某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透...

某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。回答下列问题：

（1）分离纯化乳酸菌时，首先需要用_________________对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是_________________。

（2）推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有_________________和_________________。分离纯化时应挑选出_________________的菌落作为候选菌。

（3）乳酸菌在-20 ℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的_________________（填“蒸馏水”、“甘油”或“碳酸钙”）。

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某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。回答下列问题：

（1）分离纯化乳酸菌时，首先需要用_________________对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是______________。

（2）推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有______________和_______________。分离纯化时应挑选出_________________的菌落作为候选菌。

（3）乳酸菌在-20 ℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的_________________（填“蒸馏水”、“甘油”或“碳酸钙”）。

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某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸菌能溶解培养基中的碳酸钙。回答下列问题：

（1）分离纯化乳酸菌时，首先需要用_________________对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是_________________。

（2）推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有_________________和_________________。分离纯化时应挑选出_________________的菌落作为候选菌。

（3）乳酸菌在-20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的_________________（填“蒸馏水”、“甘油”或“碳酸钙”）。

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回答下列（一）、（二）小题：

（一）某同学用新鲜的泡菜汁为实验材料分离纯化出乳酸菌，用来生产酸奶。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。

（1）分离纯化乳酸菌时，首先需要用__________对泡菜汁进行梯度稀释，然后采用__________法进行分离，可获得乳酸菌的单菌落。

（2）推测分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有__________和__________。分离纯化时应挑选出__________的菌落作为候选菌。

（3）获得纯化的乳酸菌后，可以利用纯牛奶作为原料制作酸奶，发酵常在__________（A．有氧+常温 B．无氧+常温 C．有氧+低温 D．无氧+低温）条件下进行。如果使用的是加了某些抗生素的纯牛奶作原料制酸奶，很有可能会发酵成怪味“酸奶”，其原因可能是__________。

（二）科学家用转基因方法培育“巨型小鼠”。图1为含大鼠生长激素基因的DNA及限制酶切割位点示意图；图2为含有相应标记基因和限制酶切割位点的质粒示意图，其中nptII为卡那霉素抗性基因，Tc为四环素抗性基因，lacZ为蓝色显色基因，复制原点是质粒上必需的一段复制起始的序列，与重组质粒的自主复制有关。图3是转基因过程中的一个步骤。

（1）根据图1，在获得目的基因时，应使用限制酶__________（PvuⅠ / EcoRⅠ）进行切割。可以选择图2中的质粒__________（A / B）作为目的基因的载体，理由是__________。

（2）图3表示基因工程中将重组DNA分子导入受体细胞的过程，该步骤采用的技术方法是__________，通常选择__________作为受体细胞。

（3）获得含目的基因的细胞后，该细胞需要进行__________。然后再进行移植，通常移植最适宜的时期是发育到__________（A．2细胞胚胎 B．4细胞胚胎 C．早期囊胚 D．原肠胚）。再经分娩产仔就可以获得“巨型小鼠”。

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酸奶、泡菜的制作都离不开乳酸菌，其代谢产物乳酸菌素（小分子蛋白质）和柚皮中的柚皮精油均有抑菌作用，两者的提取及应用如图所示。

（1）某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料纯化乳酸菌，分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。分离纯化乳酸菌时，首先需要用________对泡菜滤液进行梯度稀释，分离纯化时应挑选出_____________的菌落作为候选菌。若用稀释涂布平板法统计单位体积泡菜液中乳酸菌的数量，统计的菌落数往往比活菌的实际数目______，原因是_________________________________________________。

（2）通常不用水中蒸馏法提取柚皮精油，是因为_________________________________________，该过程得到的糊状液体可通过__________初步除去其中的固体物和残渣。

（3）抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的____________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。

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某同学用新鲜酸奶为实验材料初步分离纯化乳酸菌．分离纯化所用固体培养基中因含有15%的脱脂乳而不透明，乳酸菌能分解利用培养基中的蛋白质等物质．回答下列问题

（1）培养基的组成成分除乳酸菌生长繁殖所需的营养物质外，还必须添加_____．

（2）推测培养基中加入脱脂乳的作用是_____，_____．

（3）分离纯化如果用稀释涂布平板法，梯度稀释时应该用_____对酸奶进行稀释．

（4）分离纯化如果用平板划线法，首次划线灼烧接种环的目的是_____，为保证得到单个细菌繁殖而来的菌落，操作时必须做到①_____；③从第二次开始_____．

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某同学用新鲜的果醋为实验材料分离纯化醋酸菌。分离纯化用的固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，醋酸菌产生的醋酸能够溶解培养基中的碳酸钙。回答下列问题：

（1）醋酸菌是一种好氧细菌，当氧气充足时，醋酸菌能够将乙醇变为_______、最终变为醋酸，醋酸菌在变酸的酒的表面大量繁殖会形成______________。

（2）分离纯化醋酸菌时，首先让新鲜果醋经过滤膜，如图甲所示，图中滤膜的孔径应_______（填“大于”或“小于”）醋酸菌，将滤膜贴于醋酸菌的分离培养基上，培养一段时间，观察菌落形态和透明圈大小。

（3）图乙两个平板中能够表现该方法得到的培养结果的是图_____，经观察发现，在平板上不同菌落的形态和透明圈大小都存在明显差异原因是___________。

（4）为获得产酸能力强的醋酸菌，应选择透明圈_______（填“大”或“小”）的菌落进行进一步的分离纯化操作。此时可以用________挑取部分菌株，在固体培养基上进行连续划线操作。

（5）由于研究的醋酸菌带有一定的未知性，因此要注意进行规范的无菌操作，实验后一定要洗手，目的是防止___________________。

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【生物——选修1：生物技术实践】

新鲜的泡菜滤液中含有乳酸菌，可作为实验材料分离纯化乳酸菌。请回答下列问题：

（1）分离纯化乳酸菌时，首先需要用无菌水对泡菜滤液进行______，这样做的理由_________。

（2）分离纯化所用的固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙，从而使培养基在分离纯化过程中形成_________。

（3）若要长期保存乳酸菌，菌液中常需要加入一定量的_____（填“蒸馏水”“甘油”或“碳酸钙”），且要放置在_________（填“-5”“-20”或“-100”）℃的冷冻箱中。若要短期保存乳酸菌，可将菌种接种到试管的_________（填“溶液中”“固体培养基表面上”或“固体斜面培养基上”），菌落长成后，将试管放置在______（填“-4”“0”或“4”）℃的冰箱中保藏。

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乳酸菌和我们的生活紧密相连，现欲从泡菜滤液中分离乳酸菌。请回答下列相关问题。

（1）要纯化培养乳酸菌，在配制固体培养基时，除了要加入各种营养物质外，一般还要加入________。培养基中的碳酸胺___________（能/不能）为组装均提供碳源，原因是______________________。

（2）纯化培养乳酸菌时，可采用___________法进行接种。为了能鉴别乳酸菌菌落，往往在配制培养基时加入碳酸钙，原因是______________________。

（3）若要调查统计泡菜滤液中微生物的浓度，要设置空白对照组和多个实验组，若某个实验组平板上菌落平均数为46个/平板，而空白对照组中一个平板上出现了6个菌落，这种结果说明此次调查出现了____现象。那么这次调查数据如何处理_________________________________。

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某学校有三个兴趣小组，第一小组用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌；第二小组从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌单菌落；第三小组从土壤中筛选产脲酶细菌。请回答下列问题：

（1）第一小组分离纯化乳酸菌时，首先用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释的理由是____________________。分离纯化乳酸菌所用固体培养基中加入____________可中和产生的乳酸，分离纯化时选择具有透明圈的菌落作为候选菌。

（2）第二小组土壤采样后，通过选择培养增加纤维素分解菌的浓度，之后，在培养基中加入____________进行颜色反应直接筛选纤维素分解菌，该培养基从功能上看属于_________，为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行_________的实验。

（3）第三小组选择培养基应该以__________为唯一氮源，鉴别培养基需添加__________作为指示剂。在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为105的土壤样品0．1mL，培养一段时间统计菌落数量。该过程采取的接种方法是__________。

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