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（三）回答下列与微生物培养有关的问题。
漆酶是一种存在于真菌、细菌中的氧化酶，可用于有毒化合物的生物消除。研究人员为提高产漆酶菌株C63的产酶量，对其培养条件进行优化研究。
Ⅰ.培养基成分的优化研究
为确定最佳的营养成分组合，科研人员配制了9组以A、B为主要营养成分的培养基，并添加0.04%的愈创木酚（被氧化后形成红褐色）。接种C63培养后，结果如表所示。
1.据表分析， 9组培养基中A物质为菌体提供的主要营养成分是___________；实验组6中的成分A、B分别是__________、____________。按功能来分，此培养基的类型为____________。
2.据培养结果分析，营养成分的最佳组合是实验组_______，判断依据_________。
3.调节培养基的pH值应在_______（填编号）进行。
①灭菌前 ②灭菌后倒平板前 ③倒平板后接种前 ④接种后
4.据图12分析，为获得最多的漆酶，C63的最佳培养方案是________________。
5.经一系列培养环境的优化，C63产漆酶量有所提高。在此基础上，要获得产酶更高的菌株，可采取的育种方法是_______________。
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漆酶是真菌、细菌中的氧化酶，可用于有毒化合物的生物消除。为提高产漆酶菌株（C1）的产酶量，对其培养条件进行优化研究。
Ⅰ.培养基成分的优化研究：为确定最佳的营养成分组合，科研人员配制了9组以A、B为主要营养成分的培养基，并添加0.04%的愈创木酚（被氧化后形成红褐色）。接种C1培养后，结果如下表所示。
| 实验组 | 营养成分 | 培养结果（mm） |
| A（20g/L） | B(2.84g/L) | 显色圈直径 |
| 1 | 葡萄糖 | 蛋白胨 | 37 |
| 2 | 葡萄糖 | (NH4)2SO4 | 49 |
| 3 | 葡萄糖 | KNO3 | 23 |
| 4 | 蔗糖 | 蛋白胨 | 25 |
| 5 | 蔗糖 | (NH4)2SO4 | 52 |
| 6 | ？ | ？ | 32 |
| 7 | 麦芽糖 | 蛋白胨 | 58 |
| 8 | 麦芽糖 | (NH4)2SO4 | 56 |
| 9 | 麦芽糖 | KNO3 | 55 |
（1）实验组6中的成分A、B分别是________。
（2）据培养结果分析，营养成分的最佳组合是实验组_______，阐述理由_________。
Ⅱ.培养基pH值的优化研究：选取最佳营养成分组合，配制成pH值为3.0、5.0、7.0的三种液体培养基，接种等量C1菌体并培养一段时间，定期取样测定培养基中漆酶量（以酶活力表示），结果如下图所示。
（1）调节培养基的pH值应在_____________（填编号）进行。
①灭菌前②灭菌后倒平板前③倒平板后接种前④接种后
（2）据上图分析，为获得最多的漆酶，C1的最佳培养方案是_________。
Ⅲ.经一系列培养环境的优化，C1产漆酶量有所提高。在此基础上，要获得产酶更高的菌株，可采取的育种方法是__________。
（1）下图表示培养和分离某种细菌的部分操作步骤，下列叙述正确的是（______）。
A．步骤①倒平板操作时，倒好后应将其倒过来放置
B．步骤②接种环火焰上灼烧后迅速蘸取菌液后划线
C．步骤③三个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落
D．步骤④恒温培养箱培养后可用来对大肠杆菌进行计数
（2）借助光学显微镜来观察微生物细胞的结构，发现了一种新的单细胞生物，并欲对其进行分类，下列选项不能作为分类依据的是（_________）。
A．核膜的有无B．核糖体的有无 C．细胞壁的有无D．膜上磷脂的有无
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（二）回答下列有关微生物培养的问题。
某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难于降解的有机化合物A，研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）。实验的主要步骤如图所示。
1.培养基中加入化合物A的目的是________，这种培养基属于________培养基。
2.“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的________，同时，实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是________。
3.培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量_______的培养液，接入新的培养液中连续培养，使“目的菌”的数量________。
4.转为固体培养基培养时，常采用_________的方法接种，获得单菌落后继续筛选。
5.在培养基的配制过程中，操作方法包括以下步骤，其正确顺序为 。
①溶解 ②调pH值 ③定容 ④包扎 ⑤培养基的分装 ⑥称量 ⑦灭菌
A. ①②⑥⑤⑦③④ B. ⑥①③②⑤④⑦
C. ⑥①②⑤④⑦③ D. ①②⑤④⑥⑦③
6.实验结束后，使用过的培养基应该进行_______处理后，才能倒掉，这样处理的目的是_______。
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分析有关微生物的资料，回答问题并完善实验设计方案。（10分）
脂肪酶具有广泛的应用前景，为获得 高产脂肪酶的菌株，并将之用于产业化，进行如下的系列实验。
1.欲分离筛选出能分泌脂肪酶的细菌，应选择下列固体培养基（仅列出了碳氮源）中的___。
A.蛋白胨、柠檬酸铁铵 B.橄榄油、硫酸铵
C.乳糖、酵母膏 D.葡萄糖、蛋白胨
2.进一步调查适合于产脂肪酶菌株生长的碳氮源。根据表2的实验数据，选择理想的碳源为______。
3.补全表3中的实验方案，以确定所选碳源的最佳浓度（设浓度梯度的差值为0.2%）。
4.利用相似方法探得理想碳源的最佳浓度，在进一步确定碳氮源浓度的最佳组合。以a和b分别代表碳源和氮源的浓度，假设酶活a1>a2>a3;b2>b3>b4，据此形成下列四种方案，其中最佳的是_______。
方案一：a1和b2组合。
方案二：将每一种a的浓度分别与b2、b3、b4组合，根据酶活取其中的最佳组合。
方案三：a1和b2组合，a2和b3组合，根据酶活取其中的最佳组合。
方案四：a1分别与每种氮源浓度组合，b2分别与每种碳源浓度组合，根据酶活取其中的最佳组合。
5.如果脂肪酶的产业化需要其活性在固定化处理时不受损失，且在多次重复使用后仍能维持稳定的酶活，则应选择图中的_______固定化工艺。.
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回答下列有关微生物的问题。（9分）
Ⅰ.苯酚(C6H5OH)是广泛存在于化工行业废水中的一种污染物。为了分离和纯化高效分解苯酚的细菌，科研人员进行了如下图所示的实验。
（1）该实验中步骤②使用了LB培养基，其主要成分是胰蛋白胨、酵母提取物和氯化钠，请推测步骤②的目的是 。
（2）该实验步骤③中的培养基成分的与LB最大区别是以苯酚作为唯一的________。
（3）在接种过程中需要严格保证无菌操作，请举出两例 、 。
（4）步骤④的目的是_____________________。
Ⅱ.某种链球菌能引起人的咽喉感染，研究人员欲测试一种新抗生素（P）对该种链球菌的杀菌效果。将此链球菌分别接种在三个培养皿中，在2号培养皿中放入一片浸过抗生素（P）的滤纸圆片，在3号培养皿中放入没有浸抗生素的滤纸圆片，如下图所示。
（5）三个培养皿中，实验项是____________________，对照项是________________________；
判断实验项的理由是____________________________________________________________。
（6）培养皿3中的小圆片在放置前需做处理，具体步骤是：_________________________。
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酸奶深受消费者靑睐，但生产酸奶的过程中会产生大量的食物残渣--液态乳清。某种细菌能将酸奶渣中的糖和酸转化成生物燃料，研究人员欲分离提纯该种细菌用于研究。请回答下列问题：
（1）在培养该细菌的过程中，常采用___________法对培养基进行灭菌。将细菌接种到培养基之前，需要检测培养基是否被污染采取的方法是___________。
（2）可通过观察培养基上菌落的___________（答出两点即可）等特征来判断是否出现了该种细菌。在培养过程中，为避免因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目，应采取的措施是___________。
（3）提纯该种细菌时，常采用___________和___________两种方法进行接种。获取纯净培养物的关键是___________。
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硝基苯酚（PNP）是硝基苯酚类化合物中的一种，呈黄色，对动植物、微生物均有毒性。某研究小组欲从废弃物中分离筛选能高效降解硝基苯酚（PNP）的菌株。回答下列问题。
（1）各种微生物培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、_________（答出两点即可）。要从废弃物中对硝基苯酚（PNP）降解菌进行分离，应在以适量的_________为唯一碳源的培养基中培养。
（2）把从废弃物中采集的样品进行接种、连续富集、转接等操作，最后通过_________（填方法）接种到配制好的迭择培养基中，以便对菌落进行分离和计数，可通过_______（填颜色）消失的情况判断菌株的降解能力，进而筛选出高效菌株。
（3）研究和应用微生物的前提是________________________。在实验室培养微生物时，对玻璃器皿和试管口等容易被污染的部位常用的灭菌方法分别是________________。
（4）微生物接种的方法很多，在平板划线操作时，每次划线之前都要灼烧接种环，原因是_____________________。
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生物脱硫法是利用微生物产生的酶分解有机硫化物，为获得适合的硫氧化细菌，研究人员采用模拟硫化物废水作为硫源富集培养，经分纯化得到硫氧化细菌菌株tl-7，并对其脱硫能力进行了研究，请回答下列问题：
（1）配置硫化物富集培养液，连续培养7天。为了从富集液中得到菌株，倒平板操作时，培养基_________后应将其倒过来放置。划线时，可进行Z型划线，使接种物逐渐稀释，目的是培养后能出现_________。
（2）富集培养液经多次分离筛选得到具有脱硫能力的菌株tl-7，其生长曲线如图一，据图分析，该菌株25h后进入_________期，42h后进入_________。
（3）为研究菌株tl-7脱硫能力与环境中有机硫含量的关系，应将其在_________的有机硫化物中培养一定时间后，测量培养液中_________。
（4）为进一步研究不同氮源对菌株生长量以及脱硫效果的影响，研究人员选择三种有机氮源和三种无机氮源分别培养，写出三种有机氮源_________。图二中1-3组为有机氮源、4-6组为无机氮源，据图分析，有机氮源的菌株生长量_________（高于/低于）无机氮源，同时有机氮源对菌株脱硫活性有_________作用。
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胡萝卜素可用于治疗因缺乏维生素A而引起的各种疾病，也是常用的食品色素。为了降低胡萝卜素的生产成本，某科研人员试图从光合细菌中提取胡萝卜素，实验流程如下图所示。回答下列问题：
（1）微生物培养基一般都含有水、无机盐、碳源和氮源四大营养要素，该实验所用培养基中不需要添加的营养要素是___
（2）若固体平板培养基上菌落数目过多而连成一片，原因可能是___（答出一种即可），请提出解决此问题的合理措施___
（3）若需对光合细菌进行活菌计数，则②过程应采用的接种方法是___
（4）从干燥的菌体中提取胡萝卜素常采用萃取法，萃取剂应具有的主要特点是___
（5）对萃取液进行浓缩时可直接使用蒸馏装置，浓缩时广口瓶中收集到的是___，在浓缩之前，还必须对萃取液进行的操作是___
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漆酶是一种胞外氧化酶，具有很强的降解木质素的能力，可用于处理造纸厂排放的污水。研究人员从不同环境地表上采集土壤、腐烂的树枝等接种到MEA培养基上，经过一系列分离纯化，最终筛选出了高产漆酶的白腐真菌。请回答下列问题：
（1）MEA培养基用于白腐真菌的筛选，则培养基中应加入链霉素以抑制__________的生长，加入了链霉素的培养基属于__________培养基。
（2）将MEA培养基上疑似白腐真菌的菌株用平板划线接种到新的培养基上，培养一段时间后会观察到菌落。菌落的含义是__________。
（3）实际生产中，通过培养白腐真菌获取的漆酶蛋白往往与其它物质混合在一起。因此，得到漆酶的粗提取物后，先要通过__________和__________法进行纯化，再通过__________鉴定漆酶的纯度。
（4）用于生产实践前，还需要测定纯化后的漆酶的活性。漆酶的活性以__________来表示。
（5）游离的漆酶稳定性差，在环境中易受温度、pH等因素的影响，且不易分离和回收，这在一定程度上限制了漆酶的工业化应用。请根据所学知识提出一项解决措施：__________。