-
回答下列有关遗传信息传递与表达的问题．
野生型大肠杆菌（E．coli）具有完整的LacZ基因，该基因编码的β﹣半乳糖苷酶由α片段和ω片段两部分组成，两部分均存在时可将无色化合物X﹣gal切割成半乳糖和深蓝色的物质5﹣溴﹣4﹣靛蓝，从而使整个菌落变为蓝色．DH5α是基因工程中常用的一种大肠杆菌诱变菌株，对氨苄青霉素敏感，其LacZ基因中编码ω片段的序列仍然保留，但编码α片段的序列缺失．
（1）根据中心法则，LacZ基因控制β﹣半乳糖苷酶合成的过程主要包括 和 两个环节．
（2）某研究小组构建了质粒pXY﹣1，如图甲所示，该质粒含氨苄青霉素抗性基因Ampr和编码大肠杆菌β﹣半乳糖苷酶α片段的基因片段LacZ’．图乙显示的则是Nae I、Hpa II和Kas I三种限制性内切酶的识别序列（
表示切割位点）．
若以该质粒作为运载体，将外源目的基因（图丙）导入大肠杆菌DH5α菌株，在构建重组质粒时应选用的限制性内切酶是 ．此外，还需用到的另一种酶是 ．
（3）若用涂布有氨苄青霉素和X﹣gal的固体培养基筛选上一题中含目的基因的受体菌，下列说法中正确的有 ．（多选）
A．没有导入任何质粒的DH5α细菌可以在该培养基上生长且菌落为白色
B．导入了pXY﹣1空载体质粒的DH5α细菌可以在该培养基上生长且菌落为蓝色
C．导入了pXY﹣1重组质粒的DH5α细菌可以在该培养基上生长且菌落为白色
D．导入了pXY﹣1重组质粒的DH5α细菌可以在该培养基上生长且菌落为蓝色
（4）现从上一题的固体培养基平板上挑取一个重组菌落，经扩大培养后提取质粒，分别用不同的限制性内切酶处理并对酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳，结果如表所示：
| 所用限制性内切酶 | 所得条带长度 |
| BamHI、ScaI双酶切 | 1230bp、2770bp |
| HpaII、ScaI双酶切 | 460bp、1240bp、xbp |
据此可知，目的基因全长为 bp，在其内部存在 （填限制酶名称）的切割位点，表中字母x代表的数值应为 ．
-
野生型大肠杆菌（E．coli）具有完整的LacZ基因，该基因编码的β-半乳糖苷酶由α片段和ω片段两部分组成，两部分均存在时可将无色化合物X-gal切割成半乳糖和深蓝色的物质5-溴-4-靛蓝，从而使整个菌落变为蓝色。DH5α是基因工程中常用的一种大肠杆菌诱变菌株，对氨苄青霉素敏感，其LacZ基因中编码ω片段的序列仍然保留，但编码α片段的序列缺失。
（1）根据中心法则，LacZ基因控制β-半乳糖苷酶合成的过程主要包括_____和______两个环节。
（2）某研究小组构建了质粒pXY-1，如图甲所示，该质粒含氨苄青霉素抗性基因Ampr和编码大肠杆菌β-半
乳糖苷酶α片段的基因片段LacZ’。图乙显示的则是Nae I、Hpa II和Kas I三种限制性内切酶的识别序
列（
表示切割位点）。
若以该质粒作为运载体，将外源目的基因（图丙）导入大肠杆菌DH5α菌株，在构建重组质粒时应选用的限制性内切酶是______。此外，还需用到的另一种酶是______。
（3）若用涂布有氨苄青霉素和X-gal的固体培养基筛选上一题中含目的基因的受体菌，下列说法中正确的
有______。（多选）
A．没有导入任何质粒的DH5α细菌可以在该培养基上生长且菌落为白色
B．导入了pXY-1空载体质粒的DH5α细菌可以在该培养基上生长且菌落为蓝色
C．导入了pXY-1重组质粒的DH5α细菌可以在该培养基上生长且菌落为白色
D．导入了pXY-1重组质粒的DH5α细菌可以在该培养基上生长且菌落为蓝色
（4）．现从上一题的固体培养基平板上挑取一个重组菌落，经扩大培养后提取质粒，分别用不同的限制性内
切酶处理并对酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳，结果如表所示：
| 所用限制性内切酶 | 所得条带长度 |
| BamH I、Sca I双酶切 | 1230bp、2770bp |
| Hpa II、Sca I双酶切 | 460bp、1240bp、xbp |
分别用不同的限制性内
切酶处理并对酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳，结果如表所示：据此可知，目的基因全长为______bp，在其内部存在______（填限制酶名称）的切割位点，表中字母x代表的数值应为______。
-
大肠杆菌的质粒上含有LacZ基因，其编码的产物β半乳糖苷酶在x-gal和IPTG同时存在时，可以产生蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色，否则菌落呈现白色。下图为利用该质粒进行的转基因过程，回答下列问题：
(1)在基因工程中，大肠杆菌质粒通常作为___________,除此以外，基因工程操作还需要___________和___________两种工具。
(2)基因工程的核心操作步骤是______________________。
(3)本题中将目的基因导入受体细胞的方法是___________，目的基因在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为___________。
(4)加入了X-gal和IPTG培养基被称为___________培养基，能够筛选出含目的基因的菌落是___________(填“①”“②”或“③”)，颜色是___________。
-
大肠杆菌的质粒上含有lacZ基因，其编码的产物β-半乳糖苷酶在X-gal和IPTG同时存在时，可以产生蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色，否则菌落呈现白色。下图为利用该质粒进行的转基因过程，请据图回答下列相关问题：
（1）图中切割目的基因时用到________种限制酶，而切割质粒时用到的限制酶是______________。
（2）在基因工程的“四步曲”中，_________是基因工程的核心步骤，________的阶段没有碱基互补配对现象。
（3）图中的受体细胞是___________，其作为受体细胞的优点是___________(至少答出两点）。
（4）在培养基中加入X-gal和IPTG的目的是___________；结合题干信息，菌落①②③的颜色分别是__________、__________、____________。
-
许多大肠杆菌的质粒上含有lacZ′基因（内含EcoRI的酶切位点），其编码的产物β-半乳糖苷酶在X-gal 和IPTG存在下，可以产生蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色，否则菌落呈现白色。基因工程中常利用该原理从导入质粒的受体细胞中筛选出真正导入重组质粒的细胞，过程如图所示。请据图回答：
（1）限制酶EcoRⅠ的识别序列和酶切位点是-G↓AATTC-，SmaⅠ的识别序列和酶切位点是-CCC↓GGG-。图中目的基因被切割下来和质粒连接之前，需在目的基因的右侧连接相应的末端，连接的末端序列是_____________。
（2）转化过程中，大肠杆菌应先用_____________处理，使其成为 细胞。
（3）菌落①②③中颜色为白色的是__________，原因是________________________________。
（4）菌落③中的目的基因是否表达，可采用的检测办法是_____________。
-
回答下列有关遗传信息传递与表达的问题。
在图27所示的质粒PZHZ11（总长为3.6 kb，1 kb=1 000对碱基因）中，lacZ基因编码β-半乳糖苷酶，后者催化生成的化合物能将白色的大肠杆菌染成蓝色。
（1）若先用限制酶BamHI切开pZHZ11，然后灭活BamHI酶，再加DNA连接酶进行连接，最后将连接物导入足够数量的大肠杆菌细胞中，则含3.1 kb质粒的细胞颜色为 ；含3.6 kb质粒的细胞颜色为 。
（2）若将两端分别用限制酶BamHI和BglHI切开的单个目的基因片段置换pZHZ11中0.5 kb的BamHI酶切片段，形成4.9 kb的重组质粒，则目的基因长度为 kb。
（3）上述4.9 kb的重组质粒有两种形式，若用BamHI和EcoRI联合酶切其中一种，只能获得1.7 kb和3.2 kb两种DNA片段；那么联合酶切同等长度的另一种重组质粒，则可获得
kb和 kb两种DNA片段。
（4）若将人的染色体DNA片段先导入大肠杆菌细胞中克隆并鉴定目的基因，然后再将获得的目的基因转入植物细胞中表达，最后将产物的药物蛋白注入小鼠体内观察其生物功能是否发挥，那么上述过程属于 。
A.人类基因工程 B.动物基因工程 C.植物基因工程 D.微生物基因工程
-
回答下列有关遗传信息传递与表达的问题。（9分）
在图所示的质粒PZHZ11（总长为3.6 kb，1 kb=1000对碱基因）中，lacZ基因编码β-半乳糖苷酶，后者催化生成的化合物能将白色的大肠杆菌染成蓝色。
（1）若先用限制酶BamHI切开pZHZ11，然后灭活BamHI酶，再加DNA连接酶进行连接，最后将连接物导入足够数量的大肠杆菌细胞中，则含3.1 kb质粒的细胞颜色为 ；含3.6 kb质粒的细胞颜色为 。
（2）若将两端分别用限制酶BamHI和BglHI切开的单个目的基因片段置换pZHZ11中0.5 kb的BamHI酶切片段，形成4.9 kb的重组质粒，则目的基因长度为 kb。
（3）上述4.9 kb的重组质粒有两种形式，若用BamHI和EcoRI联合酶切其中一种，只能获得1.7 kb和3.2 kb两种DNA片段；那么联合酶切同等长度的另一种重组质粒，则可获得
kb和 kb两种DNA片段。
（4）若将人的染色体DNA片段先导入大肠杆菌细胞中克隆并鉴定目的基因，然后再将获得的目的基因转入植物细胞中表达，最后将产物的药物蛋白注入小鼠体内观察其生物功能是否发挥，那么上述过程属于 。
A.人类基因工程 B.动物基因工程 C.植物基因工程 D.微生物基因工程
-
如图所示的质粒PZHZ11（总长为4．0kb，1kb=1000对碱基因）中，lacZ基因编码β-半乳糖苷酶，后者催化生成的化合物能将白色的大肠杆菌染成紫色。
（1）若先用限制酶BamHI切开pZHZ11，然后灭活BamHI酶，再加DNA连接酶进行连接，最后将连接物导入足够数量的大肠杆菌细胞中，则含4．0kb质粒的细胞颜色为___________，含3．5kb质粒的细胞颜色为____________。
（2）若将两端分别用限制酶BamHI和BglHI切开的单个目的基因片段置换pZHZ11中0．5kb的BamHI酶切片段，形成5．0kb的重组质粒，则目的基因长度为____________kb。
（3）上述5．0kb的重组质粒有两种形式，若用BamHI和EcoRI联合酶切其中一种，只能获得2．0kb和3．0kb两种DNA片段；那么联合酶切同等长度的另一种重组质粒，则可获得_________kb和_________kb两种DNA片段。
（4）若将人的染色体DNA片段先导入大肠杆菌细胞中克隆并鉴定目的基因，然后再将获得的目的基因转入植物细胞中表达，最后将产物的药物蛋白注入小鼠体内观察其生物功能是否发挥，那么上述过程属于（ ）
A．人类基因工程 B．动物基因工程 C．植物基因工程 D．微生物基因工程
-
如图是利用lacZ基因的插入失活筛选重组质粒示意图。大肠杆菌pUC118质粒的某限制酶的唯一酶切序列位于该质粒的lacZ基因中。若lacZ基因完整，便可表达出-半乳糖苷酶，并能将培养基中含有的IPTG和X-gal水解成蓝色，形成蓝色菌落；若lacZ基因中插入了外源基因，带有pUC118质粒的大肠杆菌便不能表达-半乳糖苷酶，将形成白色菌落；pUC118还携带了氨苄青霉素抗性基因。请据图回答：
（1）作为受体的大肠杆菌应_______________，以便筛选已导入重组质粒的受体大肠杆菌。试管Ⅰ中的由两个DNA片段之间连接形成的产物有_______种。取用_______处理过的受体大肠杆菌，置于试管Ⅱ中，并加入在试管Ⅰ中制备好的DNA。
（2）图中的选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外，还应加入___________、______________和___________等物质，用以筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌。
（3）将上述处理后的大肠杆菌置于图中选择培养基上培养，以检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒，请预测菌落的颜色，并分析结果：
①如果长出_________菌落，说明自连的运载体pUC118质粒已转入受体菌，但目的基因没有接入运载体。
②如果长出_________菌落，说明重组质粒已导入受体大肠杆菌。
-
如图1表示某质粒，该质粒含有抗氨苄青霉素抗性基因（amp＇）和LacZ基因，LacZ基因能合成β-半乳糖苷酶，该酶能将白色底物X-Gal转化为蓝色产物，图2表示含目的基因的DNA片段，实验小组利用该质粒为载体将目的基因导入大肠杆菌，并筛选成功导入重组质粒的受体细胞（ScaⅠ、ApaⅠ、EcoRⅠ表示限制酶切割位点）。请回答下列问题：
（1）构建基因表达载体的目的是_________。在构建基因表达载体时应选用的限制酶是__________。
（2）将重组质粒导入大肠杆菌时，应用__________处理大肠杆菌，制备感受态细胞，实验室选用微生物作为受体细胞的优点是_________。
（3）重组质粒导入大肠杆菌后，应将大肠杆菌置于以X-Gal为底物，并添加_______________的培养基上培养，挑选出__________（填“白色”或“蓝色”）菌落。
（4）检测目的基因是否成功导入受体细胞常用的方法是__________，该方法依据的原理是__________。
表示切割位点）。
表示切割位点）．