欲研究细胞在培养瓶中培养适当时间后，产生的细胞总数、集落数与原培养细胞浓度的关系（集落是指...

欲研究细胞在培养瓶中培养适当时间后，产生的细胞总数、集落数与原培养细胞浓度的关系（集落是指贴壁生长的细胞增殖6代以上形成的细胞群体，肉眼可见），请完善实验思路，预测实验结果并进行分析与讨论。

村料与用具：未知浓度的X细胞悬液，动物细胞培养液，培养瓶若干，C02培养箱，血细胞计数板，显微镜，移液器，胰蛋白酶，染色剂等。

（要求与说明:细胞和集落计数、染色等具体过程不作要求，所用试剂的剂量不作要求，营养均满足要求，各种条件适宜）

（1）完善实验思路：

①____________________；

②据思路①，用动物细胞培养液稀释获得1000个/5mL、800个/5mL、600个/5mL、400个/5mL、200个/5mL、100个/5mL6种浓度的X细胞悬液；

③分别取5mL上述配制的6种浓度的X细胞悬液加到培养瓶中，每种浓度设若干重复样品，放入CO2培养箱中培养3周后，去除培养液并染色；

④____________________；

⑤____________________；

⑥____________________。

（2）预测实验结果：

若已知200个/5mL至800个/5mL浓度间，产生的集落数与原培养细胞浓度呈线性关系，但低于200个/5mL或高于800个/5mL的浓度将会偏离，请建立一个坐标系并画出集落数与原培养细胞浓度关系曲线。

（3）分析与讨论：

①高于800个/5mL的浓度会偏离线性关系的原因是_________________。

②低于200个/5mL会偏离线性关系的原因是___________，欲解决这种情况，可预先在培养瓶中制备一层_________细胞，以支持生长来提高效率。

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【加试题】蓝莓果实中富含花青素，研究表明花青素对癌细胞的增殖具有一定的抑制作用。为了研究不同浓度、不同时间的花青素的抑制效果，请利用以下材料进行探究。

实验材料：癌细胞悬液（含培养液）、蓝莓花青素（浓度200μg/ml)、生理盐水、卡氏瓶、血细胞计数板、显微镜等。

(要求与说明：2天内每隔12小时计数一次，计数具体操作过程不作要求；癌细胞置于卡氏瓶中培养；实验条件适宜）

(1)实验思路：________________。

……

(2)请设计一个表格用于记录实验数据________________。

(3)①除了利用血细胞计数板对癌细胞进行计数外，也可以利用___________测定癌细胞培养液的浑浊度。

②分析数据时，发现某个花青素浓度下的一组实验数据存在明显的偏差，如何处理？___________。

A.保留，继续求平均值　　　　 B.舍弃，其他组别求平均值

C.重新实验得到实验数据　　　 D.取中间值

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蓝莓果实中富含花青素，研究表明花青素对癌细胞的增殖具有一定的抑制作用。为了研究不同浓度、不同时间的花青素的抑制效果，请利用以下材料进行探究。

实验材料：癌细胞悬液(含培养液)、蓝莓花青素(浓度200 μg/mL)、生理盐水、卡氏瓶、血细胞计数板、显微镜等。

(要求与说明：2天内每隔12小时计数一次，计数具体操作过程不作要求；癌细胞置于卡氏瓶中培养；实验条件适宜)

(1)实验思路：______________________

(2)请设计一个表格用于记录实验数据。__________________

(3)①除了利用血细胞计数板对癌细胞进行计数外，也可以利用________测定癌细胞培养液的浑浊度。

②分析数据时，发现某个花青素浓度下的一组实验数据存在明显的偏差，如何处理？________。

A．保留，继续求平均值

B．舍弃，其他组别求平均值

C．重新实验得到实验数据

D．取中间值

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为研究某浓度的秋水仙酰胺对一种离体培养细胞增殖的影响，培养一段时间后细胞的计数结果如图。通过观察细胞分裂装片可进一步研究b峰细胞数目增加的原因。下列叙述正确的是

A．若实验组M期细胞数目比例未见增加，可能是G2期细胞的比例减少

B．若实验组M期细胞数目比例未见增加，可能是部分细胞染色体已经变为染色质

C．若实验组前、中期细胞数目比例增加，可能是秋水仙酰胺加速了着丝粒分裂

D．若实验组后、末期细胞数目比例增加，可能是秋水仙酰胺诱导了后期DNA加倍

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（题文）雪灵芝是青藏高原特有的野生药材．为研究雪灵芝提取物对人胃癌细胞增殖的影响，科研人员利用含不同浓度雪灵芝提取物的培养液培养人胃癌细胞，一段时间后检测胃癌细胞周期中各期细胞百分比，结果如表．下列叙述正确的是（　　）

（注：分裂间期分为G1、S、G2三个阶段，其中S期进行DNA复制；M为分裂期．）

A. 雪灵芝提取物可阻止胃癌细胞从G1期进入S期

B. 若用高倍显微镜观察发现胃癌细胞膜糖蛋白大量减少

C. 四组实验中c组胃癌细胞分裂期持续时间最长

D. d组雪灵芝提取物浓度为抑制胃癌细胞增殖最适浓度

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雪灵芝是青藏高原特有的野生药材，为研究雪灵芝提取物对人胃癌细胞增殖的影响，科研人员利用含不同浓度雪灵芝提取物的培养液培养人胃癌细胞，一段时间后检测胃癌细胞周期中各期细胞百分比，结果如图所示。下列叙述正确的是

注：分裂间期分为G1、S、G2三个阶段，其中S期进行DNA复制，M为分裂期。

A. 雪灵芝提取物可阻止胃癌细胞从G1期进入S期

B. 用高倍显微镜观察发现胃癌细胞膜糖蛋白大量减少

C. 四组实验中c组胃癌细胞分裂期持续时间最长

D. d组雪灵芝提取物浓度为抑制胃癌细胞增殖的最适浓度

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要想获得大量的单克隆抗体就必须用单个的B淋巴细胞进行无性繁殖形成细胞群，其原因是(　　)

A．在体外培养条件下，B淋巴细胞可以无限增殖

B．在动物体内B淋巴细胞可产生多达百万种以上的抗体

C．每一个B淋巴细胞都参与特异性免疫反应

D．每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体

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要想获得大量的单克隆抗体就必须用单个的B淋巴细胞进行无性繁殖，形成细胞群。其原因是（   ）

A.在体外培养条件下B淋巴细胞可以无限增殖

B.在动物体内B淋巴细胞可产生多达百万种以上的抗体

C.每一个B淋巴细胞都参与特异性免疫反应

D.每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体

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研究发现肿瘤细胞的生长增殖与端粒酶的活性有密切关系，为确定X、Y两种抑癌药物的作用机理，某科研小组进行了如下实验。请完成相关实验内容并回答问题。实验主要用品：悬浮培养的人肝癌细胞、溶于Z试剂中的X、Y药物制剂、相关培养和检测用具等（说明：Z试剂对细胞及药物作用不产生影响）

方法思路：

①将悬浮培养的人肝癌细胞均分甲、乙、丙三组

②甲组中加入适量的　　　　　 作为对照，乙、丙组中各分别加入 　　　　　　 X、Y药物制剂。

③在相同适宜的环境中培养一段时间，测定　　　　　　　　 。

实验结果：如下图l、2。

分析与讨论：

（1）由实验结果可推测人肝癌细胞中的端粒酶活性与细胞的生长增殖呈　　　　　 关系。

（2）实验测得Y药物组中的端粒酶活性与对照组相同，请用柱状图表示该组的情况　　　　　　 。

（3）依据上述结果可以得出X、Y药物对肝癌细胞的作用是： 　　　　　　　　 ．

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（14分）为研究白藜芦醇(简称Res)对胰腺癌细胞增殖的抑制作用会随着Res浓度和作用时间的增大而加强。请根据以下提供的实验材料和用具，提出实验思路，预测实验结果并进行分析。

材料和用具：培养瓶若干个、用DMSO溶液配制的浓度分别为15 μmol·L－1、30 μmol·L－1、60 μmol·L－1的Res溶液，DMSO溶液，胰腺癌细胞悬液，细胞培养液，血细胞计数板，显微镜等。(要求与说明：DMSO溶液的浓度适宜，对胰腺癌细胞的增殖无影响；实验开始时和每隔24小时对胰腺癌细胞进行计数，至少进行4次细胞计数；细胞计数的具体操作过程不作要求；实验条件适宜)

请回答：

（1）实验思路：

①__________________________________________________________________；

②__________________________________________________________________；

③__________________________________________________________________；

④__________________________________________________________________。

（2）预测实验结果(在以下坐标系中，绘制胰腺癌细胞数量变化曲线)：

（3）分析与讨论：

①某研究小组为了增加对胰腺癌细胞数的估算方法，还使用了比浊计对各组的浑浊度进行了测定，可估算培养液中的胰腺癌细胞数，培养液中癌细胞数量越多，浑浊程度_________。

②胰腺癌恶性度高，病程短，一般出现症状时已属晚期，并很快发生转移。癌细胞容易在组织间转移的原因是__________________________。

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