植物细胞壁中存在大量不能被猪消化的多聚糖类物质,如半纤维素多聚糖、果胶质(富含有半乳糖醛酸的多聚糖)等。研究人员通过基因工程、胚胎工程等技术培育出转多聚糖酶基因(manA)猪,主要流程如下图(neo为新霉素抗性基因)。回答下列问题:
(1)运用PCR技术扩增DNA分子时,需经过变性→________→延伸→重复过程,经过4轮循环后,得到的子代DNA分子中,不同时含有两种引物的DNA分子占________。
(2)图2中的步骤[①]________过程,是基因工程基本操作程序中的核心步骤。
(3)通过①过程获得的重组质粒含有4.9 kb个碱基对,其中manA基因含有1.8 kb个碱基对。现将该重组质粒成功导入受体细胞后,经培养,发现约有50%的细胞能正常表达目的基因产物,原因是______________________。若用BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ联合酶切割其中一种重组质粒,只能获得1.7 kb和3.2 kb两种DNA片段,若用上述联合酶切割同等长度的另一种重组质粒,则可获得________kb长度两种的DNA片段。
(4)在④过程的早期胚胎培养时,通常需要定期更换培养液,目的是________________________________________________________________________。
(5)⑤过程前,通常需对受体母猪注射____________,使其能同期发情。与普通猪相比,该转基因猪的优势是________________________。
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植物细胞壁中存在大量不能被猪消化的多聚糖类物质,如半纤维素多聚糖、果胶质(富含有半乳 糖醛酸的多聚糖)等。研究人员通过基因工程、胚胎工程等技术培育出转多聚糖酶基因(manA)猪,主要流程如下 图(neo 为新霉素抗性基因)。
(1)将该重组质粒成功导入受体细胞后,经培养,发现约有 50%的细胞能正常表达目的基因产物,原因 是_____________________________________________________________。通过①过程获得的重组质粒含有 4.9 kb 个碱基对,其中 manA 基因含有 1.8 kb 个碱基对。若用 BamH Ⅰ和 EcoR Ⅰ联合酶切割其中一种重组质粒,只能获得 1.7 kb 和 3.2 kb 两种 DNA 片段,若用上述联合酶切割同等长度的另一种重组质粒,则可获得__________kb 长度两种的 DNA 片段。
(2)图 2 中,猪胎儿成纤维细胞一般选择传代培养 10 代以内的细胞,原因是__________________________________,猪 的卵母细胞一般要培养到__________期。
(3)在④过程的早期胚胎培养时,通常需要定期更换培养液,目的是______________________________________________,一 般培养到__________阶段,可向受体移植。
(4)⑤过程前,通常需对受体母猪注射孕激素,对其进行__________处理。
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植物细胞壁中存在大量不能被猪直接消化的多聚糖类物质,如纤维素、果胶等。科研人员通过基因工程、胚胎工程等技术培育出转多聚糖酶基因(manA)猪,主要流程如下图(注:neo为新霉素抗性基因)。请分析回答下列问题:
(1)运用 PCR 技术扩增 DNA 分子时,需经过变性→复性→_____的重复过程,变性过程需要加热到 90-95℃,目的是_______________。
(2)图中[①]_______________,是基因工程操作程序中的核心步骤。多聚糖酶基因一定要插入到运载体的启动子和终止子之间,目的是_______________,图中过程②常用的方法是_______________。
(3)图中过程③采用的是细胞工程中的_____________技术,在过程④的早期胚胎培养时,通常需要定期更换培养液,目的是_______________。与普通猪相比,该转基因猪的优势是_______________。
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研究发现仅在大豆叶肉细胞中存在一种多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGP),它能够特异性地抑制部分致病真菌细胞内的多聚半乳糖醛酸酶的活性,从而减弱病原菌对植株的侵害。研究人员成功地将PGP基因导入小麦体内,以期获得抗根腐病能力更高的小麦新品种。请分析回答问题:
(1)反转录法是基因工程中获得目的基因的常用方法,本研究中获取模板RNA的大豆细胞最好取自 ,在提取RNA过程中要特别注意防止RNA的水解,试提出一种保护措施: 。
(2)目的基因的扩增常采用PCR技术,而PCR引物的设计是获得大量高纯度目的基因的关键。引物中碱基数量越多,则引物的特异性越 。
(3)下图是本研究使用的质粒载体pAHC25的酶切图谱。用限制酶Sac I和BamH I同时处理pAHC25,结果会产生 种不同的片段。在构建含PGP基因的表达载体时,分析质粒酶切图谱,研究人员选择了有单一酶切点的限制酶Sma I和Sac I作为本研究的工具酶,其优点是 。
(4)研究人员用基因枪法转化该小麦的幼胚细胞,选择幼胚细胞的原因是 ,容易诱导形成植株。
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下列关于糖类的叙述,正确的是
A.葡萄糖是细胞生命活动的直接能源
B.多糖是由许多单糖连接而成的多聚体
C.淀粉是动植物细胞内重要的储能物质
D.纤维素可以作为植物细胞的能源物质
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果胶酶是应用于果酒生产的重要酶制剂之一,它广泛存在于细菌、酵母菌等多种微生物细胞中。某枯草杆菌含果胶酯酶基因,某酿酒酵母中含有多聚半乳糖醛酸酶基因。研究者利用基因工程技术实现了果胶酯酶基因在酿酒酵母中表达,克服了细菌作为外源基因表达系统的缺点,并且使多种有利特性集中在同一菌株,过程如图。回答下列问题。
(1)细菌因繁殖快、细胞内存在易于分离的质粒等优点,最早用于外源蛋白的生产“工厂”,其缺点是没有___________(填细胞器名称),因而不具有对蛋白质加工修饰的功能。
(2)①过程获得的目的基因是___________。该基因除了利用PCR技术进行扩增外,还可以从基因文库中获取。基因文库包括基因组文库和cDNA文库,其中_____________含有某种生物的全部基因,且具有内含子。
(3)②过程重组表达载体除了含有目的基因外,还必须有启动子、_____________和 _____________等。启动子是_____________识别和结合的部位,有了它才能驱动DNA转录出mRNA,最终获得目的蛋白质。
(4)现利用目的基因制成放射性探针,如何利用此探针检测目的基因是否成功导入酿酒酵母?____________________________________________。
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番茄营养丰富,是人们喜爱的一-类果蔬。普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因,控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶,该酶能破坏细胞壁,使番茄软化,不耐贮藏。科学家通过基因工程将- -种抗多聚半乳糖醛酸酶基因导人番茄细胞,获得了抗软化番茄。下图是通过基因工程培育抗软化耐储藏番茄的过程及原理。请分析回答下列问题:
(1)利用基因工程将目的基因导入植物细胞,目前采用最多的方法是_______,该方法中用到的载体是_______,目的基因需插人到该基因载体的_______上。
(2)构建基因表达载体时必需的工具酶有_______。
(3)图中步骤①→②使用的生物技术是_______,这种技术可保留番茄植株抗软化保鲜时间长的优良性状。
(4)根据图中转基因番茄细胞中的信息传递过程,分析转基因番茄抗软化的原因:_______。
(5)培养转基因植物为避免外源基因通过花粉传播进人其他植物,可将外源基因导人_______(填“细胞核”或“细胞质”)。
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豆科植物细胞壁中含有大量不能被猪消化的甘露聚糖。研究人员通过基因工程等技术培育出转甘露聚糖酶基因(manA)猪,主要流程如下图,图中PSP为猪唾液腺分泌蛋白基因启动子,neo为新霉素抗性基因。请回答下列问题:
(1)PCR过程中,温度降低到55℃的目的是_______________________________。
(2)步骤②中选择将manA基因插入PSP后面的目的是___________________。
(3)进行早期胚胎培养时,通常将其置于通入混合气体的培养箱中培养,其中CO2的主要作用是____________________;另外,需定期更换培养液,目的是___________________。
(4)步骤⑥中,通常选择发育到______________阶段的胚胎成功率较高。
(5)与饲养普通猪相比,饲养转基因猪的优势是____________________________。
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豆科植物细胞壁中含有大量不能被猪消化的甘露聚糖。研究人员通过基因工程等技术培育出转甘露聚糖酶基因(manA)猪,主要流程如下图,图中PSP为猪唾液腺分泌蛋白基因启动子,neo为新霉素抗性基因。请回答下列问题:
(1)步骤①PCR过程中加入引物的原因是Taq酶_______________________。
(2)步骤②中选择将manA基因插入PSP后的目的是___________________________。步骤③常用的方法是________________________。步骤④中使用的猪卵母细胞应处于____________期。用物理或化学方法激活受体细胞的目的是_______________________。
(3)步骤⑤前需要对受体猪群进行同期发情处理,其目的是____________,步骤⑥中,科研人员发现选择4〜6细胞期的胚胎进行移植成功率最高最可能的原因是_______________________。
(4)与饲养普通猪相比,饲养转基因猪的优势是________________________。
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豆科植物细胞壁中含有大量不能被猪消化的甘露聚糖。研究人员通过基因工程等技术培育出转甘露聚糖酶基因(manA)猪,主要流程如下图,图中PSP为猪唾液腺分泌蛋白基因启动子,neo为新霉素抗性基因。请回答下列问题:
(1)PCR过程中,温度降低到55℃的目的是_______________________________。
(2)步骤②中选择将manA基因插入PSP后面的目的是___________________。
(3)进行早期胚胎培养时,通常将其置于通入混合气体的培养箱中培养,其中CO2的主要作用是____________________;另外,需定期更换培养液,目的是___________________。
(4)步骤⑥中,通常选择发育到______________阶段的胚胎成功率较高。
(5)与饲养普通猪相比,饲养转基因猪的优势是____________________________。
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(10分)番茄营养丰富,是人们喜爱的一类果蔬。但普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因,控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶,该酶能破坏细胞壁,使番茄软化,不耐贮藏。为满足人们的生产生活需要,科学家们通过基因工程技术,培育出了抗软化、保鲜时间长的番茄新品种。(操作流程如图)请回答:
(1)在构建基因表达载体时,除了要在载体DNA中插入目的基因外,还需要有________、________和________。
(2)上图转基因番茄新品种的培育过程中,将目的基因导入受体细胞的方法叫做________。
(3)从图中可见,mRNAl和mRNA2的结合直接导致了________无法合成,最终使番茄获得了抗软化的性状。
(4)普通番茄细胞导入目的基因后,先要接种到诱导培养基上培养,经________过程后得到________,然后再转接到分化培养基上,诱导出试管苗,然后进一步培养成正常植株。获得的转基因植物经有性生殖获得的后代,是否也具有转基因特性?________。
(5)利用基因工程进行育种,可以培育出具有新性状的植株,这种育种方式的优点是①________;②________。
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