的菌落数分别为150、158和157。据此可得出每毫升样品中的活菌数_______（填“至多”或“至少”）为________个。

（3）请完善“检测乳酸菌对青霉素、四环素耐药性”的实验操作步骤：

步骤1：分别取______________________________加入三组无菌培养皿中，再加入灭菌并冷却到50°C左右的培养基，立即混匀，静置凝固成平板。

步骤2：向三组培养基中分别接种待检测的乳酸菌菌种。

步骤3：将接种后的三组培养基和一个________都置于适宜温度等条件下培养一定时间，观察比较培养基中菌落生长情况。

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为研究“某品牌酸奶中乳酸菌数量及其对抗生素耐药性情况”某同学进行了如下实验:

请分析回答下列问题：

（1）配制的细菌培养基除了含有水、碳源、氮源和无机盐等主要营养成分外，还应加入适量的__________和琼脂。在培养基各成分溶化与灭菌之间，要进行的操作是_________。

（2）接种微生物的方法有很多，图中过程①②③所示的方法为_______________。用该方法统计样本菌落数时，同时需要做A、B、C三个培养皿，原因是________________。用该方法统计样本菌落数后，所得数据需要乘以10n后，才可表示乳酸菌的数量（单位：个/ml)，这里的n=_____________。

（3）请完善“检测乳酸菌对青霉素、四环素耐药性”的实验操作步骤：

步骤1:分别取______________加入三组无菌培养皿中，灭菌并冷却到__________℃左右的培养基，立即混匀，静置凝固成平板。

步骤2:向三组培养基中分别接种待检测的乳酸菌菌种。

步骤3:将接种后的三组培养基和一个_________都置于适宜温度等条件下培养一定时间，观察比较培养基中菌落生长情况。

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牛、羊等反刍动物具有特殊的器官——瘤胃。在瘤胃中生活着多种微生物，其中某些细菌能分解纤维素。为分离瘤胃中的纤维素分解菌，生物课外科研小组的同学开展了如下实验。请分析回答下列问题：

（1）纤维素酶是由多种酶组成的复合酶，其中能催化纤维二糖水解的是__________。纤维素酶的测定方法，一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的__________进行定量测定。

（2）—般而言，配制细菌培养基时，除了加入水、无机盐、碳源、氮源等主要营养成分之外，还应添加适量的____________________。

（3）在稀释涂布之前，可以将菌种样液接种到液体培养基中进行选择培养，其目的是__________。科研小组的同学将瘤胃菌种提取液接种到适宜的培养液中，调节pH及温度至适宜条件，并持续通入无菌空气，结果一段时间后发现培养液中几乎没有菌种，原因是____________________。

（4）为筛选目的菌株，在倒平板时就加入刚果红（CR），这种染色法的优点是操作简单，不存在______的问题，缺点是会形成假透明圈，原因是__________（答出一点即可）。

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为了实现废物资源化，人类正努力将废纸中的纤维转化为一种新的资源——乙醇，其基本流程如图所示，请回答相关问题：

（1）自然界中①环节需要的产酶微生物大多分布在________的环境中。在上述环境中进行土壤取样，样品首先要通过选择培养来　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（2）将用液体培养基选择培养得到的微生物需采用　　 _________法接种到以________为碳源、并加入刚果红的培养基上，筛选周围有___________的菌落。

（3）以上步骤只是对目的微生物进行了初步的筛选，为了确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行　　　 的实验。确定了所需要的微生物后，就可进行图中________环节，以获得进行酒精发酵的原料。

（4）生产中可以满足④环节的常见菌种是________，⑤环节要保证__________条件才能发酵产生乙醇。

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为探究“某品牌酸奶中乳酸菌数量及其对抗生素耐药性情况”，某同学进行了如下实验：请分析回答下列问题：

⑴配制的乳酸菌培养基除了含有水、碳源、氮源和无机盐等主要营养成分外，还应加入适量的______和琼脂。在培养基各成分溶化与灭菌之间，要进行的操作是_____________。

⑵接种微生物的方法有很多，图1中过程③所示的方法为________。用该方法统计样本菌落数时，同时需要做A、B、C三个培养皿，原因是_________________ 。用该方法统计样本菌落数后，所得数据需要乘以10n后，才可表示酸奶样品中的乳酸菌的数量(单位：个/ml)，这里的n=_______。

⑶请完善“检测乳酸菌对青霉素、四环素耐药性”的实验操作步骤：

步骤1:分别取______________加入三组无菌培养皿中，再加入灭菌并冷却到________℃左右的培养基，立即混匀，静置凝固成平板。

步骤2:向三组培养基中分别接种待检测的乳酸菌菌种。

步骤3:将接种后的三组培养基和一个________都置于适宜温度等条件下培养一定时间，观察比较培养基中菌落生长情况。

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为探究“某品牌酸奶中乳酸菌数量及其对抗生素耐药性情况”，某同学进行了如下实验：请分析回答下列问题：

⑴配制的乳酸菌培养基除了含有水、碳源、氮源和无机盐等主要营养成分外，还应加入适量的______和琼脂。在培养基各成分溶化与灭菌之间，要进行的操作是_____________。

⑵接种微生物的方法有很多，图1中过程③所示的方法为________。用该方法统计样本菌落数时，同时需要做A、B、C三个培养皿，原因是_________________ 。用该方法统计样本菌落数后，所得数据需要乘以10n后，才可表示酸奶样品中的乳酸菌的数量(单位：个/ml)，这里的n=_______。

⑶请完善“检测乳酸菌对青霉素、四环素耐药性”的实验操作步骤：

步骤1:分别取______________加入三组无菌培养皿中，再加入灭菌并冷却到________℃左右的培养基，立即混匀，静置凝固成平板。

步骤2:向三组培养基中分别接种待检测的乳酸菌菌种。

步骤3:将接种后的三组培养基和一个________都置于适宜温度等条件下培养一定时间，观察比较培养基中菌落生长情况。

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传统发酵技术和微生物分离、纯化过程中，无菌操作是微生物接种技术的关键。某实验小组欲从污水污染的污泥中筛选出脲酶细菌(脲酶可将尿素分解为氨）。回答下列问题：

（1）配制培养基时各种成分在溶化后分装前一般需要先_______。平板冷却凝固后一般要_______放置，这样操作的目的是___________。

（2）在菌株筛选过程中，应将污泥样品稀释液接种于______________固体培养基上，并加入_________指示剂加以鉴别。平板划线法时在第二次及其后的划线操作时，总是从____________开始划线，原因是_______________。

（3）如何设计实验判断培养基是否被污染？__________________________。

（4）对于频繁使用的菌种，可以采用_____________的方法进行保藏，但该方法具有_______________________________缺点。

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