某研究性学习小组了解到泡菜中的乳酸菌除了在发酵中产生乳酸，还可以降解亚硝酸盐，该小组利用泡...

某研究性学习小组了解到泡菜中的乳酸菌除了在发酵中产生乳酸，还可以降解亚硝酸盐，该小组利用泡菜液进行了相关的研究。请回答下列问题：

（1）乳酸菌和酵母菌在结构上的主要区别是乳酸菌_______________。

（2）测定泡菜中亚硝酸盐的含量可以用_________法。食物中的亚硝酸盐绝大部分随人体尿液排出，其余的在特定条件下可以转变为致癌物______________。

（3）小组成员用改良的MRS固体培养基分离乳酸菌，该培养基成分如下：

①该培养基因含碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙，从而在菌落周围形成溶钙圈，该培养基属于______（填“选择”或“鉴别”）培养基。

②小组成员将泡菜液进行梯度稀释后，取0.1ml加入到50℃左右的培养基中摇匀，待凝固后，再在其上加盖一层固体培养基。在50℃左右操作的原因是___________，加盖一层固体培养基的目的是_______________。

③在恒温培养箱中培养72h后，挑取溶钙圈较大的菌落，用平板划线法进行进一步纯化。若图甲是接种培养后的菌落分布图，对应的平板划线操作示意图为___________。

④乳酸菌在-20℃的冷冻箱中长期保存时，需要加入一定量的___________。

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某研究性学习小组了解到泡菜中的乳酸菌除了在发酵中产生乳酸，还可以降解亚硝酸盐，该小组利用泡菜液进行了相关的研究。请回答下列问题：

（1）乳酸菌和酵母菌在结构上的主要区别是乳酸菌____________________________。

（2）测定泡菜中亚硝酸盐的含量可以用_________法。食物中的亚硝酸盐绝大部分随人体尿液排出，其余的在特定条件下可以转变为致癌物______________。

（3）小组成员用改良的MRS固体培养基分离乳酸菌，该培养基成分如下：

①该培养基因含碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙，从而在菌落周围形成溶钙圈，该培养基属于______（填选择或鉴别）培养基。

②小组成员在分离纯化乳酸菌时，用______将泡菜液进行梯度稀释后，取0．1ml加入到50℃左右的培养基中摇匀，待凝固后，再在其上加盖一层透明的固体培养基。 加盖一层透明的固体培养基的目的是_____________________________________________。

③在恒温培养箱中培养72h后，挑取溶钙圈较大的菌落，用平板划线法进行进一步纯化。若图甲是接种培养后的菌落分布图，对应的平板划线操作示意图为___________。

④乳酸菌在-20℃的冷冻箱中长期保存时，需要加入一定量的___________。

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某研究性学习小组了解到泡菜中的乳酸菌除了在发酵中产生乳酸，还可以降解亚硝酸盐，该小组利用泡菜液进行了相关的研究。请回答下列问题：

（1）乳酸菌和酵母菌在结构上的主要区别是乳酸菌_______________。

（2）测定泡菜中亚硝酸盐的含量可以用_________法。食物中的亚硝酸盐绝大部分随人体尿液排出，其余的在特定条件下可以转变为致癌物______________。

（3）小组成员用改良的MRS固体培养基分离乳酸菌，该培养基成分如下：

①该培养基因含碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙，从而在菌落周围形成溶钙圈，该培养基属于______（填“选择”或“鉴别”）培养基。

②小组成员将泡菜液进行梯度稀释后，取0.1ml加入到50℃左右的培养基中摇匀，待凝固后，再在其上加盖一层固体培养基。在50℃左右操作的原因是___________，加盖一层固体培养基的目的是_______________。

③在恒温培养箱中培养72h后，挑取溶钙圈较大的菌落，用平板划线法进行进一步纯化。若图甲是接种培养后的菌落分布图，对应的平板划线操作示意图为___________。

④乳酸菌在-20℃的冷冻箱中长期保存时，需要加入一定量的___________。

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某研究性学习小组了解到泡菜中的乳酸菌除了在发酵中产生乳酸，还可以降解亚硝酸盐，该小组利用泡菜液进行了相关的研究。请回答下列问题：

（1）乳酸菌和酵母菌在结构上的主要区别是乳酸菌_______________。

（2）测定泡菜中亚硝酸盐的含量可以用_________法。食物中的亚硝酸盐绝大部分随人体尿液排出，其余的在特定条件下可以转变为致癌物______________。

（3）小组成员用改良的MRS固体培养基分离乳酸菌，该培养基成分如下：

①该培养基因含碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙，从而在菌落周围形成溶钙圈，该培养基属于______（填“选择”或“鉴别”）培养基。

②小组成员将泡菜液进行梯度稀释后，取0.1ml加入到50℃左右的培养基中摇匀，待凝固后，再在其上加盖一层固体培养基。在50℃左右操作的原因是___________，加盖一层固体培养基的目的是_______________。

③在恒温培养箱中培养72h后，挑取溶钙圈较大的菌落，用平板划线法进行进一步纯化。若图甲是接种培养后的菌落分布图，对应的平板划线操作示意图为___________。

④乳酸菌在-20℃的冷冻箱中长期保存时，需要加入一定量的___________。

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乳酸菌是泡菜制作中起主要作用的菌群，某科研小组从泡菜液中分离、筛选纯种乳酸菌，对其功能进行相关研究，为改进传统泡菜生产工艺提供技术参考。

（1）乳酸菌菌种的分离与纯化：

取泡菜发酵汁进行　　　　　　 操作，得到、、、、、倍的稀释液。选择合适的稀释度样液加入10mL乳酸菌分离培养基（MRS培养基），凝固后再注入5mL水琼脂培养基，造成　　　　 （需氧/厌氧）环境，37℃培养2～3天，根据　　　 的形状、大小、隆起程度等特征，进行反复分离、纯化至纯菌种。整个操作过程需在　　　　　　 条件下进行。

（2）产强酸菌株的筛选：

利用产酸菌在含的培养基上产生溶解圈的原理，将上述菌种接种到含的MRS培养基上，经过培养，挑选　　　　　 的菌落，进一步纯化。

（3）产强酸菌株的功能研究，结果如下图：

人工接种乳酸菌有利于　　　　　　 （促进/抑制）亚硝酸盐的生成。泡菜制作过程中，影响亚硝酸盐含量的因素还有时间、　　　　　 和　　　　　　　 等。

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乳酸菌是泡菜制作中起主要作用的菌群，某科研小组从泡菜液中分离、筛选纯种乳酸菌，对其功能进行相关研究，为改进传统泡菜生产工艺提供技术参考。

（1）乳酸菌菌种的分离与纯化：

取泡菜发酵汁进行　　　　　　 操作，得到、、、、、倍的稀释液。选择合适的稀释度样液加入10mL乳酸菌分离培养基（MRS培养基），凝固后再注入5mL水琼脂培养基，造成　　　　 （需氧/厌氧）环境，37℃培养2～3天，根据　　　 的形状、大小、隆起程度等特征，进行反复分离、纯化至纯菌种。整个操作过程需在　　　　　　 条件下进行。

（2）产强酸菌株的筛选：

利用产酸菌在含的培养基上产生溶解圈的原理，将上述菌种接种到含的MRS培养基上，经过培养，挑选　　　　　 的菌落，进一步纯化。

（3）产强酸菌株的功能研究，结果如下图：

人工接种乳酸菌有利于　　　　　　 （促进/抑制）亚硝酸盐的生成。泡菜制作过程中，影响亚硝酸盐含量的因素还有时间、　　　　　 和　　　　　　　　　 等。

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某研究小组以櫻桃萝卜为原料，设置3个实验组，分别为乳酸菌接种发酵组、乳酸菌与酵母菌混合接种发酵组、酵母菌接种发酵组，以自然发酵组为对照，通过测定发酵过程中pH、亚硝酸盐等指标研究酵母菌对萝卜泡菜发酵过程的影响。回答下列问题：

（1）为了准确研究在发酵过程中3个实验组的差异，需要对使用的泡菜水进行____________，然后按照实验的要求____________。

（2）实验表明，加入酵母菌的实验组制作的泡菜风味更佳，发酵效果更好，推测原因可能是____________（至少两个方面）。

（3）酵母菌的接种量是本实验的关键因素，过多的酵母菌就会在发酵早期通过产生的酒精抑制乳酸菌的活动，若要探究发酵液中种群数量的变化，通常采用____________的方法进行调查，对酵母菌的数量统计可采用____________法，还可以利用____________法统计活菌形成的菌落的数目，一般后者统计的结果往往偏低，其原因是____________________________________。

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泡菜是一种历史悠久的大众喜爱的发酵蔬菜制品，但近年科学研究发现，蔬菜在腌制过程的某些阶段会产生较多的亚硝酸盐。乳酸菌是泡菜生产中的主要生产菌种，不同乳酸菌的繁殖周期不同。某兴趣小组希望获得生产周期短、亚硝酸盐含量低的泡菜。在一定的环境条件下，对此进行了相关研究。（假设不同乳酸菌在一个繁殖周期中产乳酸量相近。）

⑴从实验目的分析，研究需要解决的问题主要有________、________。

选取6种泡菜老液，筛选优良的乳酸菌菌种。筛选示意路线图如下：

⑵乳酸菌的培养条件除了适宜的温度、pH之外，还必须保证___________条件。

⑶初筛、复筛宜选择__________（固体或液体）培养基，当复筛的培养基中出现________即可接种到斜面保藏。 增值培养宜选择__________（固体或液体）培养基。

测定亚硝酸盐含量：取6组相同的泡菜坛，每个坛中加入等量 的冼净灭菌的新鲜蔬菜，再分别倒入等量的煮沸已冷却的10%盐水和等量的乳酸菌（分别从泡菜老液中筛选所得）。封坛前测定亚硝酸盐含量，封坛后置于同一环境中。

⑷在腌制过程中，坛中会出现溶液量增多现象，主要原因是________。

⑸封坛一段时间后，需要开坛测定亚硝酸盐含量的变化，并进行实验数据记录，请设计实验记录表：

⑹根据上述的实验结果，筛选合适的乳酸菌作为菌种来制作泡菜。而最佳食用泡菜的时间，应该选择

________时间段。

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泡菜是我国的传统食品之一，但制作过程中产生的亚硝酸盐对人体健康有潜在危害。

根据实验研究，得到相关数据如下图。

（1）与酵母菌相比，乳酸菌最主要的结构特点是___　　 _　 _。

（2）制作泡菜的原理是___　　 _；制作泡菜时，泡菜坛一般用水密封，目的是___　　 _　 。

（3）据图分析，第8天后的泡菜更适于食用，理由是___　　 _　 。可用___　　 _　 法检测泡菜中亚硝酸盐的含量，因为亚硝酸盐能与某些化学物质发生反应后形成___　　 _　 色染料。

（4）若要测定泡菜中乳酸菌的数量，可在显微镜下用___　　 _　　 直接计数；泡菜制作过程中pH值呈下降趋势，原因是___　　 _　 。

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为了从泡菜汁中筛选分离出发酵产酸速度快、亚硝酸盐降解能力强的乳酸菌，科研人员做了如下实验（实验室中常用MRS培养基培养乳酸菌，在加入CaCO₃的MRS培养基中，菌落周围能形成透明圈）。

请回答问题：

（1）在无菌操作下，使用无菌水对泡菜汁进行_________，将不同稀释度的泡菜汁涂布于添加了CaCO₃的乳酸细菌培养基（MRS培养基）平板上。在适宜条件下培养后，挑取有_________________的菌落，立即继续在MRS平板上用________法分离，得到单菌落。

（2）加入CaCO₃的MRS培养从功能上看属于________培养基。取分离到的乳酸菌接入MRS液体培养基中，间隔取样测定pH，目的是筛选出_______________的乳酸菌。

（3）取上一步筛选出的乳酸菌接入含有NaNO₂的MRS培养基中，培养一段时间后，用比色方法测定NaNO₂的含量，筛选出_____________的菌株。

（4）乳酸菌细胞结构的最主要特点是___________，其代谢类型为__________。

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