果胶酶是应用于果酒生产的重要酶制剂之一，它广泛存在于细菌、酵母菌等多种微生物细胞中。某枯草...

果胶酶是应用于果酒生产的重要酶制剂之一，它广泛存在于细菌、酵母菌等多种微生物细胞中。某枯草杆菌含果胶酯酶基因，某酿酒酵母中含有多聚半乳糖醛酸酶基因。研究者利用基因工程技术实现了果胶酯酶基因在酿酒酵母中表达，克服了细菌作为外源基因表达系统的缺点，并且使多种有利特性集中在同一菌株，过程如图。回答下列问题。

（1）细菌因繁殖快、细胞内存在易于分离的质粒等优点，最早用于外源蛋白的生产“工厂”，其缺点是没有___________（填细胞器名称），因而不具有对蛋白质加工修饰的功能。

（2）①过程获得的目的基因是___________。该基因除了利用PCR技术进行扩增外，还可以从基因文库中获取。基因文库包括基因组文库和cDNA文库，其中_____________含有某种生物的全部基因，且具有内含子。

（3）②过程重组表达载体除了含有目的基因外，还必须有启动子、_____________和 _____________等。启动子是_____________识别和结合的部位，有了它才能驱动DNA转录出mRNA，最终获得目的蛋白质。

（4）现利用目的基因制成放射性探针，如何利用此探针检测目的基因是否成功导入酿酒酵母?____________________________________________。

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下列是生物学发展史上的几个重要实验，实验中应用了放射性同位素示踪技术的是

A. 巴斯德发现酿酒中的发酵是由于酵母细胞的存在

B．生长素的发现过程

C. 赫尔希和蔡斯的噬菌体侵染细菌实验

D．验证光合作用释放的氧全部来自水

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（生物——选修1:生物技术实践）酵母菌是一种单细胞的兼性厌氧真菌，被广泛应用于生产、生活实际中。下面是有关酵母菌的一些问题，请分析回答：

（1）为了进行果酒的发酵生产，通常先分离纯化酵母菌，然后扩大培养、固定化酵母细胞，最后才接种、发酵。

①在分离纯化酵母菌时，需要进行无菌操作，其中对培养皿通常采用_______灭菌。

②在扩大培养时，使用_______(“固体或液体”）培养基培养过程中，并要不断进行振动或者搅拌，目的是______________________。

③固定化酵母细胞常采用_______法，若要使这些酵母反复利用，实验过程中一定要注意________。

④用果汁发酵后检测是否有酒精产生，可以在酸性条件下用________检验，如果出现灰绿色，说明产生了酒精。

（2）在家庭酿制米酒的过程中，需要在混匀酒药的米饭中间挖一个洞，目的是增加______含量，以利于酵母菌繁殖。

（3）经过筛选获得产胡萝卜素的酵母菌R生产胡萝卜素，其大致过程是：培养酵母菌R，进行菌体裂解、离心、沉淀，用________法提取、过滤、浓缩，最后用________法鉴定胡萝卜素。在鉴定过程中，需要用胡萝卜素标准品作为_____________。

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酿酒酵母普遍应用于白酒、红酒、啤酒和果汁饮料的生产，其生物合成过程会形成多种多样的代谢产物，从而对食品风味产生重要影响。以下是从酒曲样品中分离出酵母菌的过程：

处理酒曲样品→过滤→系列稀释至10-2—10-7→选择适宜稀释度→涂布固体培养基→28℃下培养48h→挑取典型菌落→镜检→菌种鉴定→菌种保藏。请回答下列有关问题：

（1）制备固体培养基时，采用___________法灭菌15min~20min。

（2）通过稀释涂布平板法可以统计样品中活菌的数目。为保证结果准确，一般选择的稀释浓度要保证涂布后在培养基表面形成___________。涂布平板操作时应在___________附近进行。

（3）菌种鉴定后要进行菌种保藏，具体方法是：将菌种接种于固体斜面培养基上，28℃培养后，将试管于4℃的冰箱保存。这种方法保存的时间不长，菌种容易___________。若想长期保藏，可以采用___________的方法，放在___________的冷冻箱中保存。

（4）酵母菌常用于制作葡萄酒，酒精发酵时一般将温度控制在___________，常用___________检测发酵后是否有酒精产生。

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回答下列有关微生物应用的问题。

（1）利用酵母菌发酵生产果酒时，为尽快得到更多果酒，首先要将淀粉类原料糖化为葡萄糖，在这个过程中，除需要添加相应酶制剂外，还需要控制温度，原因是酶_________。若从反应液中提取出酵母菌进行培养，应将酵母菌接种在______（填“牛肉膏蛋白胨”“伊红美蓝”或“麦芽汁琼脂”）培养基中，置于适宜条件下培养。

（2）利用酵母菌发酵产生的果酒进一步发酵得到果醋时，除需要加入醋酸菌外，还需要调整的两个环境条件是______。给予适宜的条件，即使没有经过严格的灭菌过程，也能够获得果酒、果醋，这是因为___________。

（3）利用毛霉腌制腐乳时，要随着豆腐层的加高而增加盐的用量，原因是________；卤汤中酒精的含量应控制在12%左右，原因是___________。

（4）在泡菜的腌制过程中，要注意控制腌制的条件，如_____等 （答出3点即可），若条件不适，容易造成细菌的大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。

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纤维素酶能催化纤维素的水解，在植物细胞工程方面有着广泛的应用，你认为从下列哪种生

物提取纤维素酶比较合理（    ）

A．酿酒酵母     B．在腐木上生长的霉菌

C．高等植物细胞    D．人体内的大肠杆菌

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[s1] 纤维素酶能催化纤维素的水解，在植物细胞工程方面有着广泛的应用，你认为从下列哪种生物提取纤维素酶比较合理

　A．酿酒酵母　　　　　　　　     B．高等植物细胞

　C．人体内的大肠杆菌　　　　　　     D．在腐木上生长的霉菌

[s1]29.

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生物技术在人类生产和生活中有着广泛的应用。请回答下列问题。

(1)在传统发酵中有许多微生物参与，其中果酒制作中用到的酵母菌新陈代谢类型是_______。

(2)喝剩的果酒敞口放置一段时间会变酸的原因是__________________________________。

(3)在家制作泡菜时，常发现泡菜坛内长一层白膜，这层白膜是怎么形成的？_____________。

(4)对亚硝酸盐含量测定的原理是：亚硝酸盐与对氨基苯磺酸的反应产物能与___________结合形成__________色化合物，用比色法进行对比，判断亚硝酸盐含量的多少。

(5)腐乳制作的后期要加入酒精和多种香辛料配制的卤汤，酒精的浓度要控制在12%左右，若酒精浓度过高会导致__________________________________。

(6)纤维素分解菌能合成_____________________，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将_____________________。

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下列关于高中教材中生产果酒、果醋、工业上生产果胶酶、格里菲斯实验、赫尔希和蔡斯实验中涉及微生物的说法中错误的是

A.上述所涉及的微生物依次是酵母菌、醋酸菌、霉菌、肺炎双球菌、T2噬菌体和大肠杆菌

B.上述微生物中只有酵母菌和霉菌具有核膜，但遗传物质都是DNA

C.鉴别肺炎双球菌（R、S型）可以用显微镜观察是否有荚膜或者用固体培养基培养观察菌落表面是粗糙还是光滑来判断

D.赫尔希和蔡斯将T2噬菌体的蛋白质和DNA直接分离进行实验，证明了DNA是遗传物质

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下列是生物学发展史上的几个重要实验，实验中没有应用放射性同位素示踪技术的是

A．弄清DNA分子的复制方式

B．探知细胞内合成分泌蛋白所经的途径

C．巴斯德发现酿酒中的发酵是由于酵母细胞的存在

D．验证光合作用释放的氧全部来自水

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