筛选出抗盐细菌是培育抗盐农作物的重要环节。回答下列相关问题：（1）分离抗盐细菌的土壤应来自...

筛选出抗盐细菌是培育抗盐农作物的重要环节。回答下列相关问题：

（1）分离抗盐细菌的土壤应来自____________________。

（2）培育微生物常用的培养基为牛肉膏蛋白胨培养基，如表是1000mL该培养基的营养构成，其中①指的是____________，②指的是___________。在该培养基的基础上如何改进才能用于分离抗盐细菌？________。

（3）若要对获取的抗盐细菌样液进行计数，常采用_______(填“固体”或“液体”）培养基，在牛肉膏蛋白胨培养基的组分中添加适量_________，即可得到该类培养基。统计时，通过统计培养基中菌落数即可间接计算出样液中细菌数的原因是_______________________________。

（4）最后对抗盐细菌进行观察时，区分抗盐细菌与其他细菌，可通过它们形成的菌落的形状、大小、隆起程度和_______________________等方面进行鉴别。

高三生物综合题困难题查看答案及解析

请回答下列与生物技术实践相关的问题：

（1）利用纤维素解决能源问题的关键是高性能纤维素酶的获取。科学家利用培养基从土壤中筛选出能分解纤维素的细菌，这类细菌经过大量培养后可以从中提取纤维素酶。

①土壤中富含各种微生物，将土壤浸出液接种到特定培养基上，可得到能分解纤维素的细菌，实验室中获取纯净菌种常用的接种方法有________和________。

②虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、_________________________

（2）酵母菌是一种真菌，可用于制作果酒。果汁发酵后是否产生酒精，可以用__________来检验，在酸性条件下，该物质与酒精反应呈现的颜色为________。

（3）加酶洗衣粉中有的加香精，高档洗衣粉中的香精是由植物芳香油制成的，目前从植物中提取芳香油的方法有__________ 、____________ 、____________等。

高三生物综合题中等难度题查看答案及解析

请回答下列与生物技术实践相关的问题：

（1）利用纤维素解决能源问题的关键是高性能纤维素酶的获取。科学家利用培养基从土壤中筛选出能分解纤维素的细菌，这类细菌经过大量培养后可以从中提取纤维素酶。

①土壤中富含各种微生物，将土壤浸出液接种到特定培养基上，可得到能分解纤维素的细菌，实验室中获取纯净菌种常用的接种方法有________和__________。

②虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、__________________________。

（2）某年我国某地由于柑橘大实蝇的危害，橘农遭受到了很大的损失，当地政府想尽一切办法帮助橘农尽量减少损失。某橘农发现自家有一株橘树具有抗虫性状，欲利用组织培养技术大量繁殖，对组织培养的选材非常关键，植物材料的选择直接关系到实验的成败。若用花药进行离体培养则应选择花粉发育至______期的花药培养成功率最高。确定花粉发育时期最常用的方法有______法，某些植物的花粉不易着色，需采用___________法。

（3）突变菌往往带有一些特殊的基因，在获得这些基因的过程中，PCR技术相当重要。PCR扩增反应中加入引物的作用是_________________________。

高三生物综合题中等难度题查看答案及解析

请回答下列与生物技术实践相关的问题：

（1）利用纤维素解决能源问题的关键是高性能纤维素酶的获取。科学家利用培养基从土壤中筛选出能分解纤维素的细菌，这类细菌经过大量培养后可以从中提取纤维素酶。

①土壤中富含各种微生物，将土壤浸出液接种到特定培养基上，可得到能分解纤维素的细菌，实验室中获取纯净菌种常用的接种方法有________和__________。

②虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、_________________________

（2）酵母菌是一种真菌，可用于制作果酒。

①果汁发酵后是否产生酒精，可以用__________来检验，在酸性条件下，该物质与酒精反应呈现特定的颜色。

②酵母菌细胞固定化可大大提高生产效率。固定酵母菌细胞时首先需要将干酵母放入_________中活化；若制得的凝胶珠着色过浅，可能是_________________________。

（3）突变菌往往带有一些特殊的基因，在获得这些基因的过程中，PCR技术相当重要。PCR扩增反应中加入引物的作用是_________________________。

（4）加酶洗衣粉中有的加香精，高档洗衣粉中的香精是由植物芳香油制成的，目前从植物中提取芳香油的方法有__________________________________等。

高三生物综合题中等难度题查看答案及解析

尿素是一种重要的氮肥，农作物不能将其直接吸收利用，而是通过土壤中的细菌将其分解为氮和CO2后才能被农作物利用。请回答下列问题：

（1）土壤中的某些细菌能分解尿素是因为该种细菌能合成____________。

（2）为筛选尿素分解而制备的培养基中含有的营养物质除尿素外还包括水、碳源____________等，该培养基能筛选出目的菌株的原因是________________________。

（3）一般依据尿素分解菌菌落的____________、隆起程度和颜色等特征来统计菌落数目。现将10mL尿素分解菌悬液进行梯度稀释，分别取0.1mL稀释倍数为106的样液接种到3个培养基上，培养一段时间后，统计菌落数分别为39、42、45，则1mL悬液中活细菌数量为____________个。上述过程采用的接种方法是________________________。

（4）为检验培养基及培养皿灭菌是否合格，可采取的措施是________________________。

【答案】　 脲酶　 无机盐　 只有以尿素作为唯一氮源的细菌才能在该培养基上生长　 形态、大小　 4.2×108　 稀释涂布平板法　 单独设置一个灭菌后不接种样液的培养皿（含培养基）进行培养

【解析】本题考查分解尿素的微生物的培养与计数，要求考生理解脲酶的作用，能配制合适的培养基培养细菌并进行计数。

（1）脲酶能催化尿素分解为氨气和二氧化碳，土壤中的某些细菌能分解尿素是因为该种细菌能合成脲酶。

（2）为筛选尿素分解而制备的培养基中含有的营养物质除尿素外还包括水、碳源、无机盐等，该培养基能筛选出目的菌株的原因是只有以尿素作为唯一氮源的细菌才能在该培养基上生长。

（3）一般依据尿素分解菌菌落的形态、大小、隆起程度和颜色等特征来统计菌落数目。现将10mL尿素分解菌悬液进行梯度稀释，分别取0.1mL稀释倍数为106的样液接种到3个培养基上，培养一段时间后，统计菌落数分别为39、42、45，则1mL悬液中活细菌数量为（39+42+45）30.1×106=4.2×108个；上述过程采用的接种方法是稀释涂布平板法。

（4）为检验培养基及培养皿灭菌是否合格，可单独设置一个灭菌后不接种样液的培养皿（含培养基）进行培养，若该培养皿中没有出现菌落，则说明该培养基及培养皿灭菌合格。

【点睛】易错知识点拨:

1)土壤中分解尿素的细菌筛选原理

①选择培养基的成分：尿素作为唯一的氮源

②鉴定方法：在培养基中加入酚红指示剂，若pH升高，指示剂变红，说明细菌能分解尿素

2）微生物数量统计方法：

(1)直接计数法(显微镜下用特定细菌计数板或血细胞计数板)

(2)间接计数法：稀释涂布平板法

3）两种纯化细菌的方法的比较：

【题型】非选择题
【结束】
12

干扰素是动物或人体细胞受到病毒感染后产生的一种糖蛋白，具有抗病毒、抑制细胞增殖及抗肿瘤的作用。 培育转干扰素基因马铃薯植株的大致流程如图所示。请回答下列问题：

（1）过程①中剪切质粒和目的基因时所需要的工具酶是_____________。

（2）过程②中将重组质粒导入根瘤农杆菌时，常用_____________处理根瘤农杆菌，使其成为感受态细胞，最终使干扰素基因插入马铃薯细胞的_____________上。

（3）图中过程③和过程④合称为_____________技术，该技术能体现细胞的_____________。

（4）在分子水平上检测转基因是否成功包括三个方面:________________。

高三生物非选择题困难题查看答案及解析

尿素是一种重要的氮肥，农作物不能将其直接吸收利用，而是通过土壤中的细菌将其分解为氮和CO2后才能被农作物利用。请回答下列问题：

（1）土壤中的某些细菌能分解尿素是因为该种细菌能合成____________。

（2）为筛选尿素分解而制备的培养基中含有的营养物质除尿素外还包括水、碳源____________等，该培养基能筛选出目的菌株的原因是________________________。

（3）一般依据尿素分解菌菌落的____________、隆起程度和颜色等特征来统计菌落数目。现将10mL尿素分解菌悬液进行梯度稀释，分别取0.1mL稀释倍数为106的样液接种到3个培养基上，培养一段时间后，统计菌落数分别为39、42、45，则1mL悬液中活细菌数量为____________个。上述过程采用的接种方法是________________________。

（4）为检验培养基及培养皿灭菌是否合格，可采取的措施是________________________。

高三生物非选择题中等难度题查看答案及解析

尿素是一种重要的农业氮肥，不能直接被农作物吸收，只有当土壤中的微生物将尿素分解后才能被植物吸收利用。因此，对土壤中分解尿素的微生物进行分离和鉴定具有重要意义。

回答下列问题：

（1）对土壤中分解尿素的微生物的分离过程如下：

第一步：土壤取样。取土样用的工具和盛土样的信封等在使用前都需要　　 （填“消毒”或“灭菌”）。

第二步：样品稀释。通常分离不同种类的微生物要采用不同的稀释度，原因是　　　　 。

第三步：微生物的培养与观察。将一定稀释度的样品接种在以尿素为唯一氮源的培养基上，并在适宜的条件下培养。分解尿素的微生物能在该培养基上生长繁殖，而　　　　 则不能生长繁殖。（注：实验中所用的培养基经检测符合要求，且均在无菌条件下操作）

（2）若对土壤悬液进行梯度稀释时，未经振荡而直接取上层悬液进行梯度稀释，用稀释倍数为104的样液涂布到平板上进行培养和计数，统计出的菌落数往往比正确操作统计出的菌落数　　　　　　　 。

（3）对土壤中分解尿素的微生物作进一步的鉴定

若要对上述初步筛选出的分解尿素的微生物作进一步的鉴定，需在上表培养基配方中添加的物质是　　　 、　　　　　 。若分离得到的是尿素分解菌，则培养基中pH升高使酚红指示剂变为红色，pH升高的原因是　　　　　　　　　　 。

（4）分解尿素的微生物在生态系统中的作用是　　　　　　　　 。

高三生物综合题简单题查看答案及解析

人和哺乳动物的尿中含有尿素，环境中大量尿素的存在会造成污染。土壤中有些细菌含有脲酶，可通过降解尿素作为其生长的氮源。某研究小组对土壤中的这类细菌进行分离，用以回收氮源同时净化环境。请回答下列相关问题：

(1)分离培养细菌时必须进行无菌操作。配制培养基时，灭菌与调节pH的先后顺序是____。

(2)采用________________法将样液进行一系列的梯度稀释，然后接种培养。在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在________旁进行操作。

(3)用________________培养基筛选获得能分泌脲酶的细菌，从功能上划分该培养基属于________培养基。若培养基中存在能分泌脲酶的细菌，其菌落周围会出现____________，这是由于尿素被分解产生________，遇培养基中加入的酚红指示剂产生的颜色变化，从而证明这一菌株可以尿素为氮源。变色区域越大，表明该菌株利用尿素的能力________。

高三生物非选择题简单题查看答案及解析

尿素是一种重要的氮肥，农作物不能将其直接吸收利用，而是通过土壤中的细菌将其分解为氨和CO2后才能被农作物利用。回答下列问题：

（1）土壤中的某些细菌能分解尿素，其根本原因是_________________。

（2）为筛选尿素分解菌而制备的培养基中含有的营养物质除尿素外，还包括水、碳源和____等，该培养基能筛选出目的菌株的原因是______________________。

（3）一般依据尿素分解菌菌落的______、隆起程度和颜色等特征来区分统计菌落数目。现将10mL尿素分解菌悬液进行梯度稀释，分别取0．1mL稀释倍数为106的样液接种到3个培养基上，培养一段时间后，统计菌落数分别为152、155、158，则1mL悬液中活细菌数量为_____个。上述过程采用的接种方法是________________。

（4）为检验培养基及培养皿灭菌是否合格，可采取的措施是___________________。

高三生物非选择题中等难度题查看答案及解析

生物降解法是常用的降解农药的方法，某研究小组为分离出能降解敌敌畏(一种有毒的有机农药)的细菌进行了以下相关操作。回答下列问题：

(1)分离原理：土壤中的细菌能合成___________，这种物质在把敌敌畏分解成无机物过程中发挥重要作用。

(2)实验流程：

①从富含敌敌畏的环境中釆集土样配制成土壤菌液。从稀释10倍的菌液中取1mL菌液，加入___________中，获得稀释100倍的悬液，如此操作直到稀释1000倍。

②配制以___________为唯一碳源的培养基并灭菌，灭菌后倒平板冷却后需将平板倒置，目的是_________________________________。

③用___________法接种细菌，该方法能成功统计菌落数目的关键是选择恰当的___________，统计的菌落数通常比实际数目低的原因是________________________________。

高三生物非选择题中等难度题查看答案及解析