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库尔勒香梨果实中存在游离态和结合态两大类呈香物质。结合态呈香物质大部分以糖苷形式存在，本身没有香气，但在糖苷酶的作用下能分解释放出具有挥发性的游离态呈香物质。若香梨在贮藏期间上述转变过程迅速，会导致部分香气成分丧失，影响果实的风味和品质。科研人员对一批成熟状态和大小相同的香梨在甲、乙、丙、丁四种贮藏条件下进行了相关实验，实验结果如下图所示，请分析回答：
（1）本实验的目的是探究__________________________对糖苷酶含量的影响。
（2）本实验的检测原理：
由于不同实验条件下香梨中的_________含量不同。所以对硝基苯酚含量不同。以上反应完成后，在对硝基苯酚的最佳吸收波长处测定的吸光值，与事先配制好的对硝基苯酚标准溶液的________进行比较，确定对硝基苯酚含量,然后可推算出不同实验条件下糖苷酶含量。
（3）实验步骤
提取样液：定期称取不同贮藏条件下的香梨样品，制成糖苷酶粗提取液，保存备用。
检测样液：将酶粗提取液和糖苷混合均匀，在pH 6.0、37℃条件下反应一定时间，在对硝基苯酚的最佳吸收波长处测定其吸光值。
①为了保持糖苷酶的活性，制备酶粗提取液过程最好在_______(低温/常温/高温）条件下进行。
②检测样液时，酶促反应箱控制在pH 6.0、37℃条件下，最可能的原因是_________________________。
（4）实验结果及结论：
①在贮藏期间四种不同条件下的香梨中游离态呈香物质均在贮藏_________天左右时相对较多。
②在__________________条件下贮藏时，香梨的风味和品质最佳。
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（6分）下图是大肠杆菌合成半乳糖苷酶过程的示意图。当无半乳糖存在时，阻遏蛋白R与启动子结合，不能合成半乳糖苷酶；当有半乳糖存在时，阻遏蛋白R与半乳糖结合，不能再与启动子结合，能合成半乳糖苷酶。
（1）启动子的基本组成单位是________，它具有________的结合位点。
（2）大肠杆菌中过程①进行的场所是________，过程②在________中完成。
（3）若半乳糖苷酶由n个氨基酸组成，控制其合成的基因碱基数________（大于／等于／小于）6n；其中有一段氨基酸序列为“—亮氨酸—缬氨酸—甘氨酸—”，转运这三种氨基酸的tRNA上的反密码子分别为GAU、CAG、CCU，则调节因子中决定该氨基酸序列的模板链碱基序列为________。
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野生型大肠杆菌（E．coli）具有完整的LacZ基因，该基因编码的β-半乳糖苷酶由α片段和ω片段两部分组成，两部分均存在时可将无色化合物X-gal切割成半乳糖和深蓝色的物质5-溴-4-靛蓝，从而使整个菌落变为蓝色。DH5α是基因工程中常用的一种大肠杆菌诱变菌株，对氨苄青霉素敏感，其LacZ基因中编码ω片段的序列仍然保留，但编码α片段的序列缺失。
（1）根据中心法则，LacZ基因控制β-半乳糖苷酶合成的过程主要包括_____和______两个环节。
（2）某研究小组构建了质粒pXY-1，如图甲所示，该质粒含氨苄青霉素抗性基因Ampr和编码大肠杆菌β-半
乳糖苷酶α片段的基因片段LacZ’。图乙显示的则是Nae I、Hpa II和Kas I三种限制性内切酶的识别序
列（
表示切割位点）。
若以该质粒作为运载体，将外源目的基因（图丙）导入大肠杆菌DH5α菌株，在构建重组质粒时应选用的限制性内切酶是______。此外，还需用到的另一种酶是______。
（3）若用涂布有氨苄青霉素和X-gal的固体培养基筛选上一题中含目的基因的受体菌，下列说法中正确的
有______。（多选）
A．没有导入任何质粒的DH5α细菌可以在该培养基上生长且菌落为白色
B．导入了pXY-1空载体质粒的DH5α细菌可以在该培养基上生长且菌落为蓝色
C．导入了pXY-1重组质粒的DH5α细菌可以在该培养基上生长且菌落为白色
D．导入了pXY-1重组质粒的DH5α细菌可以在该培养基上生长且菌落为蓝色
（4）．现从上一题的固体培养基平板上挑取一个重组菌落，经扩大培养后提取质粒，分别用不同的限制性内
切酶处理并对酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳，结果如表所示：
| 所用限制性内切酶 | 所得条带长度 |
| BamH I、Sca I双酶切 | 1230bp、2770bp |
| Hpa II、Sca I双酶切 | 460bp、1240bp、xbp |
分别用不同的限制性内
切酶处理并对酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳，结果如表所示：据此可知，目的基因全长为______bp，在其内部存在______（填限制酶名称）的切割位点，表中字母x代表的数值应为______。
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研究发现，M限制酶在大肠杆菌PUC18质粒(含氨苄青霉素抗性基因)的IacZ基因上存在唯一的酶切位点，如果IacZ基因没有插入外源基因，便可表达出β-半乳糖苷酶，当培养基中含有IPTG和Ⅹ-gal时，β-半乳糖苷酶能将Ⅹ-gal水解成蓝色，大肠杆菌将形成蓝色菌落，反之，则形成白色菌落。回答下列问题：
(1)已获得的目的基因可利用___________技术进行扩增，与体內DNA复制相比较，该反应要在___________中才能进行，并且要严格控制___________条件。
(2)构建重组质粒的过程中，需要用到的酶有___________。大肠杆菌需事先用Ca2+进行处理，目的是______________________。
(3)在选择培养基上加入IPTG、X-gal和氨苄青霉素，其巾氨苄青霉素的作用是筛选出____________。与“氨苄青霉素”筛选相比，“蓝白斑”筛选的优点是___________。若要挑取已导入目的基因的大肠杆菌，应选取___________色菌落。
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回答下列有关遗传信息传递与表达的问题．
野生型大肠杆菌（E．coli）具有完整的LacZ基因，该基因编码的β﹣半乳糖苷酶由α片段和ω片段两部分组成，两部分均存在时可将无色化合物X﹣gal切割成半乳糖和深蓝色的物质5﹣溴﹣4﹣靛蓝，从而使整个菌落变为蓝色．DH5α是基因工程中常用的一种大肠杆菌诱变菌株，对氨苄青霉素敏感，其LacZ基因中编码ω片段的序列仍然保留，但编码α片段的序列缺失．
（1）根据中心法则，LacZ基因控制β﹣半乳糖苷酶合成的过程主要包括 和 两个环节．
（2）某研究小组构建了质粒pXY﹣1，如图甲所示，该质粒含氨苄青霉素抗性基因Ampr和编码大肠杆菌β﹣半乳糖苷酶α片段的基因片段LacZ’．图乙显示的则是Nae I、Hpa II和Kas I三种限制性内切酶的识别序列（
表示切割位点）．
若以该质粒作为运载体，将外源目的基因（图丙）导入大肠杆菌DH5α菌株，在构建重组质粒时应选用的限制性内切酶是 ．此外，还需用到的另一种酶是 ．
（3）若用涂布有氨苄青霉素和X﹣gal的固体培养基筛选上一题中含目的基因的受体菌，下列说法中正确的有 ．（多选）
A．没有导入任何质粒的DH5α细菌可以在该培养基上生长且菌落为白色
B．导入了pXY﹣1空载体质粒的DH5α细菌可以在该培养基上生长且菌落为蓝色
C．导入了pXY﹣1重组质粒的DH5α细菌可以在该培养基上生长且菌落为白色
D．导入了pXY﹣1重组质粒的DH5α细菌可以在该培养基上生长且菌落为蓝色
（4）现从上一题的固体培养基平板上挑取一个重组菌落，经扩大培养后提取质粒，分别用不同的限制性内切酶处理并对酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳，结果如表所示：
| 所用限制性内切酶 | 所得条带长度 |
| BamHI、ScaI双酶切 | 1230bp、2770bp |
| HpaII、ScaI双酶切 | 460bp、1240bp、xbp |
据此可知，目的基因全长为 bp，在其内部存在 （填限制酶名称）的切割位点，表中字母x代表的数值应为 ．
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下列有关自由水和结合水的叙述，错误的是
A. 细胞中绝大部分水以游离的形式存在，可以自由流动，叫做自由水
B. 细胞中的一部分水与细胞内的其他物质相结合，叫做结合水
C. 一般情况下，细胞中结合水与自由水的比例越高，细胞的抗逆性就越强
D. 二糖的水解、ADP和Pi合成ATP都需要自由水作为反应物
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纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质，能被土壤中某些微生物分解利用。请回答：
（1）纤维素分解菌能产生________和葡萄糖苷酶以分解纤维素。其中，葡萄糖苷酶的作用是_________。
（2）利用刚果红染色法筛选纤维素分解菌的原理是___________，可通过培养基上_________来筛选纤维素分解菌。
（3）筛选纤维素分解菌时，应选择的土壤作为样品。若要对样品中的纤维素分解菌进行计数，可用____________法接种，该方法能够统计活菌数目的原因是______________。
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多孔陶瓷具有制备简单、廉价、高效、节能、环保及良品率高等优点。某科研小组对多孔陶瓷球固定化β-葡萄糖苷酶的条件进行研究，并将固定化酶的性质与游离酶进行比较，得到如下曲线。回答下列问题：
注：残余酶活性：在同组实验中，将处理（酸、热、冷藏、操作反应等）前的固定化酶或游离酶的活性记为100%，各实验点的值与该点的值之比，通常以百分数表示。
（1）固定化酶的方法一般包括_____________和物理吸附法；采用物理吸附法固定化酶，因条件温和，__________________________，且操作简便、载体廉价易得，可反复使用。根据酶的特性，固定化酶需要在_____________条件下保存。与固定化细胞相比，其主要缺点是__________。
（2）β-葡萄糖苷酶能催化硝基苯酚β-D—葡萄糖苷水解成对硝基苯酚，实验中一般要测定酶活力，该实验中测定β-葡萄糖苷酶活力时，可用单位时间内_____________________表示。
（3）从曲线分析能得出的结论是_________________________________。
（4）实验中固定化酶在pH为4.8时的残余酶活性稍低于游离酶，其可能的原因是_______________。
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请阅读下列材料，回答问题。
大肠杆菌pUC118质粒的某限制酶唯一酶切序列，位于该质粒的lacZ基因中。lacZ基因中如果没有插入外源基因，便可表达出-半乳糖苷酶。当培养基中含有A物质时，A物质便会被-半乳糖苷酶水解成蓝色，大肠杆菌将形成蓝色菌落；如果lacZ基因中插入了外源基因，带有pUC118质粒的大肠杆菌便不能表达-半乳糖苷酶，培养基中的A物质不会被水解成蓝色，大肠杆菌将形成白色菌落。pUC118质粒还携带了氨苄青霉素抗性基因。下图是利用lacZ基因筛选重组质粒示意图。
1．用图中的培养基中筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌，制备时除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外还应加入物质应包括（ ）（多选）
A．伊红美蓝试剂 B．琼脂 C．A物质 D．氨苄青霉素 E．四环素 F．噬菌体
2．将上述处理后的大肠杆菌置于图中培养基上培养，以检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒，结果可能出现蓝色或者白色菌落，其中 色大肠杆菌菌落即为含重组质粒的目的菌。
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库尔勒（新疆省）香梨甘甜美味，闻名各地，某实验小组研究了7月份（日均温最高）一天中香梨树形与光合作用的关系，结果如图所示，回答下列问题：
（1）9:00时疏散分层形香梨叶肉细胞产生[H]的场所是____，NADP+的移动方向是____。
（2）疏散分层形香梨叶片净光合速率最高峰大于自然开心形，分析其原因（不考虑色素和酶的差异）可能是________。
（3）研究发现7月两种树形净光合速率都低于8月份，其原因可能是____。9月份以后两种树形净光合速率都开始下降，其原因可能是____。
表示切割位点）。
表示切割位点）．