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【生物——选修1：生物技术实践】
新鲜的泡菜滤液中含有乳酸菌，可作为实验材料分离纯化乳酸菌。请回答下列问题：
（1）分离纯化乳酸菌时，首先需要用无菌水对泡菜滤液进行______，这样做的理由_________。
（2）分离纯化所用的固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙，从而使培养基在分离纯化过程中形成_________。
（3）若要长期保存乳酸菌，菌液中常需要加入一定量的_____（填“蒸馏水”“甘油”或“碳酸钙”），且要放置在_________（填“-5”“-20”或“-100”）℃的冷冻箱中。若要短期保存乳酸菌，可将菌种接种到试管的_________（填“溶液中”“固体培养基表面上”或“固体斜面培养基上”），菌落长成后，将试管放置在______（填“-4”“0”或“4”）℃的冰箱中保藏。
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[生物——选修1，生物技术实践]某兴趣小组用新鲜的泡菜滤液为实验材料，分离纯化乳酸菌。并査阅相关资料得到如图所示的数据。
请回答下列问题：
(1)第3天至第5天乳酸菌种群数量保持稳定，从种群的数量特征分析，其原因是_______________。
(2)图中第3天pH开始下降，原因是乳酸菌发酵过程中产生__________。制作泡菜过程中泡菜坛一般用水密封，目的是___________________。
(3)若取第4天的新鲜泡菜滤液，用于分离纯化乳酸菌，首先需要用______对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是____________。
(4)分离纯化所用固体培养基中常添加碳酸钙，导致培养基不透明，而乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。可推测培养基中加入碳酸钙的作用是______________，分离纯化时应挑选出_________的菌落作为候选菌。
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某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。回答下列问题：
（1）分离纯化乳酸菌时，首先需要用_________________对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是_________________。
（2）推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有_________________和_________________。分离纯化时应挑选出_________________的菌落作为候选菌。
（3）乳酸菌在-20 ℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的_________________（填“蒸馏水”、“甘油”或“碳酸钙”）。
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某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。回答下列问题：
（1）分离纯化乳酸菌时，首先需要用_________________对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是______________。
（2）推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有______________和_______________。分离纯化时应挑选出_________________的菌落作为候选菌。
（3）乳酸菌在-20 ℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的_________________（填“蒸馏水”、“甘油”或“碳酸钙”）。
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某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸菌能溶解培养基中的碳酸钙。回答下列问题：
（1）分离纯化乳酸菌时，首先需要用_________________对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是_________________。
（2）推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有_________________和_________________。分离纯化时应挑选出_________________的菌落作为候选菌。
（3）乳酸菌在-20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的_________________（填“蒸馏水”、“甘油”或“碳酸钙”）。
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某学校有三个兴趣小组，第一小组用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌；第二小组从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌单菌落；第三小组从土壤中筛选产脲酶细菌。请回答下列问题：
（1）第一小组分离纯化乳酸菌时，首先用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释的理由是____________________。分离纯化乳酸菌所用固体培养基中加入____________可中和产生的乳酸，分离纯化时选择具有透明圈的菌落作为候选菌。
（2）第二小组土壤采样后，通过选择培养增加纤维素分解菌的浓度，之后，在培养基中加入____________进行颜色反应直接筛选纤维素分解菌，该培养基从功能上看属于_________，为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行_________的实验。
（3）第三小组选择培养基应该以__________为唯一氮源，鉴别培养基需添加__________作为指示剂。在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为105的土壤样品0．1mL，培养一段时间统计菌落数量。该过程采取的接种方法是__________。
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【生物——选修1：生物技术实践】某研究小组从泡菜浸泡液中分离出两种不同的乳酸菌（植物乳酸杆菌和布氏乳酸杆菌），并探究接种不同乳酸菌泡菜中亚硝酸盐含量的变化趋势，结果如下图。请回答。
(l)分离和纯化细菌的接种方法有____，通过观察菌落的____（至少答3点）特征区分不同种类的细菌。
(2)泡菜发酵过程中，分析图中第1～2天亚硝酸盐含量变化的原因是____； 第2～5天亚硝酸盐含量变化的原因是____。
(3)制作果酒时利用的微生物主要是________，制作腐乳的过程中，主要是利用毛霉等微生物分泌的____ 等物质。
(4)泡菜制作和果醋制作的最终产物是________（答“单一”或“多种”）组分。
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回答下列（一）、（二）小题：
（一）某同学用新鲜的泡菜汁为实验材料分离纯化出乳酸菌，用来生产酸奶。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。
（1）分离纯化乳酸菌时，首先需要用__________对泡菜汁进行梯度稀释，然后采用__________法进行分离，可获得乳酸菌的单菌落。
（2）推测分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有__________和__________。分离纯化时应挑选出__________的菌落作为候选菌。
（3）获得纯化的乳酸菌后，可以利用纯牛奶作为原料制作酸奶，发酵常在__________（A．有氧+常温 B．无氧+常温 C．有氧+低温 D．无氧+低温）条件下进行。如果使用的是加了某些抗生素的纯牛奶作原料制酸奶，很有可能会发酵成怪味“酸奶”，其原因可能是__________。
（二）科学家用转基因方法培育“巨型小鼠”。图1为含大鼠生长激素基因的DNA及限制酶切割位点示意图；图2为含有相应标记基因和限制酶切割位点的质粒示意图，其中nptII为卡那霉素抗性基因，Tc为四环素抗性基因，lacZ为蓝色显色基因，复制原点是质粒上必需的一段复制起始的序列，与重组质粒的自主复制有关。图3是转基因过程中的一个步骤。
（1）根据图1，在获得目的基因时，应使用限制酶__________（PvuⅠ / EcoRⅠ）进行切割。可以选择图2中的质粒__________（A / B）作为目的基因的载体，理由是__________。
（2）图3表示基因工程中将重组DNA分子导入受体细胞的过程，该步骤采用的技术方法是__________，通常选择__________作为受体细胞。
（3）获得含目的基因的细胞后，该细胞需要进行__________。然后再进行移植，通常移植最适宜的时期是发育到__________（A．2细胞胚胎 B．4细胞胚胎 C．早期囊胚 D．原肠胚）。再经分娩产仔就可以获得“巨型小鼠”。
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[生物—选修1：生物技术实践]
乳酸菌能产生亚硝酸还原酶将亚硝酸盐分解，某兴趣小组从泡菜滤液中筛选出亚硝酸盐还原酶活力较高的乳酸菌，进行了相关实验。请回答下列问题：
（1）乳酸菌生长繁殖所需要的主要营养物质有氮源、_________、_________和________四类，分离、纯化乳酸菌所用的选择培养基以亚硝酸盐为唯一氮源，进入乳酸菌的亚硝酸盐的主要作用是___________________________。
（2）将筛选出的乳酸菌，用于泡菜制作过程，进行食盐用量与亚硝酸盐含量的探索实验，结果如图。
①泡菜制作过程中，pH呈下降趋势，原因是____________________________________。
②据图可知，腌菜时食盐的浓度越低，亚硝酸盐含量的峰值出现的越早，且峰值较高，原因是__。
③实验结果说明，食盐用量和___________影响亚硝酸盐含量，亚硝酸盐含量达到峰值后下降，一方面是因为_______环境抑制杂菌生长，使亚硝酸盐的产生量降低；另一方面是因为____________。
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酸奶、泡菜的制作都离不开乳酸菌，其代谢产物乳酸菌素（小分子蛋白质）和柚皮中的柚皮精油均有抑菌作用，两者的提取及应用如图所示。
（1）某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料纯化乳酸菌，分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。分离纯化乳酸菌时，首先需要用________对泡菜滤液进行梯度稀释，分离纯化时应挑选出_____________的菌落作为候选菌。若用稀释涂布平板法统计单位体积泡菜液中乳酸菌的数量，统计的菌落数往往比活菌的实际数目______，原因是_________________________________________________。
（2）通常不用水中蒸馏法提取柚皮精油，是因为_________________________________________，该过程得到的糊状液体可通过__________初步除去其中的固体物和残渣。
（3）抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的____________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。
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